植物抗病性蛋白表达试验

检测项目

病程相关蛋白（PR）定量：采用夹心ELISA法，检测范围0.1-200 ng/mL，灵敏度达5 pg/mg鲜重。

几丁质酶活性测定：基于荧光底物4-MU-β-D-N,N',N″-三乙酰壳三糖水解，反应温度37℃，检测限0.01 U/mg蛋白。

β-1,3-葡聚糖酶动力学分析：测量还原糖释放速率，底物浓度梯度0.5-10 mM，Km值计算精度±5%。

氧化爆发强度检测：H₂O₂化学发光法，时间分辨率1秒，线性范围1-1000 nmol/g FW。

防御酶苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性：紫外分光法监测反式肉桂酸合成，波长290 nm，温控精度±0.5℃。

病程相关基因启动子结合分析：EMSA法测定转录因子结合效率，探针标记灵敏度0.1 fmol。

MAP激酶磷酸化水平：Phospho-specific抗体检测，灰度分析动态范围0-65535 AU。

活性氧清除酶SOD同工酶分离：非变性PAGE电泳，电压梯度100-150 V，可区分Cu/Zn/Mn型异构体。

植保素含量检测：HPLC-MS/MS定量分析紫檀芪、辣椒素等，保留时间偏差<0.1 min。

过敏性反应（HR）区域测定：台盼蓝染色显微成像，坏死面积计算精度±2μm²。

水杨酸信号通路蛋白互作：Co-IP结合WB验证，抗体交叉反应率<0.01%。

抗病蛋白亚细胞定位：共聚焦显微镜观察GFP融合蛋白，Z轴分辨率0.5μm。

检测范围

粮食作物抗病品系：水稻白叶枯病抗性基因Xa21表达分析，覆盖幼苗至抽穗期。

园艺作物转基因植株：番茄转NPR1基因植株的系统获得抗性（SAR）评估。

林木病原互作研究：杨树溃疡病菌诱导的PR蛋白时空表达图谱构建。

药用植物防御反应：灵芝菌丝体受到真菌侵染时的三萜类抗病物质合成监测。

模式植物突变体库筛选：拟南芥T-DNA插入系中MAPK信号通路缺陷型鉴定。

经济作物抗逆育种：棉花黄萎病抗性品种的β-1,3-葡聚糖酶活性分级。

生态修复植物评估：重金属胁迫下芦苇PAL酶活性与抗病性相关性研究。

果蔬采后病理研究：草莓灰霉病侵染过程中的几丁质酶激活动力学。

共生微生物诱导抗性：丛枝菌根真菌定植后玉米水杨酸积累量检测。

新型生物农药验证：寡糖激发子处理烟草后的HR区域定量分析。

古树种质资源评价：千年银杏内生菌诱导的植保素代谢谱分析。

检测标准

ISO 21427-1:2022 植物免疫应答蛋白的Western Blot定量规范

AOAC Official Method 994.12 植物防御酶活性分光光度测定通则

GB/T 38582-2020 植物抗病相关基因实时荧光定量PCR检测方法

ASTM E2968-14 植物病程相关蛋白ELISA检测基质效应校正规程

ISO 21701:2019 植物抗氧化酶SOD活性凝胶电泳分析方法

GB/T 40462-2021 植物水杨酸信号通路组分检测技术规范

EPPO PP 1/304 作物抗病性评价中植保素色谱检测指南

GB/T 40348-2021 植物抗病蛋白质谱鉴定通则

ISO 22036:2022 植物组织ROS荧光探针检测技术要点

检测仪器

多功能酶标仪：配备340-850 nm滤光片，支持动力学法测定防御酶活性，温控范围4-45℃。

蛋白质印迹系统：半干转印装置转移效率>90%，化学发光检测灵敏度达fg级。

三重四极杆液质联用仪：ESI离子源配合MRM扫描，实现植保素痕量检测限0.01 ppb。

激光共聚焦显微镜：405/488/561 nm三激光通道，用于抗病蛋白亚细胞定位跟踪。

非变性电泳槽：专利冷却系统保障4℃条件下SOD同工酶分离分辨率。

实时荧光定量PCR仪：六通道检测体系满足多抗病基因同步表达分析。

超灵敏化学发光成像仪：16位ADC转换芯片捕获弱信号，动态范围4.5 OD。

全自动蛋白质互作分析仪：表面等离子共振技术测定结合解离常数，精度±1RU。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。