蛋白质纯化检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-10-10  

蛋白质纯化检测是生物技术领域的关键质量控制过程,专注于评估纯化后蛋白质样品的各项参数。检测要点包括纯度分析、浓度测定、活性评估、分子量确认及稳定性测试等,确保蛋白质的完整性、功能性和安全性。该方法基于标准化协议,适用于药物开发、食品工业及科学研究,提供客观、可重复的检测结果。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

蛋白质纯度检测:通过高效液相色谱或毛细管电泳等技术定量分析样品中目标蛋白质的相对含量,以百分比表示纯度,确保非目标蛋白和杂质低于可接受水平,为后续应用提供可靠基础。

蛋白质浓度检测:采用紫外吸收法或BCA法等技术测定蛋白质溶液的浓度,基于标准曲线计算准确值,确保样品稀释和加样的一致性,避免实验误差。

蛋白质分子量测定:使用SDS-PAGE或质谱技术分析蛋白质的分子大小,通过与标准品比较确定表观分子量,评估蛋白质的聚合或降解状态。

蛋白质等电点测定:通过等电聚焦电泳或毛细管等电聚焦方法确定蛋白质的等电点,了解其在特定pH条件下的电荷特性,用于纯化策略优化。

蛋白质活性检测:利用酶动力学或细胞培养等方法评估蛋白质的生物学功能,测量特定反应速率或效应,确保蛋白质在应用中的有效性。

蛋白质稳定性检测:通过加速老化或温度循环实验分析蛋白质在储存或运输条件下的变化,监测聚集、沉淀或活性损失,评估保质期。

蛋白质聚集状态分析:采用动态光散射或尺寸排阻色谱技术检测蛋白质寡聚体或聚集体的形成,评估样品的均一性和安全性。

蛋白质修饰检测:使用质谱或免疫印迹方法鉴定磷酸化、糖基化等翻译后修饰,了解蛋白质的结构变化和功能调控。

蛋白质序列验证:通过Edman降解或质谱测序技术确认蛋白质的氨基酸序列,确保与预期序列一致,避免突变或错误表达。

蛋白质功能验证:采用结合实验或信号通路分析评估蛋白质的特定相互作用或生物学效应,为药物开发或研究提供功能证据。

检测范围

重组蛋白质产品:通过基因工程表达生产的蛋白质,常用于生物制药或研究试剂,需检测纯度、活性和稳定性以确保质量。

酶制剂:工业或诊断用酶类蛋白质,如水解酶或氧化还原酶,检测其催化活性和热稳定性,适用于食品加工或生物催化。

抗体药物:单克隆或多克隆抗体用于治疗疾病,检测其亲和力、特异性和聚集状态,保证疗效和安全性。

疫苗抗原:蛋白质亚单位疫苗中的抗原成分,需检测纯度、免疫原性和稳定性,用于预防传染病。

诊断试剂蛋白:用于免疫检测或生物传感器的蛋白质,如抗原或标记蛋白,检测其灵敏度和特异性,确保诊断准确性。

食品蛋白质:食用或添加剂中的蛋白质,如乳清蛋白或大豆蛋白,检测营养成分和过敏原含量,符合食品安全标准。

工业酶:应用于洗涤剂或纺织业的酶类,检测其耐温性和底物特异性,提高工业过程效率。

研究用蛋白质标准品:实验室用于校准或对照的蛋白质样品,检测其浓度和均一性,保证实验可重复性。

细胞培养上清液:生物反应器中表达的蛋白质粗提物,检测目标蛋白含量和杂质水平,用于纯化过程监控。

组织提取物:从动植物组织分离的蛋白质混合物,检测特定蛋白的丰度和完整性,适用于生物标记物研究。

检测标准

ISO 21572:2019《食品中蛋白质的测定方法》:国际标准化组织发布的标准,规定了食品样品中蛋白质含量的测定程序,包括凯氏定氮法和光谱法,确保结果可比性。

GB/T 5009.5-2016《食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》:中国国家标准,详细描述了食品中蛋白质的检测方法,基于氮含量换算,适用于各类食品基质。

ISO 17025:2017《检测和校准实验室能力的通用要求》:国际标准,涵盖蛋白质检测实验室的质量管理体系,确保检测过程的准确性和可靠性。

USP 〈1055〉《生物技术衍生制品-蛋白质》:美国药典章节,提供蛋白质药物的检测指南,包括纯度、活性和杂质分析,用于药品质量控制。

GB/T 34809-2017《生物制品中蛋白质含量测定方法》:中国国家标准,针对生物制品的蛋白质浓度检测,采用紫外吸收或Lowry法,保证药物一致性。

检测仪器

紫外-可见分光光度计:仪器通过测量蛋白质溶液在280纳米波长处的吸光度,快速估算蛋白质浓度,基于酪氨酸和色氨酸的吸收特性,适用于高通量筛选。

高效液相色谱仪:采用高压泵和色谱柱分离蛋白质组分,检测纯度并定量杂质,配备紫外或荧光检测器,用于精确分析复杂样品。

质谱仪:通过电离和质荷比分析确定蛋白质分子量和序列,提供高分辨率数据,用于修饰鉴定和结构表征。

电泳系统:包括SDS-PAGE或等电聚焦装置,基于电场分离蛋白质,可视化条带评估分子量或等电点,常用于实验室常规检测。

酶标仪:微孔板读取器测量吸光度或荧光信号,用于蛋白质活性或结合实验,实现快速、多样品并行检测。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
北检(北京)检测技术研究院
北检(北京)检测技术研究院