致病菌核酸提取效率检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-08-14  

致病菌核酸提取效率检测是评估从生物样本中提取细菌核酸(DNA或RNA)效率的专业流程。该检测量化提取核酸的浓度、纯度、完整性和回收率,确保分子诊断的准确性。关键要点包括样本裂解效果、抑制剂去除能力、核酸产量测定和提取试剂性能评估。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

核酸浓度测定:评估提取核酸的绝对浓度水平。具体检测参数包括紫外分光光度法在260nm波长测量吸光度,输出浓度值(ng/μl)。

核酸纯度分析:检测核酸样本中蛋白质或有机物残留。具体检测参数包括A260/A280比值计算,理想范围1.8-2.0。

核酸完整性检测:评估核酸分子结构的完整性和降解程度。具体检测参数包括凝胶电泳分析片段大小分布和条带清晰度。

抑制剂残留检测:识别样本中影响下游分析的抑制物质。具体检测参数包括PCR扩增效率测定和抑制率计算。

提取效率评估:量化核酸回收率相对于理论值的比例。具体检测参数包括加标回收实验和百分比回收率计算。

样本裂解效率:评估细胞壁或膜破裂的彻底性。具体检测参数包括显微镜观察裂解细胞比例和释放核酸量。

DNA/RNA产量测定:测量总核酸产出量。具体检测参数包括荧光定量法绝对定量输出值(ng)。

PCR兼容性测试:验证提取核酸用于扩增的适用性。具体检测参数包括Ct值测定和扩增曲线斜率分析。

交叉污染评估:检测样本间核酸残留污染风险。具体检测参数包括阴性对照样本PCR结果和污染率统计。

储存稳定性测试:评估提取核酸在存储条件下的降解速率。具体检测参数包括时间点浓度变化和降解指数计算。

检测范围

临床样本:血液、尿液、痰液等人体来源样本用于致病菌检测。

食品样本:肉类、乳制品、果蔬等检测食源性致病菌污染。

环境样本:水体、土壤、空气颗粒物等环境介质中的细菌核酸提取。

药品样本:疫苗、注射液等无菌产品中细菌污染监控。

化妆品样本:护肤品、洗护用品等微生物安全评估。

动物样本:家畜组织、分泌物等兽医诊断应用。

植物样本:农作物叶片、根部等植物病原菌检测。

工业样本:发酵剂、生物制剂等生产过程质量控制。

法医样本:生物痕迹物证中细菌DNA分析。

研究样本:实验室培养菌株用于方法开发验证。

检测标准

ISO22174:2005:食品微生物学分子生物学方法一般要求和定义。

GB/T37868-2019:核酸检测用核酸提取试剂盒通用技术要求。

ASTME1873-97:核酸纯度的标准测试方法指南。

GB4789.41-2016:食品微生物学检验核酸提取方法通则。

ISO17822:2020:体外诊断试剂核酸提取性能评估指南。

GB/T34776-2017:分子生物学检测核酸提取纯化方法规范。

ASTME2695-09:核酸样本质量控制的标准实践。

GB/T35889-2018:临床样本核酸提取试剂盒技术要求。

ISO20395:2018:生物技术核酸定量方法性能要求。

GB/T35402-2017:环境样本微生物核酸提取检测方法。

检测仪器

紫外分光光度计:测量核酸样本的光吸收特性。功能包括读取260nm吸光度计算浓度和A260/A280比值。

荧光定量仪:量化核酸分子数量和纯度。功能包括荧光染料标记样本检测绝对浓度和抑制物影响。

凝胶电泳系统:分离和分析核酸片段大小。功能包括可视化评估核酸完整性和降解程度。

离心机:分离核酸从溶液中的沉淀物。功能包括高速旋转去除杂质和浓缩核酸样本。

核酸提取仪:自动化完成裂解、结合、洗涤和洗脱步骤。功能包括标准化操作提高提取效率和回收率。

PCR仪:扩增核酸用于兼容性测试。功能包括运行温度循环程序验证提取核酸的扩增性能。

显微镜:观察样本裂解效果和细胞结构。功能包括高倍率检查裂解效率和残留细胞比例。

微量分光光度计:小体积样本浓度测定。功能包括纳升级别吸光度测量减少样本消耗。

振荡器:混合样本和试剂促进裂解。功能包括均匀振动加速细胞壁破裂。

恒温孵育器:控制反应温度优化提取过程。功能包括维持恒定温度提升裂解和结合效率。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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