基因编辑体细胞检测

检测项目

脱靶效应分析：通过全基因组扫描检测非目标位点突变，灵敏度达0.1%变异频率

编辑效率测定：定量目标位点indel频率，检测范围0.01%~99.9%

细胞存活率检测：CCK-8法测定编辑后细胞增殖能力，精度±2%

核型稳定性评估：Giemsa染色分析染色体结构异常，分辨率5Mbp

基因表达验证：qPCR检测编辑位点mRNA表达量，Ct值偏差<0.5

蛋白功能检测：Western Blot定量靶蛋白表达，检测限0.1ng/μL

单细胞克隆分析：有限稀释法培养，克隆形成率统计误差±1.5%

载体残留检测：ddPCR定量外源质粒片段，灵敏度1copy/10000细胞

表观遗传修饰：ChIP-seq分析组蛋白甲基化变化，覆盖率>95%

免疫原性测试：ELISA检测细胞因子释放量，线性范围1-1000pg/mL

线粒体功能评估：Seahorse检测ATP产量，数据偏差<5%

细胞凋亡率测定：Annexin V/PI双染流式检测，分辨率0.1%

检测范围

CAR-T治疗细胞：嵌合抗原受体T细胞基因修饰验证

干细胞疗法原料：多能干细胞定向分化基因编辑体

基因治疗载体：AAV病毒包装的编辑体细胞制剂

肿瘤模型构建：PDX模型源编辑肿瘤细胞系

遗传病修复细胞：β-地中海贫血HBB基因修复体

器官移植材料：基因敲除猪源细胞异种移植体

免疫细胞疗法：TCR基因编辑免疫效应细胞

生物反应器细胞：重组蛋白生产用工程化细胞株

基因功能研究：CRISPR文库筛选突变细胞池

病原体抗性细胞：HIV受体CCR5基因编辑造血细胞

基因驱动材料：疟疾防控用转基因蚊细胞系

生物传感器细胞：环境毒素检测用报告基因编辑体

检测标准

ISO 20399:2021 体细胞基因编辑脱靶效应评估规范

GB/T 39789-2021 基因编辑体细胞质量通用要求

ASTM E3135-18 基因编辑细胞稳定性测试指南

ISO 21973:2020 基因治疗产品载体残留检测方法

GB/T 40187-2021 干细胞基因组编辑质量控制

WHO TRS 1044 细胞治疗产品基因修饰评估指南

ISO 20621:2019 高通量测序编辑效率计算标准

GB/T 38506-2020 转基因生物安全评价技术规范

FDA CBER 2023 基因治疗细胞产品放行检测要点

EMA/CAT/89683/2021 先进治疗产品基因组风险评价

检测仪器

Illumina NovaSeq 6000测序仪：全基因组脱靶扫描，通量8Tb/run

BD FACSAria III流式细胞仪：单细胞分选纯度99.9%，速度25000cells/s

Agilent Bravo NGS工作站：自动化文库构建，日处理192样本

Bio-Rad QX200微滴式数字PCR仪：绝对定量检测，灵敏度0.001%

PerkinElmer Opera Phenix高内涵成像：亚细胞结构分析，分辨率0.15μm

Thermo Fisher QuantStudio 7 Pro qPCR仪：编辑效率检测，动态范围10^9

Beckman Coulter CytoFLEX S流式细胞仪：多参数凋亡分析，13色检测通道

Olympus VS200切片扫描系统：组织切片编辑位点定位，精度0.22μm/pixel

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。