石蜡提取rna检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-07-01  

本文详细阐述石蜡包埋组织RNA提取检测的技术要点,涵盖核酸完整性、纯度参数及降解控制等关键指标,适用于病理样本分子生物学分析,严格遵循ISO/IEC 17025操作规范。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

RNA浓度测定:紫外分光光度法检测260nm吸光度,线性范围5-3000ng/μL

纯度分析:A260/A280比值检测(合格范围1.8-2.1),A260/A230比值检测(>2.0)

完整性值:RIN指数评估(1-10分级),DV200值测定(>30%判定合格)

片段分布:Agilent 2100分析仪检测18S/28S核糖体峰比(≥1.5)

降解产物:qPCR扩增检测GAPDH基因3'/5'端比值(阈值≤5)

酶抑制物:逆转录效率测试,合格CT值偏差≤3个循环

石蜡残留:气相色谱法检测烷烃含量(限量≤0.1μg/mg)

DNA污染:DNase I消化后PCR检测,要求无基因组扩增

pH值检测:电极法测定提取液酸碱度(合格范围7.0-8.5)

微生物污染:16S rRNA PCR检测,要求无扩增曲线

检测范围

临床病理样本:福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织切片(厚度4-10μm)

肿瘤研究标本:乳腺癌/肺癌/结直肠癌等实体瘤存档样本

法医物证材料:陈旧性生物检材石蜡包埋块(保存期≤30年)

实验动物组织:小鼠/大鼠等模式生物病理标本库

植物病理样本:林木病害腊叶标本及种子包埋材料

古生物标本:博物馆收藏化石组织包埋样本

微生物包埋体:特殊病原体固定保存样本

细胞块制备物:体液离心沉淀石蜡包埋样本

穿刺活检标本:细针穿刺细胞学包埋样本

组织微阵列:多组织联合包埋芯片(TMA)

检测标准

ISO 20395:2019 生物技术-核酸提取质量要求

GB/T 37872-2019 分子生物学检测用石蜡包埋组织处理规范

CLSI MM19-A2 分子诊断标本制备指南

ASTM E2186-02a 核酸样本完整性评估标准

GB/T 34796-2017 核酸浓度与纯度测定方法

IEC 61010-2-101 分子检测设备安全标准

CAP MOL.36150 病理分子实验室认证条款

YY/T 1596-2017 人基因检测用样本质量要求

检测仪器

Nanodrop One超微量分光光度计:实现1μL样本浓度/纯度检测,波长精度±1nm

Agilent Bioanalyzer 2100生物分析仪:自动化电泳评估RNA完整性,分辨率3-5000nt

Covaris LE220超声破碎仪:FFPE样本解交联处理,频率精准控制>500Hz

Qiagen Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR仪:执行降解率检测,温控精度±0.1℃

Beckman Coulter Biomek i7自动化工作站:实现96孔板并行提取,移液精度0.5μL

Thermo Scientifc KingFisher Flex磁珠纯化系统:完成核酸自动分离,捕获效率>95%

Eppendorf Cryostat CM1860恒冷切片机:制备标准切片,厚度控制精度±1μm

Illumina NovaSeq 6000测序平台:全转录组质量控制,读长2×150bp

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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