基因表达定量检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-08-13  

基因表达定量检测是一种测定细胞内特定基因RNA表达水平的分子生物学技术。核心专业要点包括样本RNA提取质量、逆转录效率、定量方法选择(如PCR或测序)、参数精确计算(如阈值周期或覆盖率)、数据分析流程标准化。确保结果可靠需严格控制实验条件、内参基因使用和重复性验证。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

qRT-PCR检测:实时荧光定量聚合酶链反应技术用于相对基因表达量测定。具体检测参数包括扩增曲线斜率、阈值周期(Ct值)计算、熔解曲线峰值验证、内参基因标准化系数。

RNA测序检测:高通量平行测序方法用于全转录组覆盖分析。具体检测参数包括读长分布、基因覆盖率百分比、差异表达倍数、序列比对效率、背景噪音阈值。

微阵列分析:基于核酸杂交的芯片技术检测多基因表达谱。具体检测参数包括信号强度比值、背景校正因子、探针特异性验证、标准化转换值。

Northern印迹检测:电泳分离杂交技术用于RNA大小和丰度测量。具体检测参数包括条带强度量化、分子量标准比较、杂交信号背景比、曝光时间优化。

数字PCR检测:分区扩增方法实现绝对基因拷贝数测定。具体检测参数包括阳性分区计数、拷贝浓度计算、分区均匀性评估、终点荧光阈值。

Nanostring检测:分子条形码直接计数技术用于RNA分子定量。具体检测参数包括条形码计数数据、背景信号校正、杂交效率系数、标准化因子。

原位杂交检测:组织或细胞定位技术可视化RNA表达分布。具体检测参数包括荧光信号强度、空间分辨率分析、背景消减值、染色对比度。

RT-LAMP检测:等温扩增方法用于快速基因表达定量。具体检测参数包括扩增反应时间、荧光上升曲线、阈值设定值、内控验证。

SAGE检测:序列标签捕获技术分析基因表达频率。具体检测参数包括标签丰度计算、链接酶效率验证、文库深度评估、频率标准化。

CAGE检测:5'端捕获方法用于转录起始点定量。具体检测参数包括5'端序列计数、启动子识别率、覆盖深度参数、背景过滤阈值。

检测范围

临床诊断样本:人体血液、组织活检或体液样本用于疾病相关基因分析。

药物筛选应用:细胞模型或动物样本评估候选化合物对基因调控影响。

农业生物技术:转基因作物或植物样本检测抗性或响应基因表达。

环境微生物学:土壤、水体或空气样本监测微生物群落基因活动。

基础生物学研究:细胞培养或组织切片样本探索基因调控机制。

法医鉴定:生物样本用于身份或来源验证的基因表达特征分析。

食品安全测试:食品产品样本检测污染物或转基因成分表达。

兽医诊断:动物组织或血液样本用于疾病诊断的基因表达评估。

生物制药开发:生产过程中细胞系样本监控关键基因表达水平。

癌症研究:肿瘤组织样本分析差异基因表达以支持疗法开发。

检测标准

ISO 20395:2019 生物技术核酸定量方法性能要求。

ASTM E2066-00(2016) 微阵列基因表达数据分析和报告指南。

GB/T 37877-2019 高通量测序数据质量控制评估规范。

ISO 15189 医学实验室质量和能力通用要求。

GB/T 15634-2008 基因芯片术语和技术基础。

ISO 17025 检测和校准实验室能力通用准则。

EN 12697 分子诊断实验室操作规程框架。

GB/T 27401 实验室质量控制规范基因检测部分。

检测仪器

实时荧光定量PCR仪:监测聚合酶链反应中的荧光变化。功能包括温度梯度控制、实时信号采集、阈值周期计算、熔解曲线分析。

高通量测序平台:执行大规模平行DNA序列读取。功能包括文库制备优化、碱基调用精度评估、序列覆盖深度测量、数据质量控制。

微阵列扫描装置:捕获芯片杂交信号图像。功能包括荧光波长检测、图像分辨率调整、信号强度量化、背景噪音校正。

荧光显微镜系统:可视化标记RNA在样本中的位置。功能包括高倍率成像、荧光通道选择、信号强度测量、空间分布映射。

数字化PCR分析设备:分区反应单元进行绝对量化。功能包括液滴或微孔分区生成、终点荧光计数、拷贝数计算、分区均匀性验证。

分光光度测量仪器:评估RNA浓度和纯度。功能包括紫外吸光度检测、260/280 nm波长比值计算、样本浓度定量、杂质干扰校正。

电泳分离系统:用于RNA大小分离在印迹技术中。功能包括凝胶电泳运行、核酸迁移速率控制、条带位置记录、分子量标准校准。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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