谷胱甘肽还原酶循环法测定检测

检测项目

谷胱甘肽还原酶（GR）活性：测定样品中GR催化氧化型谷胱甘肽（GSSG）还原为还原型谷胱甘肽（GSH）的能力，单位为U/L，测量范围1~1000U/L，精度±5%。

氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量：定量样品中GSSG的浓度，单位为μmol/L，检测下限0.1μmol/L，线性范围0.1~100μmol/L。

还原型谷胱甘肽（GSH）含量：通过循环反应间接计算GSH含量，单位为μmol/L，测量范围1~500μmol/L，回收率90%~110%。

NADPH消耗速率：监测反应中NADPH的氧化速率，反映GR活性，单位为nmol/min，时间分辨率0.1min，检测范围0.1~100nmol/min。

谷胱甘肽总量（GSH+GSSG）：通过还原反应将GSSG转化为GSH后定量，单位为μmol/L，线性范围1~1000μmol/L，相对标准偏差≤3%。

酶比活性：计算GR活性与蛋白质含量的比值，单位为U/mg，蛋白质测定采用Lowry法，精度±4%。

反应体系pH稳定性：检测不同pH条件下GR活性的变化，pH范围5.0~9.0，步长0.5，活性保留率≥80%为稳定。

底物亲和力（Km值）：测定GR对GSSG的米氏常数，单位为μmol/L，检测范围1~100μmol/L，拟合误差≤5%。

抑制剂效应：评估抑制剂对GR活性的抑制率，抑制剂浓度范围0.1~100μmol/L，抑制率计算精度±2%。

样品基质干扰：检测血浆、血清、植物提取物等基质对GR活性测定的影响，干扰率≤10%为可接受。

检测范围

临床生物样品：包括人血清、血浆、红细胞裂解液、尿液等，用于评估氧化应激状态。

食品原料：如小麦粉、大豆蛋白、葡萄籽提取物等，检测其中谷胱甘肽相关指标。

药物制剂：抗氧化药物（如谷胱甘肽片）、抗肿瘤药物等，监测药物对GR活性的影响。

动植物组织：动物肝脏、肾脏、植物叶片、果实等，研究生物体内氧化还原代谢。

微生物样品：细菌、酵母、真菌培养液等，评估微生物抗氧化系统功能。

化妆品原料：维生素C衍生物、茶多酚等抗氧化成分，检测其对GR活性的增强作用。

环境样品：水体、土壤提取物等，监测环境污染物对生物体内GR活性的影响。

饲料添加剂：硒酵母、维生素E等，评估其对动物体内谷胱甘肽代谢的调节作用。

细胞培养液：肿瘤细胞、干细胞等，研究细胞氧化应激反应机制。

中药提取物：黄芪、当归、枸杞等，检测其抗氧化活性成分对GR的影响。

检测标准

GB/T 5009.124-2016 食品中谷胱甘肽的测定。

ISO 13732-1:2017 动植物油脂 谷胱甘肽还原酶活性的测定 第1部分：分光光度法。

ASTM E1233-20 生物样品中谷胱甘肽还原酶活性的标准试验方法。

GB/T 23201-2008 保健食品中谷胱甘肽的测定。

ISO 23906-1:2021 临床化学 谷胱甘肽还原酶活性测定 第1部分：循环法。

GB/T 18654.12-2008 养殖水体中谷胱甘肽还原酶活性的测定。

ASTM D7582-15 环境样品中谷胱甘肽总量的标准试验方法。

GB/T 32694-2016 化妆品中谷胱甘肽的测定 高效液相色谱法。

ISO 1897-10:2005 纸浆和造纸 谷胱甘肽还原酶活性的测定。

GB/T 20365-2006 饲料中谷胱甘肽的测定 荧光分光光度法。

检测仪器

紫外可见分光光度计：用于监测反应体系中NADPH在340nm处的吸光度变化，计算GR活性，波长精度±0.5nm，吸光度范围0~2.5AU。

酶标仪：支持96孔板高通量检测，用于批量样品的GR活性测定，检测波长340nm，读板速度≤1s/孔。

电子天平：用于精确称量反应试剂（如GSSG、NADPH），最大称量200g，精度0.1mg。

恒温水浴锅：维持反应体系温度恒定（通常37℃），温度精度±0.1℃，浴槽容量≥5L。

高速离心机：用于分离生物样品中的细胞成分（如红细胞裂解液），最大转速15000rpm，离心力≥20000×g。

pH计：用于调整反应体系的pH值，pH测量范围0~14，精度±0.01pH。

移液器：用于准确移取反应试剂和样品，量程10μL~1000μL，精度±1%。

涡旋混合器：用于混匀反应体系，转速范围0~3000rpm，振荡方式连续/脉冲。

超纯水机：制备实验用超纯水（电阻率≥18.2MΩ·cm），用于配制试剂和稀释样品。

低温冰箱：用于保存易降解试剂（如NADPH）和生物样品，温度范围-20℃~-80℃，温度波动±1℃。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。