植物抗病基因表达量检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-06-27  

植物抗病基因表达量检测通过定量分析关键基因的RNA或蛋白水平,评估植物抗病机制。检测要点包括RNA提取纯度控制、实时荧光定量PCR验证、表达水平标准化及数据统计分析,确保结果准确反映病原响应动态。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

PR-1基因表达量:检测病原相关蛋白1的表达水平,参数包括相对表达量±0.05、检测限10 copies/μL、Ct值范围15-35。

NPR1基因表达水平:评估非表达基因1在系统获得抗性中的作用,参数包括荧光强度阈值设定0.1-1.0、扩增效率90%-110%、重复性CV≤5%。

WRKY转录因子表达量:分析转录调控因子的表达变化,参数包括引物特异性测试Tm值60-65°C、溶解曲线单峰验证、表达倍数偏差±0.1。

PAL基因表达水平:检测苯丙氨酸解氨酶基因在抗病途径中的活性,参数包括标准曲线R²≥0.99、样本稀释梯度1:10-1:1000、内参基因ΔCt值。

几丁质酶基因表达量:评估酶活性相关基因的表达,参数包括检测灵敏度1 fg/μL、线性范围10⁴-10¹⁰ copies、回收率85%-115%。

PDF1.2基因表达水平:分析防御素基因的表达动态,参数包括循环阈值精度±0.5、仪器通道选择FAM/HEX、背景荧光校正。

LOX基因表达量:检测脂氧合酶基因在氧化应激中的表达,参数包括扩增曲线斜率分析、阴性对照无扩增、Ct值差≤1。

GST基因表达水平:评估谷胱甘肽转移酶基因的表达,参数包括反应体系体积20μL、模板浓度10-100 ng/μL、熔解温度验证。

PR-5基因表达量:检测甜蛋白类病原相关基因的表达,参数包括相对定量2⁻ΔΔCt法、内参基因GAPDH、误差范围±5%。

ETR1基因表达水平:分析乙烯受体基因的表达变化,参数包括标准品浓度梯度0.1-1000 pg/μL、检测限下值确认、重复实验n≥3。

MAPK基因表达量:评估丝裂原激活蛋白激酶基因的表达,参数包括热启动Taq酶激活、退火温度优化55-60°C、数据归一化处理。

POD基因表达水平:检测过氧化物酶基因的表达,参数包括荧光探针浓度5-20 μM、Ct值截断点设置、质量控制样本验证。

检测范围

水稻抗稻瘟病基因检测:应用于育种研究,通过筛选OsWRKY45等基因表达,评估品种抗性水平。

小麦锈病抗性基因表达分析:用于田间试验,检测TaPAL或TaPR-1基因表达,支持抗病品种选育。

番茄细菌性斑点病研究:在实验室模型中,定量分析SlNPR1基因表达,探究病原响应机制。

玉米大斑病抗性基因监测:结合分子标记辅助选择,检测ZmLOX或ZmGST基因表达水平。

苹果火疫病抗性评估:用于果园管理,通过MdPR-5基因表达分析,优化病害防控策略。

棉花黄萎病基因表达检测:在纤维作物中,定量GhPDF1.2或GhETR1基因表达,评估抗性表型。

马铃薯晚疫病抗性研究:应用于块茎作物,检测StMAPK或StPR-1基因表达,支持抗病育种。

大豆花叶病毒抗性分析:在豆科作物中,定量GmWRKY或GmNPR1基因表达,评估病毒响应。

烟草花叶病毒基因表达监测:用于模型植物研究,检测NtPR-1或NtLOX基因表达动态。

蔬菜作物抗真菌基因检测:包括黄瓜或辣椒作物,分析Chi或GST基因表达,应用于温室病害管理。

果树炭疽病抗性评估:在柑橘或葡萄栽培中,定量CiPR-5或VvPAL基因表达水平。

油料作物抗病基因分析:如油菜或向日葵,检测BnMAPK或HaPDF1.2基因表达支持抗性筛选。

检测标准

依据ISO 16634-1:2008分子生物学分析方法,规范RNA提取和纯化步骤。

ASTM E2186-02a基因表达定量标准,定义实时荧光定量PCR数据验证要求。

GB/T 19495-2004植物基因检测通用规范,涵盖样本处理和表达水平评估。

ISO 21571:2005食品和饲料的分子生物学检测指南,适用于作物病原响应分析。

GB/T 3543.5-1995种子检验分子检测部分,规定抗病基因表达在育种中的应用。

ISO 20395:2018生物技术核酸定量标准,提供表达量检测的准确度控制。

GB/T 28046-2011分子诊断技术要求,确保基因表达数据的可重复性。

ASTM D6344-98基因芯片分析标准,支持高通量表达谱检测方法。

GB/T 30981-2014植物病原检测方法,整合抗病基因表达评估流程。

ISO 17025:2017测试实验室通用要求,应用于检测过程的质控体系。

检测仪器

实时荧光定量PCR仪:用于精确测量基因表达水平,功能包括热循环控制和荧光信号采集,确保Ct值准确度。

微阵列扫描仪:支持高通量基因表达谱分析,功能包括芯片成像和数据提取,实现多基因并行检测。

荧光显微镜:应用于原位杂交表达定位,功能包括激发光波长选择和图像捕获,可视化基因表达分布。

电泳系统:用于凝胶分析PCR产物,功能包括核酸分离和条带定量,验证扩增特异性。

NanoDrop分光光度计:实现快速RNA浓度测量,功能包括紫外吸光度检测,确保样本纯度达标。

离心机:用于样本预处理和核酸沉淀,功能包括转速和温度控制,提升提取效率。

恒温水浴锅:支持反应体系温育,功能包括精确温度调节,优化酶活性条件。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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