多肽甲基化检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-10-10  

多肽甲基化检测是生物化学分析中的关键技术,用于精确测定多肽链中特定氨基酸残基的甲基化修饰状态。该检测过程强调样品处理的标准化、仪器分析的准确性以及数据解读的可靠性,涉及多种专业方法如质谱分析和色谱分离,以确保结果的可重复性和科学性。关键检测要点包括甲基化位点的鉴定、修饰程度的定量以及质量控制措施的实施。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

甲基化位点鉴定:通过高分辨率质谱技术确定多肽序列中发生甲基化的具体氨基酸位置,确保检测结果能够准确反映修饰状态,为后续功能研究提供基础数据支持。

甲基化程度定量:采用定量质谱或色谱方法测量多肽中甲基化修饰的相对或绝对含量,评估修饰水平的变化,以满足生物标志物发现或药物开发的需求。

甲基化类型分析:区分单甲基化、二甲基化和三甲基化等不同修饰类型,使用特异性抗体或质谱碎片分析,以全面了解修饰的化学特性及其生物学意义。

样品纯度检测:通过电泳或色谱技术评估多肽样品的纯净度,去除杂质干扰,确保甲基化检测结果不受非目标成分影响,提高分析准确性。

检测限和定量限测定:评估检测方法的最低检测限和定量限,确定方法灵敏度,适用于低丰度甲基化多肽的分析,保证结果在可靠范围内。

重复性测试:在相同条件下多次进行甲基化检测,计算结果的变异系数,验证方法的稳定性和可重复性,减少操作误差带来的偏差。

特异性验证:通过对照实验或交叉反应测试,确认检测方法仅针对甲基化修饰响应,排除其他类似修饰的干扰,确保结果的特异性。

稳定性评估:考察多肽样品在储存或处理过程中甲基化状态的稳定性,模拟实际条件,评估修饰是否易受环境因素影响。

交叉反应测试:检测方法对其他常见修饰如乙酰化或磷酸化的反应程度,确保甲基化检测不受非目标修饰干扰,提高方法选择性。

方法验证:全面验证检测方法的准确性、精密度和线性范围,依据国际指南进行参数评估,确保方法适用于多种应用场景。

检测范围

生物制药中的多肽药物:用于治疗疾病的多肽类药品,需检测甲基化修饰以评估药物稳定性、效价和安全性,确保符合 regulatory 要求。

临床诊断样本:来自患者血液或组织的多肽样本,通过甲基化检测辅助疾病诊断,如癌症生物标志物的发现与验证。

科研用重组多肽:实验室合成的多肽材料,用于基础研究,检测甲基化以探索蛋白质功能修饰机制和细胞信号通路。

食品中的多肽添加剂:食品工业中使用的多肽成分,需评估甲基化状态以确保食品安全性和营养价值,防止有害修饰积累。

环境样品中的多肽污染物:环境监测中提取的多肽物质,检测甲基化以评估污染来源和生态影响,支持环境健康研究。

化妆品中的多肽成分:护肤品或化妆品中添加的多肽,需分析甲基化修饰以保障产品稳定性和功效,满足化妆品安全标准。

农业生物技术产品:农业应用中涉及的多肽类生物制剂,检测甲基化以优化作物抗逆性或产量,促进可持续农业发展。

兽医药品:动物医疗中使用的多肽药物,通过甲基化检测确保药品质量和疗效,保障动物健康和食品安全。

法医样本:法医学中提取的多肽证据,检测甲基化以辅助个体识别或案件调查,提高证据的可靠性。

工业酶制剂:工业过程中使用的多肽酶类,分析甲基化状态以评估酶活性和稳定性,优化生产工艺和效率。

检测标准

ISO 21316:2019《生物技术 多肽中翻译后修饰的检测指南》:国际标准化组织发布的标准,提供了多肽甲基化等修饰检测的一般原则和方法验证要求,适用于科研和工业应用。

GB/T 37864-2019《生物样品中蛋白质修饰检测方法通则》:中国国家标准,规定了多肽甲基化检测的基本技术要求和质量控制措施,确保检测过程的规范性。

ASTM E2935-2013《蛋白质组学中修饰分析的标准实践》:美国材料与试验协会标准,涵盖多肽甲基化检测的样品制备和数据分析指南,促进方法一致性。

ISO 10993-18:2020《医疗器械生物学评价 第18部分:降解产物定性与定量》:涉及多肽类材料的修饰检测,适用于医疗器械中甲基化多肽的安全性评估。

GB/T 35882-2018《食品安全国家标准 食品中蛋白质修饰的测定》:中国食品安全标准,包括多肽甲基化检测方法,用于食品添加剂和污染物的监控。

检测仪器

质谱仪:高分辨率质谱仪器能够精确测定多肽的分子量和碎片离子,用于甲基化位点鉴定和定量分析,提供高灵敏度和准确性数据。

高效液相色谱仪:通过色谱柱分离多肽样品,与检测器联用实现甲基化多肽的纯化和定量,适用于复杂样品基质中的修饰分析。

核磁共振谱仪:利用核磁共振技术分析多肽结构,检测甲基化修饰的化学环境变化,提供原子级分辨率的结构信息。

酶标仪:高通量检测仪器,结合特异性抗体或荧光探针,用于快速筛查多肽甲基化水平,支持大规模样本分析。

毛细管电泳仪:基于电泳分离原理,快速分析多肽样品中的甲基化修饰,具有高分离效率和低样品消耗特点。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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