狗源成分PCR快速检测

检测项目

线粒体细胞色素b基因、D-loop区、K9酪蛋白基因、免疫球蛋白IgE结合蛋白、犬细小病毒VP2基因、犬瘟热病毒N蛋白基因、犬腺病毒E3基因、胶原蛋白α1链、肌动蛋白β链、微卫星标记PEZ1/PEZ5、端粒酶逆转录酶基因、SRY性别决定基因、MHC-I类抗原、脂肪酸结合蛋白基因、角蛋白KRT71基因、溶菌酶基因、乳铁蛋白基因、β-防御素基因、甲状腺球蛋白基因、肌红蛋白基因、胶原蛋白COL1A1基因、转铁蛋白受体基因、胃蛋白酶原C基因、胰蛋白酶原基因、淀粉酶AMY2B基因、脂联素基因、瘦素受体基因、生长激素受体基因、Toll样受体TLR4基因

检测范围

宠物食品原料、肉骨粉添加剂、冻干犬粮主粮罐头制品零食饼干洁齿棒营养补充剂处方粮水解蛋白配方饲料添加剂动物源性饲料复合调味料香肠火腿肉松肉脯酱卤制品速冻调理食品明胶胶囊生物药品培养基实验室质控品环境拭子样本化妆品原料皮革制品羽绒填充物考古残留物法医物证样本

检测方法

实时荧光定量PCR（qPCR）：采用TaqMan探针技术，通过荧光信号累积实时监测扩增过程，内置内参基因（如18SrRNA）监控抑制效应。多重PCR同步检测：设计多组物种特异性引物体系，单次反应可鉴别犬源/猫源/牛源等多物种成分。微滴式数字PCR（ddPCR）：将反应体系分割成数万微滴进行绝对定量，适用于复杂基质中痕量DNA检测。巢式PCR扩增：通过两轮扩增提升低浓度样本检出率，首轮扩增长片段后第二轮靶向内部短序列。熔解曲线分析：采用SYBRGreen染料法，依据产物Tm值差异进行物种鉴别。引物设计遵循：靶向线粒体基因组高变区（如ND5,CYTB），引物长度18-22bp，GC含量40-60%，扩增片段80-150bp以适应降解DNA。

检测标准

GB/T38164-2019常见动物源性成分检测方法实时荧光PCR法SN/T3731.5-2017食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法第5部分：狗成分检测实时PCR法ISO20836:2021Microbiologyofthefoodchain—Polymerasechainreaction(PCR)forthedetectionofmicroorganisms—ThermalperformancetestingofthermalcyclersAOACOfficialMethod2017.08DNA-BasedIdentificationofCanine-DerivedMaterialPMMO-002:2018宠物食品中动物源性成分PCR检测指南GB/T19495.4-2018转基因产品检测核酸定量PCR检测方法ENISO24276:2006Foodstuffs-Methodsofanalysisforthedetectionofgeneticallymodifiedorganismsandderivedproducts-GeneralrequirementsanddefinitionsUSP〈1132〉NucleicAcid-BasedTechniquesfortheDetectionofAnimalOrigininDietarySupplementsJAS分析方法手册第15章动物源性成分分子生物学检测GB/T35825-2018化妆品中禁用物质检验方法

检测仪器

全自动核酸提取仪：采用磁珠法或硅膜柱法实现样本裂解、结合、洗涤与洗脱的标准化流程，通量96孔/次。实时荧光定量PCR仪：配备多通道光学检测系统（FAM/HEX/ROX/Cy5），支持熔解曲线分析及终点荧光读取。微滴生成与读取系统：通过微流控芯片产生均匀油包水微滴，每个微滴独立进行PCR扩增后计数阳性微滴数。电泳系统：含凝胶成像仪与毛细管电泳单元，用于PCR产物片段大小验证及多重PCR产物分离。超微量分光光度计：采用0.7mm光程比色皿测定DNA浓度（A260/A280）及纯度。超净工作台：提供ISO5级洁净环境防止气溶胶污染。生物安全柜：保障Ⅱ级生物安全防护操作。恒温金属浴：精确控制裂解与酶解反应温度0.5℃。高速冷冻离心机：最大转速≥15,000rpm实现细胞碎片高效沉淀。超低温冰箱：-80℃长期保存核酸样本及标准物质。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。