迁移相关lncRNA功能验证检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-08-13  

本文系统阐述迁移相关lncRNA功能验证检测的核心项目、应用范围、执行标准及仪器配置。重点涵盖细胞迁移分析、基因表达定量、信号通路验证等关键环节,确保检测过程的科学性、重复性和数据可靠性。检测参数包括迁移率、表达量、互作蛋白等量化指标,适用于多种生物样本和研究模型。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

细胞迁移检测:通过Transwell或伤口愈合实验评估lncRNA对细胞运动能力的影响。具体检测参数:迁移细胞百分比、平均迁移距离(μm)、迁移抑制率。

lncRNA表达水平分析:采用实时荧光定量技术测定目标lncRNA丰度。具体检测参数:相对表达量(fold change)、Ct值阈值、扩增效率(%)。

基因敲低验证:利用RNA干扰技术沉默lncRNA表达。具体检测参数:敲低效率(%)、siRNA浓度梯度(nM)、沉默持续时间(小时)。

过表达功能测试:构建表达载体诱导lncRNA高表达。具体检测参数:过表达倍数、载体转染效率(%)、表达稳定性指数。

蛋白质互作分析:通过免疫共沉淀识别与lncRNA结合的蛋白。具体检测参数:互作蛋白数量、结合亲和力(Kd值)、特异性结合率(%)。

信号通路激活检测:评估lncRNA对迁移相关通路如Wnt或MAPK的调控。具体检测参数:磷酸化水平(相对单位)、通路分子表达比、激活阈值。

细胞增殖监测:使用比色法检测lncRNA对细胞分裂的影响。具体检测参数:增殖率(%)、IC50值(μM)、时间-剂量曲线。

细胞周期分布分析:通过DNA染色量化细胞周期阶段。具体检测参数:G1/S/G2期细胞比例(%)、周期阻滞指数。

凋亡率测定:采用荧光标记法检测细胞程序性死亡。具体检测参数:凋亡细胞百分比、早期/晚期凋亡比、caspase活性(U/mg)。

体内转移验证:在动物模型中观察肿瘤转移过程。具体检测参数:转移灶数量、病灶大小(mm²)、侵袭深度评分。

转录组变化分析:通过高通量测序鉴定差异表达基因。具体检测参数:差异基因数、富集通路P值、表达相关性系数。

功能拯救实验:在敲低模型中进行lncRNA回补。具体检测参数:迁移恢复率(%)、表型逆转阈值。

检测范围

人类癌细胞系:包括乳腺癌、肺癌等上皮来源细胞,用于体外迁移机制研究。

正常体细胞模型:如成纤维细胞或内皮细胞,作为迁移功能对照样本。

临床肿瘤组织样本:取自手术或活检,分析原位迁移相关lncRNA表达谱。

转基因动物模型:如肿瘤异种移植小鼠,评估体内迁移和转移表型。

干细胞分化系统:胚胎或诱导多能干细胞,研究发育迁移过程。

免疫细胞迁移模型:T细胞或巨噬细胞,用于炎症或免疫应答迁移验证。

药物筛选平台:测试迁移抑制剂或激动剂的功效。

基因治疗载体:病毒或非病毒载体,验证其在迁移调控中的功能效率。

生物材料界面:如聚合物支架,观察细胞在材料表面的迁移行为。

诊断试剂盒组分:用于迁移相关lncRNA检测的体外诊断产品。

研究数据集:已发表文献中的迁移表型数据,进行独立验证。

病理学样本库:归档石蜡包埋组织,用于回顾性迁移标志物分析。

检测标准

ISO 10993-5 医疗器械生物学评价第5部分:体外细胞毒性试验。

ASTM E2523 细胞迁移体外检测方法标准指南。

GB/T 16886.1 医疗器械生物学评价第1部分:风险管理过程中的评价与试验。

ISO 15189 医学实验室质量和能力的要求。

GB/T 27407 实验室质量控制规范 分子生物学检测。

ISO 17025 检测和校准实验室能力的通用要求。

GB/T 19001 质量管理体系要求。

ISO 13485 医疗器械质量管理体系用于法规的要求。

GB/T 24001 环境管理体系要求及使用指南。

ASTM F2900 细胞培养分析标准实践。

检测仪器

实时荧光定量PCR系统:配备多通道荧光检测模块,用于精确量化lncRNA表达水平,支持熔解曲线分析。

倒置荧光显微镜:集成高分辨率摄像系统,用于细胞迁移动态观察和图像采集,具备时间序列记录功能。

流式细胞分析仪:采用激光散射和荧光检测技术,用于细胞周期、凋亡率及表面标记物定量分析。

多功能酶标仪:覆盖紫外-可见光及荧光波长范围,用于细胞增殖、毒性及代谢活性检测,支持动力学模式。

超速离心机:配备温控转子,用于样本预处理中的细胞分离和核酸纯化,转速范围0-100,000 rpm。

细胞培养工作站:集成CO2调控和湿度控制,用于无菌细胞培养和迁移实验维持,温度精度±0.5°C。

电泳成像系统:配备凝胶文档分析软件,用于蛋白质或核酸分离结果的可视化和定量。

高通量测序平台:基于边合成边测序技术,用于全转录组分析,通量达100 Gb/run。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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