细胞活性测试检测

检测项目

MTT还原率测定：通过线粒体琥珀酸脱氢酶还原黄色MTT为紫色结晶的能力，量化细胞代谢活性，检测波长570nm，线性范围10³-10⁶个细胞/mL。

台盼蓝拒染率：基于完整细胞膜排斥染料的特性，计算活细胞比例，染色浓度0.4%，计数误差<2%。

ATP含量测定：利用荧光素酶催化反应检测细胞内ATP浓度，灵敏度0.1nmol/L，反映能量代谢状态。

LDH释放率：检测细胞膜破损后胞浆乳酸脱氢酶释放量，酶标仪测定490nm吸光度，损伤阈值设定为对照组的150%。

克隆形成率：评估单细胞增殖潜能，培养周期7-14天，直径>50μm集落计为有效克隆。

钙黄绿素-AM/PI双染：活细胞标记绿色荧光（Ex/Em 495/515nm），死细胞标记红色荧光（Ex/Em 535/617nm），共聚焦显微镜定量分析。

Caspase-3活性：采用Ac-DEVD-pNA底物法检测凋亡关键酶，405nm监测pNA释放速率，活性单位nmol/min/mg蛋白。

线粒体膜电位：JC-1染料聚合态（红）与单体态（绿）荧光比值评估，流式细胞仪检测，电位崩溃判定阈值≤0.8。

EdU掺入率：5-乙炔基-2'-脱氧尿苷标记DNA合成期细胞，荧光点击化学检测，增殖指数计算精度±1.5%。

活性氧检测：DCFH-DA探针氧化生成绿色荧光二氯荧光素，流式检测FL1通道，阳性阈值>对照组均值3SD。

钙离子流监测：Fluo-4 AM染料标记，激光共聚焦动态扫描，浓度分辨率10nmol/L，采样频率5fps。

检测范围

生物医用材料：骨修复支架、人工血管等植入物的细胞相容性验证，重点关注材料浸提液对成纤维细胞的影响。

抗肿瘤药物筛选：紫杉醇类、铂类药物对HepG2、A549等肿瘤细胞系的IC₅₀测定。

干细胞疗法：间充质干细胞移植前活性评估，要求活率≥95%，克隆形成率＞70%。

化妆品原料：防晒剂、防腐剂等对HaCaT角质细胞的毒性测试，EC₅₀值判定标准。

医疗器械：血液透析膜、导管材料的细胞粘附与增殖行为观察，培养周期24-72h。

环境毒理学：重金属离子（Cd²⁺、Pb²⁺）对斑马鱼胚胎细胞的致畸效应。

基因治疗载体：腺相关病毒（AAV）转染效率验证，GFP阳性细胞流式计数。

食品添加剂：防腐剂苯甲酸钠对Caco-2肠屏障细胞的跨膜电阻影响。

疫苗开发：佐剂铝盐对树突状细胞成熟标志物CD83的表达调控。

组织工程产品：皮肤替代物中成纤维细胞增殖曲线监测，倍增时间≤36h。

纳米材料生物安全性：量子点、二氧化钛颗粒的胞吞效应及溶酶体逃逸检测。

检测标准

ISO 10993-5:2009医疗器械生物学评价第5部分：体外细胞毒性试验

GB/T 16886.5-2017医疗器械生物学评价第5部分：体外细胞毒性试验

ASTM F813-20医疗器械材料直接接触细胞培养评估规程

USP <87>体外生物反应性测试-细胞培养法

OECD TG 432体外3T3中性红摄取光毒性试验

GB/T 39760-2021细胞培养技术通用要求

ISO 19007:2018纳米技术-体外MTS法检测纳米颗粒细胞毒性

JJF 1815-2020流式细胞仪校准规范

ICH S2(R1)药物遗传毒性试验标准

EN 12442-1动物源性医疗器械风险分析通则

检测仪器

多功能酶标仪：配备震荡孵育功能，支持紫外/可见/荧光多模式检测，MTT、LDH等96孔板高通量读数，数据变异系数<3%。

倒置荧光显微镜：配置相差/荧光模块，10×-100×物镜，冷CCD相机捕获活细胞动态，适用于延时摄影观察凋亡形态。

流式细胞仪：四激光十四色检测通道，前向/侧向散射光分辨细胞粒径，FITC/PE双标记实现钙离子流实时监测。

激光共聚焦显微镜：Z轴层扫精度0.1μm，405/488/561/640nm激光组，三维重建线粒体网络结构。

细胞能量代谢分析仪：实时同步检测耗氧率（OCR）和胞外酸化率（ECAR），评估代谢表型转换。

全自动细胞计数器：台盼蓝拒染法结合图像识别，0.5μL样本3秒完成活率统计，计数范围10⁴-10⁷cells/mL。

高通量活细胞成像系统：集成CO₂温控的微孔板扫描，每板＜15分钟完成293孔荧光成像，AI辅助识别细胞分裂事件。

阻抗细胞分析仪：微电极阵列实时监测细胞贴壁阻抗变化，分辨率0.1Ω，动态反映屏障功能完整性。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。