双向凝胶电泳检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-07-23  

双向凝胶电泳检测是一种高分辨率蛋白质分离技术,用于分析复杂生物样品中的蛋白质组成。该方法结合等电聚焦和SDS-PAGE步骤,实现基于等电点和分子量的双重维度分离。核心检测要点包括凝胶均匀性、聚焦效率、染色灵敏度、图像分辨率及蛋白质点量化精度等关键参数。确保操作规范性和数据可重复性。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

等电聚焦分离效率:评估蛋白质在pH梯度中的聚焦程度。具体检测参数包括梯度稳定性、聚焦时间及电压曲线。

SDS-PAGE分辨率:测量凝胶分离分子量的能力。具体检测参数涉及凝胶孔径一致性、分子量标准迁移率及条带清晰度。

蛋白质点数量统计:量化凝胶图像中可识别蛋白质点总数。具体检测参数包括检测灵敏度下限、点密度阈值及图像分析算法精度。

凝胶变形度评估:检测凝胶在电泳过程中的物理形变。具体检测参数包括收缩率百分比、表面平坦度及边缘完整性。

背景噪音水平:分析凝胶染色后的非特异性信号干扰。具体检测参数涉及染色均匀性、背景光密度值及信噪比阈值。

蛋白质迁移一致性:检验相同样品多次电泳的重复性。具体检测参数包括迁移距离标准偏差、点位置偏移量。

蛋白质定量准确性:验证凝胶上蛋白质点浓度测量可靠性。具体检测参数涵盖线性范围、检测限及校准曲线拟合度。

凝胶保存稳定性:评估电泳后凝胶的长期存储性能。具体检测参数涉及干燥时间、湿度耐受性及图像退化速率。

图像扫描质量:测量凝胶数字化图像的清晰度。具体检测参数包括分辨率设置、动态范围及色彩保真度。

蛋白质点识别率:检验软件自动识别蛋白质点能力。具体检测参数包含算法误检率、漏检率及形状匹配精度。

缓冲液pH稳定性:监控电泳缓冲系统的酸碱度变化。具体检测参数涉及pH波动范围、校准频率及温度依赖性。

样品加载重现性:评估相同样品多次加载的一致性。具体检测参数包括点样体积误差、扩散半径变异系数。

检测范围

血清蛋白质分析:生物医学研究中用于疾病标志物筛查的样品。

细胞裂解物蛋白质分离:分子生物学实验中提取细胞内蛋白质的混合物。

组织样本蛋白质表达:病理学中分析器官或肿瘤组织的蛋白质组成。

微生物蛋白质组:微生物学中研究细菌或真菌的蛋白质谱。

植物蛋白质提取物:农业科学中检测植物叶片或种子的蛋白质变化。

药物筛选相关样品:药理学中评估药物对蛋白质表达的影响。

生物标志物发现:临床诊断中识别新型疾病指示蛋白质的应用。

临床诊断样本:医院实验室中分析患者体液如尿液或脑脊液。

食品蛋白质检测:食品安全中鉴定肉类或乳制品中的蛋白质成分。

环境污染物蛋白质分析:环境监测中研究污染物对生物蛋白质的影响。

病毒蛋白质组:病毒学中分析病毒颗粒的蛋白质结构。

发酵产物蛋白质:生物技术中监控发酵过程中的蛋白质表达动态。

检测标准

ISO16140:2016微生物学方法验证协议。

GB/T27404-2008实验室质量控制规范检测和校准。

ASTME2524-08凝胶电泳标准实践指南。

ISO17025:2017检测和校准实验室能力通用要求。

GB/T19001-2016质量管理体系要求。

ISO9001:2015质量管理体系基础标准。

GB/T33238-2016生物样品蛋白质分离技术要求。

ISO15189:2012医学实验室质量和能力要求。

ASTMD445-21粘度测量标准方法。

GB/T601-2016化学试剂标准滴定溶液制备。

检测仪器

双向凝胶电泳系统:设备用于执行等电聚焦和SDS-PAGE分离步骤。功能包括集成温度控制和电压调节。

等电聚焦装置:仪器用于建立pH梯度并聚焦蛋白质。功能涉及梯度形成和电流稳定输出。

SDS-PAGE电泳槽:设备用于分子量维度的凝胶电泳分离。功能涵盖凝胶固定和缓冲液循环。

凝胶染色仪:仪器用于可视化凝胶上的蛋白质点。功能包括染色液均匀涂布和孵育时间控制。

图像扫描系统:设备用于数字化捕获凝胶图像。功能涉及高分辨率成像和光密度校准。

蛋白质分析软件:工具用于量化凝胶图像中的蛋白质点。功能包括点检测和浓度计算算法。

pH计:仪器用于监测缓冲液酸碱度稳定性。功能涉及高精度pH测量和温度补偿。

离心机:设备用于样品预处理去除杂质。功能包括转速调节和沉淀分离。

恒温槽:仪器用于控制电泳过程温度一致性。功能涵盖温度范围设定和稳定性监测。

紫外可见分光光度计:设备用于蛋白质定量前浓度测定。功能涉及吸光度测量和标准曲线建立。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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