凝胶阻滞分析检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-07-22  

凝胶阻滞分析检测是一种分子生物学技术,用于研究核酸-蛋白质相互作用。该方法基于电泳迁移率变化,检测DNA或RNA与蛋白质结合后的迁移差异。核心要点包括结合亲和力评估、特异性分析和定量参数测定。适用于基因调控研究和生物分子相互作用验证。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

结合亲和力测定:评估蛋白质与核酸的结合强度,具体检测参数包括解离常数(Kd)和结合常数(Ka)。

特异性分析:确定蛋白质对特定核酸序列的选择性,具体检测参数包括竞争结合实验中的抑制率。

迁移率变化检测:测量核酸-蛋白质复合物在电泳中的位置偏移,具体检测参数包括迁移距离和相对迁移率。

结合动力学研究:分析结合反应的速率,具体检测参数包括结合速率常数(kon)和解离速率常数(koff)。

核酸复合物稳定性测试:评估复合物在特定条件下的耐久性,具体检测参数包括温度或pH诱导的分解率。

蛋白质-DNA相互作用分析:检测DNA结合蛋白的功能,具体检测参数包括结合位点数量和位置。

RNA-蛋白质结合检测:研究RNA与蛋白质的相互作用,具体检测参数包括结合亲和力和结构变化。

突变效应评估:分析核酸序列突变对结合的影响,具体检测参数包括结合效率变化百分比。

定量结合曲线:生成结合等温线以量化相互作用,具体检测参数包括饱和结合点和Hill系数。

竞争结合实验:测定其他分子对结合的干扰,具体检测参数包括半数抑制浓度(IC50)。

检测范围

转录因子:研究DNA结合蛋白在基因表达调控中的作用。

核糖核蛋白复合物:分析RNA与核糖体蛋白的相互作用。

病毒核酸-宿主蛋白相互作用:检测病毒核酸与宿主细胞的结合机制。

药物筛选(核酸靶点):评估药物分子对核酸-蛋白质结合的抑制效果。

基因治疗载体分析:研究载体核酸与细胞蛋白的相容性。

酶-DNA相互作用:检测酶类如限制性内切酶与DNA的催化结合。

RNA干扰复合物:分析siRNA或miRNA与蛋白质的沉默机制。

表观遗传调控研究:评估DNA甲基化或组蛋白修饰的相互作用。

病原体检测:用于细菌或病毒核酸的蛋白结合诊断。

生物传感器开发:优化传感器中核酸-蛋白质界面设计。

检测标准

ISO 17025 实验室能力要求标准,涵盖核酸相互作用检测的通用规范。

ASTM E2694 核酸结合分析标准方法,规定迁移率变化实验参数。

GB/T 5009.1 食品安全检测基础标准,适用于食品中核酸污染物分析。

EN ISO 15189 医学实验室质量指南,包括分子相互作用验证程序。

ICH Q2(R1) 分析方法验证标准,确保结合定量结果可靠性。

ISO 10993-5 生物相容性测试标准,涉及医疗器械中核酸相互作用评估。

GB/T 27404 实验室质量控制规范,支持检测过程标准化。

检测仪器

垂直电泳系统:用于分离核酸-蛋白质复合物,功能包括凝胶运行和电压控制。

紫外透射仪:检测核酸在凝胶中的位置,功能包括荧光成像和定量分析。

化学发光检测系统:可视化低丰度复合物,功能包括信号放大和背景抑制。

凝胶成像分析仪:捕获和测量电泳结果,功能包括图像处理和迁移率计算。

微量移液器:精确加样核酸和蛋白质,功能包括体积控制和污染预防。

恒温摇床:维持反应条件,功能包括温度调节和混合均匀性。

离心机:分离样品组分,功能包括转速设定和沉淀物收集。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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