大肠杆菌定性检测

检测项目

样本采集与处理：依据样品类型制定标准化采集方案，确保样本代表性与无菌操作，避免交叉污染，为后续检测提供可靠基础。

增菌培养步骤：将样本接种于选择性增菌培养基，在特定温度下培养一定时间，促进大肠杆菌繁殖，提高检测灵敏度。

选择性分离培养：使用显色培养基或选择性平板进行划线分离，通过菌落形态和颜色特征初步区分目标菌，减少杂菌干扰。

革兰氏染色镜检：对分离菌株进行革兰氏染色，显微镜下观察细菌形态和染色特性，辅助判断是否为革兰氏阴性杆菌。

生化鉴定试验：进行吲哚、甲基红、VP和柠檬酸盐等系列生化反应，根据代谢特性确认大肠杆菌的生物学特征。

血清学分型鉴定：采用特异性抗血清进行凝集试验，鉴定大肠杆菌的O抗原和H抗原型别，用于流行病学追踪。

分子生物学检测：通过PCR技术扩增特异性基因片段，快速准确鉴定大肠杆菌，适用于高通量筛查和确认。

免疫学快速检测：利用抗体抗原反应原理，采用ELISA或胶体金试纸条进行快速初筛，操作简便且耗时短。

质控菌株对照：在检测过程中同步使用标准菌株作为阳性对照，确保试剂和方法的有效性与可靠性。

结果判读与记录：根据培养特性、生化反应和鉴定结果综合判读，详细记录检测数据，形成完整报告。

检测范围

饮用水及水源水：包括自来水、井水、河流湖泊等水体，检测大肠杆菌可评估水质卫生状况，预防水源性疾病的传播。

各类食品样品：涵盖生鲜果蔬、乳制品、肉禽水产等食品，检测用于监控生产加工过程的微生物污染风险。

药品及原料药：对非无菌药品和制药用水进行大肠杆菌检查，确保药品安全符合药典微生物限度要求。

化妆品及个人护理品：检测膏霜、乳液等产品中是否污染大肠杆菌，保障消费者使用安全，防止皮肤感染。

医疗器材与器具：针对接触黏膜或创伤表面的医疗器械，进行无菌检查前的指示菌检测，控制生物负荷。

环境表面样本：采集工作台面、设备设施等环境拭子，评估卫生清洁效果，预防交叉污染。

动物饲料及原料：检测饲料产品中大肠杆菌，监控饲料卫生质量，避免通过食物链传播病原菌。

土壤及沉积物样本：环境监测JianCe测土壤和大肠杆菌指标，反映环境污染程度和生态健康状况。

空气沉降菌样本：在洁净区域通过沉降法采集空气微生物，评估空气洁净度，适用于GMP环境监控。

临床检验样本：包括粪便、尿液等临床标本，检测大肠杆菌辅助诊断肠道感染或尿路感染疾病。

检测标准

ISO 16654:2001《微生物学 食品和动物饲料中大肠杆菌O157的检测》：规定采用增菌和分离培养法检测O157血清型大肠杆菌，适用于食品链安全监控。

GB 4789.3-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》：中国国家标准规定乳糖发酵法进行定性和定量检测，广泛用于食品行业。

ASTM D5392-93《标准测试方法 水中大肠杆菌的检测》：美国材料与试验协会标准，提供多管发酵和膜过滤法检测水中大肠杆菌。

ISO 9308-1:2014《水质 大肠杆菌和大肠菌群的检测和计数》：国际标准规范膜过滤和酶底物法，用于饮用水和地表水监测。

GB/T 5750.12-2006《生活饮用水标准检验方法 微生物指标》：中国标准详细规定滤膜法和大肠菌群检验方法，保障饮水安全。

USP <61>《非无菌产品微生物检查》：美国药典章节规定大肠杆菌作为特定指示菌的检测方法，适用于药品质量控制。

ISO 21528-2:2017《微生物学 食品和动物饲料中肠杆菌科检测》：包含大肠杆菌鉴定流程，用于食品微生物风险评估。

GB 14963-2011《食品安全国家标准 蜂蜜》：附属微生物限量要求，规定蜂蜜中大肠杆菌不得检出，确保产品卫生。

EN ISO 6887-1:2017《微生物学 食品和动物饲料样品制备》：欧洲标准规范样品匀浆和稀释方法，为大肠杆菌检测提供前处理指南。

GB 4789.38-2012《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠埃希氏菌计数》：专门规定大肠杆菌定量方法，采用显色培养基进行快速鉴定。

检测仪器

生物安全柜：提供二级生物安全防护环境，通过垂直层流和高效过滤器保护操作者和样本，防止微生物气溶胶扩散。

恒温培养箱：具备温度控制功能，维持稳定培养条件（如37℃），用于样本增菌和细菌培养，确保微生物生长一致性。

PCR扩增仪：通过热循环技术扩增特定DNA片段，实现大肠杆菌快速分子鉴定，具有高灵敏度和特异性。

酶标仪：采用光吸收或荧光检测原理，读取微孔板反应信号，用于ELISA等免疫学方法的定量或定性分析。

显微镜：配备油镜和光源系统，放大观察细菌形态和染色结果，辅助初步鉴定和结果确认。

自动菌落计数仪：集成图像采集和分析软件，自动统计平板菌落数量，提高计数效率和准确性。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。