荧光薄膜核酸定量检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-09-26  

荧光薄膜核酸定量检测是一种基于荧光标记技术的核酸浓度测定方法,通过检测荧光信号强度实现核酸的精确定量。该检测方法涉及灵敏度、线性范围、重复性等关键参数,确保检测结果的准确性和可靠性,适用于生物医学研究和临床诊断领域。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

灵敏度检测:评估检测方法能够可靠识别的最低核酸浓度水平,通常通过系列稀释样本测定,确保在低浓度下信号与噪声比符合要求,避免假阴性结果。

线性范围检测:确定检测方法在特定浓度区间内信号与核酸浓度呈线性关系的范围,通过标准曲线验证,保证定量结果的准确性和可重复性。

重复性检测:在相同条件下多次测量同一样本,计算结果的变异系数,评估检测方法的一致性,确保操作过程中的随机误差控制在可接受范围内。

特异性检测:验证检测方法对目标核酸序列的专一识别能力,排除非特异性结合或交叉反应的影响,提高检测结果的可靠性。

准确性检测:通过比较检测结果与参考标准值之间的偏差,评估方法的系统误差,确保定量数据真实反映样本的实际核酸浓度。

密度检测:分析同一操作者在短期内多次测量的结果离散程度,反映检测方法的随机误差水平,为实验室质量控制提供依据。

检测限测定:确定方法能够区分背景噪声的最小核酸浓度,通过统计计算信噪比阈值,保障低浓度样本的检测有效性。

定量限测定:界定方法能够进行准确定量的最低浓度点,基于精度和准确性要求设定,适用于痕量核酸分析。

稳定性检测:评估核酸样本在存储或处理过程中荧光信号的变化情况,确定检测时间窗口,防止因降解导致结果偏差。

干扰物质影响检测:分析常见污染物如蛋白质、盐离子等对荧光信号的干扰程度,优化样本前处理步骤,提高检测抗干扰能力。

检测范围

DNA样本定量检测:应用于基因组DNA、质粒DNA等纯化样本的浓度测定,为PCR、测序等下游实验提供准确的核酸量值基础。

RNA样本定量检测:针对总RNA或mRNA样本进行荧光定量,确保RNA完整性评估和反转录实验的可靠性,避免降解影响。

病毒核酸检测:用于临床样本中病毒RNA或DNA的定量分析,支持病原体载量监测和疾病诊断,要求高灵敏度和特异性。

细菌核酸检测:涉及环境或临床样本中细菌基因组DNA的定量,应用于微生物鉴定和丰度研究,需排除宿主DNA干扰。

法医样本检测:对微量DNA样本进行定量,用于个体识别和亲缘分析,要求方法具有高灵敏度和抗污染能力。

食品样本核酸检测:检测食品中转基因成分或病原微生物核酸,确保食品安全监控,需处理复杂基质干扰。

环境样本检测:定量水或土壤样本中的微生物核酸,应用于生态研究,要求方法适应低浓度和杂质环境。

细胞培养物检测:对细胞裂解液中的核酸进行定量,支持细胞生物学实验,需快速且避免细胞碎片影响。

血浆游离核酸检测:定量血液中循环肿瘤DNA等微量核酸,用于无创产前诊断或癌症监测,要求极高灵敏度。

组织样本检测:对福尔马林固定石蜡包埋组织提取的核酸定量,应用于病理研究,需克服固定剂引起的降解问题。

检测标准

ISO 20395:2019《生物技术-核酸定量方法的要求》:规定了核酸定量检测的一般原则和方法验证要求,包括线性、精度等参数,适用于荧光薄膜等基于光学的检测技术。

GB/T 37872-2019《核酸定量检测方法通用要求》:中国国家标准,明确了核酸定量检测的样本处理、仪器校准和结果计算规范,确保检测过程的可比性。

ASTM E2935-2013《核酸浓度测定的标准指南》:提供了核酸定量方法的选择和验证框架,涵盖荧光检测等技术的性能评估指标。

ISO 22174:2019《分子生物学检测用核酸提取和纯化》:涉及核酸定量前的样本制备标准,要求纯化后核酸质量满足荧光检测的灵敏度需求。

GB/T 34796-2017《核酸浓度测定用荧光染料法》:详细规定了荧光染料法进行核酸定量的操作步骤和质控要求,适用于薄膜基检测平台。

ISO 17025:2017《检测和校准实验室能力的通用要求》:为核酸定量实验室提供质量管理体系标准,确保检测结果的可追溯性和准确性。

GB/T 27407-2010《实验室质量控制规范》:规定了检测方法验证的内部质量控制措施,适用于荧光核酸定量实验的重复性和准确性监控。

检测仪器

荧光分光光度计:通过测量样本在特定波长下的荧光强度实现核酸定量,具备高灵敏度和宽动态范围,适用于各种浓度样本的快速检测。

微孔板读取器:采用多通道荧光检测系统,可同时处理多个样本,提高检测通量,适用于高通量筛查和批量样本分析。

实时荧光定量PCR仪:结合PCR扩增和荧光信号采集,实现核酸的绝对定量,具有高精度和实时监控功能,支持动力学分析。

核酸定量分析仪:专为核酸检测设计的集成设备,自动化样本加载和信号读取,减少人为误差,确保检测结果的重复性。

紫外-可见分光光度计:基于核酸紫外吸收特性进行定量,提供快速浓度估算,常作为荧光检测的辅助验证工具。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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