蛋白酶福林法检测

检测项目

蛋白酶活性测定：定量分析样品中蛋白酶催化酪蛋白水解的能力参数：反应温度37±0.5℃，显色波长660nm。

福林试剂稳定性验证：评估显色试剂的储存有效期与批次一致性参数：避光保存4℃，有效期30天。

酪氨酸标准曲线标定：建立显色强度与酪氨酸浓度的线性关系参数：线性范围0-100μg/mL，R²≥0.995。

酶促反应动力学参数：测定最适反应pH值及米氏常数参数：pH梯度6.0-8.5，Km值计算精度±5%。

底物浓度优化：确定酪蛋白饱和浓度点参数：浓度梯度0.2%-2.0% (w/v)。

显色时间控制：量化显色反应终止时间精度参数：时间误差±5秒，显色稳定性15分钟。

反应终止液有效性：验证三氯乙酸终止反应的彻底性参数：残留酶活≤0.5%。

温度敏感性分析：评估反应体系温度波动对酶活的影响参数：温控精度±0.1℃。

干扰物质筛查：检测还原糖类物质对显色的干扰参数：葡萄糖耐受阈值≤0.1mg/mL。

方法检出限验证：确定最低可定量酶活性单位参数：LOD 0.05 U/mL。

检测范围

食品加工用酶制剂：发酵食品添加剂中蛋白酶活性监控。

洗涤剂工业酶：洗衣粉、洗碗剂中碱性蛋白酶含量测定。

饲料添加剂：动物饲料复合酶制剂的品质控制。

药用蛋白酶：溶菌酶等药品原料的活性标定。

皮革处理剂：脱毛工艺中酶制剂的效力评估。

废水处理生物酶：有机质降解酶的活性监测。

科研用酶：实验室蛋白酶标准品活性验证。

化妆品原料：蛋白水解类活性成分的功效检测。

纺织工业用酶：牛仔布生物抛光工艺酶活性测试。

农业生物制剂：作物抗病诱导蛋白酶活性分析。

检测标准

ISO 14902:2001 动物饲料-蛋白酶活性测定方法

GB/T 23527-2009 蛋白酶制剂活性测定通用方法

AOAC Official Method 2000.01 食品中蛋白酶活性检测

ISO 20776-1:2019 临床实验室检测标准

GB 1886.174-2016 食品安全国家标准 食品工业用酶制剂

USP<81> 酶活性测定通则

ISO 21572:2019 食品分子生物标记物检测规范

GB/T 28715-2012 饲料添加剂酸性蛋白酶活力的测定

检测仪器

紫外可见分光光度计：测量660nm波长处显色产物的吸光度值，分辨率0.001Abs。

恒温水浴振荡器：维持酶促反应体系37℃恒温环境，温控精度±0.1℃。

精密电子天平：称量酪蛋白底物及标准品，量程200g，精度0.1mg。

pH计：校准反应缓冲体系酸碱度，测量范围0-14，精度±0.01。

微量移液器：精确移取50-1000μL反应液，误差≤0.5%。

离心机：分离反应终止后的沉淀物，转速区间300-12000rpm。

恒温培养箱：福林试剂避光显色反应环境控制，温度范围4-60℃。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。