流式细胞服务检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-07-11  

流式细胞服务检测利用流体动力学聚焦和光学检测技术,对单细胞悬液进行高速、多参数定量分析。核心检测要点包括细胞物理特性(大小、颗粒度)、荧光标记物表达强度、细胞周期状态、凋亡率及功能性指标(钙流、活性氧)。该技术严格遵循细胞活性控制(>95%)、荧光补偿校正和阈值设定规范,确保数据的准确性与可重复性。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

细胞表面标志物检测:定量分析细胞膜蛋白表达水平,检测参数包括阳性细胞百分比(%)、平均荧光强度(MFI)、荧光强度中位数(MedianFI),分辨率达0.1%阳性率。

细胞周期分析:通过DNA染料(如PI)结合量测定细胞周期时相分布,输出G0/G1期(%)、S期(%)、G2/M期(%)比例,CV值≤5%。

细胞凋亡检测:采用AnnexinV/PI双染法区分早期凋亡(AnnexinV+/PI-)与晚期凋亡/坏死(AnnexinV+/PI+),检测灵敏度为10³细胞/样本。

细胞内因子检测:经破膜固定后检测胞内蛋白(如细胞因子、磷酸化蛋白),使用阻断剂控制背景荧光,检测限达50分子/细胞。

细胞增殖分析:基于CFSE染料稀释法追踪细胞分裂代数,可分辨≥8次分裂事件,增殖指数计算误差±3%。

线粒体膜电位检测:采用JC-1染料评估线粒体功能状态,红绿荧光比值变化反映膜电位极化程度,动态范围0.1-100μM。

活性氧(ROS)测定:使用DCFH-DA探针检测细胞内氧化应激水平,激发/发射波长488/525nm,灵敏度10nMH₂O₂当量。

钙离子流检测:Fluo-3/AM染料实时监测胞内Ca²⁺浓度波动,采样频率达100cells/sec,时间分辨率1ms。

细胞吞噬功能分析:使用荧光微球或细菌评估吞噬活性,检测参数包括吞噬率(%)、吞噬指数(平均颗粒数/细胞),粒径检测范围0.5-10μm。

细胞绝对计数:采用计数微球内标法,实现细胞浓度精确计量(cells/μL),线性范围10²-10⁶cells/mL,RSD≤2%。

细胞大小与颗粒度分析:前向散射光(FSC)反映细胞大小(检测粒径0.2-50μm),侧向散射光(SSC)表征胞内颗粒复杂度,分辨率±0.1μm。

多色免疫分型:同步检测≥8色荧光标记,光谱补偿后各通道串扰率≤0.3%,支持30+免疫表位联合分析。

检测范围

免疫学研究:T/B/NK细胞亚群分析、树突细胞活化状态评估、调节性T细胞定量,适用于疫苗研发与自身免疫病机制研究。

肿瘤学研究:循环肿瘤细胞(CTC)检测、白血病免疫分型、肿瘤干细胞标志物筛查,覆盖实体瘤与血液系统肿瘤样本。

血液病诊断:CD34+造血干细胞计数、阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)克隆检测、微小残留病灶(MRD)监测。

药物研发:抗体药物结合位点占有率(RO)测定、ADCC/CDC效应评估、化合物细胞毒性(EC50)分析。

干细胞研究:多能性标志物(OCT4/SOX2)表达检测、分化轨迹追踪、克隆形成能力评估。

感染性疾病:HIV感染者CD4+T细胞绝对计数、病毒特异性T细胞反应检测、病原体吞噬清除效率分析。

生殖医学:精子活力与DNA碎片指数(DFI)检测、卵母细胞成熟度评估、胚胎干细胞多能性分析。

神经科学:神经干细胞分选、小胶质细胞活化状态监测、神经元钙信号传导研究。

心血管研究:血小板活化标志物(CD62P/CD63)检测、内皮细胞炎症反应分析、心肌细胞凋亡定量。

环境毒理学:污染物致细胞DNA损伤(彗星试验)、重金属离子细胞毒性、纳米颗粒胞吞效应评估。

植物生物学:原生质体活性检测、叶绿体自发荧光分析、转基因植物筛选。

检测标准

ISO15189:2022《医学实验室质量和能力要求》规范实验室管理体系与检测流程

CLSIH42-A2《流式细胞术性能验证指南》规定仪器校准与检测验证程序

ICSH/ICCS联合指南规范白血病/淋巴瘤免疫分型检测流程

GB/T39730-2020《流式细胞仪》规定仪器光学性能与检测限要求

GB/T20469-2006《临床实验室设计总则》保障生物安全与数据可靠性

ASTMF2315-18《间充质干细胞表征标准》规定干细胞表面标志物检测方案

ISO20391-1:2018《细胞计数标准》规范细胞浓度测定方法

ICHQ2(R1)指导原则验证方法学特异性与检测限

GB/T38576-2020《人类血液及血液成分流式细胞术检测》

FDAGuidanceforIndustry:BioanalyticalMethodValidation规范药物研发数据分析

检测仪器

流式细胞分析仪:配置488nm/640nm/405nm三激光发射器及12通道光电倍增管(PMT),实现≥20参数同步采集,检测速度达50,000细胞/秒,FSC检测灵敏度0.2μm。

高速分选型流式细胞仪:配备70μm/100μm/130μm可调喷嘴及液滴延迟校准系统,分选纯度≥99%,分选速度25,000细胞/秒,支持4路分选收集。

全自动样本制备系统:集成96孔板振荡混匀、离心洗涤及液体加样模块,支持抗体自动滴定与板式染色,处理通量≥96样本/批次。

微流控芯片式细胞分析仪:采用鞘流聚焦芯片技术,样本消耗量≤50μL/检测,适用于稀有样本(如脑脊液、穿刺液)分析。

质谱流式细胞仪(CyTOF):使用金属同位素标签替代荧光染料,同步检测≥40个参数,消除光谱重叠干扰,金属标签分辨率0.3Da。

光谱流式细胞仪:配备32通道高光谱探测器,通过全光谱解析技术实现40+色检测,自动补偿准确度≥99.5%。

图像流式细胞仪:整合高速CCD成像系统(40倍物镜),每秒捕获5,000细胞明场/荧光图像,支持形态学参数定量分析。

流式微球阵列系统:采用磁性编码微球技术,单样本同时检测100种可溶性因子,检测动态范围3-50,000pg/mL。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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