脲酶活性检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-08-08  

脲酶活性检测基于尿素水解反应,评估酶催化效率。关键要点包括反应动力学参数测量、环境因素控制及终点产物定量分析。检测涉及标准方法、仪器校准和样品预处理,确保数据准确性和可重复性。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

尿素水解速率:测定单位时间内脲酶催化尿素分解的量。参数:反应时间0-60分钟、温度控制25-55C。

初始反应速度:计算酶与底物结合初期速率。参数:时间间隔5分钟、底物浓度0.1-5.0mmol/L。

酶活性单位定义:量化酶催化能力。参数:国际单位IU定义、标准曲线拟合。

温度依赖性:评估酶活性随温度变化特性。参数:梯度测试10-60C、热稳定性分析。

pH敏感性:测量酶在酸碱环境中的稳定性。参数:pH范围4.0-9.0、缓冲溶液配制。

底物特异性:验证脲酶对尿素的选择性。参数:相似底物对照实验、Km值计算。

抑制剂影响:分析抑制剂对酶活性的影响。参数:抑制剂浓度梯度、IC50测定。

产物积累量:定量水解生成的氨和二氧化碳。参数:氨浓度检测范围0-100ppm、气体体积测量。

酶浓度响应:建立酶量与活性的线性关系。参数:稀释倍数0.1-10倍、标准曲线斜率。

反应终点判定:确定反应停止点。参数:时间点监控、终止剂用量。

重现性验证:评估多次检测结果的偏差。参数:标准差计算、重复次数≥3。

基质干扰测试:分析样品中杂质对检测的影响。参数:干扰因子去除率、空白对照设定。

检测范围

土壤样品:评估微生物脲酶活性在农业土壤健康中的应用。

尿液标本:医疗诊断中尿素代谢异常的检测材料。

谷物产品:食品安全监控谷物中天然或添加脲酶含量。

饲料添加剂:动物饲料中酶制剂活性验证。

工业酶制剂:生物技术生产纯化酶产品的质量控制。

食品加工原料:如豆制品中脲酶残留检测。

环境水样:水质监测中尿素污染源分析。

微生物培养物:细菌或真菌菌株的酶活性筛选。

临床诊断试剂:体外诊断试剂盒的酶活性校准。

废水处理样本:生物处理系统中酶效率评估。

植物组织提取物:研究植物中脲酶分布及功能。

药物制剂:药品辅料中酶活性稳定性测试。

检测标准

ISO13965:1997肉制品中脲酶活性测定方法

GB/T18631-2018饲料添加剂酶活性测定通用方法

ASTME2315酶活性标准测试指南

ISO11269土壤质量微生物活性测量规程

GB/T4789.29食品微生物学检验酶活性试验

AOAC991.20食品中脲酶活性官方方法

GB/T5009.184食品中尿素酶活性测定

ISO20614临床体外诊断酶活性校准规范

ASTMD4129水质尿素分析方法

GB/T23783工业酶制剂活性测定通则

检测仪器

紫外-可见分光光度计:测量反应中氨生成引起的吸光度变化,用于计算酶活性。

pH计:监控反应过程中酸碱度变化,确保反应条件稳定性。

恒温振荡器:维持反应混合物的恒定温度和均匀混合,支持动力学测试。

气相色谱仪:定量分析尿素水解产生的二氧化碳气体,用于终点产物检测。

离心机:分离样品中的固体杂质,制备澄清液用于酶活性分析。

微量移液器:精确添加试剂和样品,确保体积准确度在1%以内。

恒温水浴锅:控制反应温度在设定范围,精度0.5C。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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