抗氧化酶活性检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-07-10  

本文系统阐述抗氧化酶活性检测的核心要素,重点介绍检测项目参数、应用领域范围、国际国内标准及关键仪器设备。涵盖超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶等酶类的活性测定原理及参数设定,确保检测过程的科学严谨性。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

超氧化物歧化酶(SOD)活性:基于抑制硝基蓝四唑还原原理测定,参数包括酶活力单位(U/mg protein)和抑制率(50%-90%)。

谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性:采用NADPH氧化法检测,参数为酶活力(nmol/min/mg protein)和线性范围(0-100 U/mL)。

过氧化氢酶(CAT)活性:紫外分光光度法测定H2O2分解,参数包括酶活力(μmol H2O2/min/mg protein)和反应时间(1-10 min)。

谷胱甘肽还原酶(GR)活性:基于NADPH消耗速率,参数如酶活力(nmol NADPH/min/mg protein)和检测限(0.05 U/mL)。

过氧化物酶(POD)活性:愈创木酚法测定氧化反应,参数包括酶活力(ΔA470/min)和催化效率(Km值 0.1-5 mM)。

谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性:CDNB底物法检测,参数为酶活力(μmol CDNB conjugate/min/mg protein)和特异性活性(0.5-50 U/mg)。

抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性:测量抗坏血酸氧化,参数包括酶活力(μmol ascorbate/min/mg protein)和最适pH(6.0-7.0)。

硫氧还蛋白还原酶(TrxR)活性:DTNB法测定,参数如酶活力(nmol/min/mg protein)和温度系数(Q10 1.5-2.5)。

髓过氧化物酶(MPO)活性:邻联茴香胺法检测,参数包括酶活力(ΔA460/min)和底物浓度(0.1-1.0 mM)。

黄嘌呤氧化酶(XO)活性:尿酸生成法测定,参数如酶活力(μmol uric acid/min/mg protein)和抑制剂敏感性(IC50值)。

超氧化物歧化酶同工酶检测:电泳分离技术,参数包括迁移率(Rf 0.2-0.8)和条带强度(积分光密度)。

总抗氧化酶活性:综合比色法评估,参数为总活力单位(U/g sample)和相对活性指数(0-100%)。

检测范围

动物组织样本:包括肝脏、心脏等器官,用于研究氧化应激疾病机制。

植物样本:涵盖叶片、果实等部位,评估植物抗氧化防御系统。

食品饮料类:如果汁、茶叶和红酒,测定天然抗氧化成分含量。

医药制剂:药物和保健品,质量控制及功效验证。

细胞培养物:培养细胞系,研究细胞抗氧化响应。

微生物样本:细菌和酵母,生物技术应用及酶工程。

化妆品配方:护肤品和乳液,功效成分稳定性评估。

环境样本:土壤和水体,监测污染物诱导的氧化损伤。

临床诊断样品:血清和尿液,疾病生物标志物检测。

农业产品:谷物和蔬菜,品质控制及储存条件优化。

饲料添加剂:动物营养补充剂,安全性与效能分析。

生物燃料原料:植物油类,加工过程酶活性监测。

检测标准

依据ISO 17025:2017通用实验室能力要求执行。

GB/T 5009.102-2003食品抗氧化能力测定规范。

ASTM E2469-16酶活性标准测试方法。

GB/T 25876-2010水果蔬菜酶活性测定程序。

ISO 21571:2005食品中酶测定国际标准。

GB/T 23193-2008茶叶多酚氧化酶活性检测方法。

GB/T 22427.11-2008淀粉衍生物酶活力测定准则。

ISO 16649-2:2001食品微生物酶检测标准。

GB 4789.35-2016食品微生物检验通则。

ASTM D445-21a粘度测定相关酶活性评估。

检测仪器

紫外-可见分光光度计:测量光吸收变化,用于CAT和SOD活性定量分析。

荧光分光光度计:检测荧光信号,适用于GPx和APX等高灵敏度测定。

酶标仪(微孔板阅读器):高通量筛查样本,实现多孔板抗氧化酶活性并行检测。

离心机:分离细胞组分,用于样品前处理以提取酶蛋白。

恒温水浴锅:维持反应温度恒定,确保酶促反应动力学准确性。

高效液相色谱仪(HPLC):分离反应产物,用于特定酶如XO的活性精确分析。

电泳系统:分离同工酶,适用于SOD同工酶带检测。

pH计:校准反应缓冲液,保证检测环境pH稳定性。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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