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基因表达时序特性研究
北检院检测中心 | 完成测试:次 | 2026-01-05
注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。
检测项目
总RNA提取与质量评估:采用酚氯仿法或硅胶膜柱法分离样本中的总RNA,并通过微流体芯片技术精确测定RNA完整性数值及浓度纯度,确保下游测序或芯片实验数据的可靠性。
mRNA文库构建:利用寡核苷酸磁珠特异性富集真核生物mRNA的polyA尾巴,经过片段化、逆转录及接头连接等步骤,构建适用于高通量测序的双链cDNA文库。
高通量转录组测序:应用下一代测序平台对文库进行深度测序,生成覆盖转录组全长的短读长或长读长序列数据,用于定量各时间点的基因表达水平。
基因表达定量分析:将测序获得的原始读数与参考基因组进行比对,使用标准化算法计算每个基因在每个时间点的 reads count 或 FPKM/TPM 值,构建基因表达矩阵。
差异表达基因鉴定:基于负二项分布模型对多个时间点的表达量数据进行统计学检验,识别在不同时间点间表达水平发生显著变化的基因集合。
时序表达模式聚类分析:应用K-means、层次聚类或非负矩阵分解等算法,将具有相似表达动态趋势的基因归类,揭示共调控模块。
基因功能富集分析:对特定聚类模式下的基因集合进行GO功能注释和KEGG通路分析,阐释其参与的生物学过程、分子功能及代谢路径。
启动子顺式作用元件分析:提取差异表达基因上游启动子区域序列,利用数据库预测转录因子结合位点,探讨时序调控的潜在分子机制。
共表达网络构建:基于基因间表达量的相关性计算,构建加权基因共表达网络,识别高度互联的基因模块及其关键枢纽基因。
qRT-PCR验证实验:针对关键差异表达基因设计特异性引物,通过实时荧光定量PCR技术对部分测序结果进行独立验证,确认时序表达模式的准确性。
检测范围
动物胚胎发育样本:涵盖小鼠、斑马鱼、果蝇等模式生物从受精卵到器官形成关键期的一系列连续或间断采集的胚胎组织样本。
植物胁迫响应组织:包括水稻、拟南芥等作物在干旱、高盐、病虫害等生物与非生物胁迫处理下不同时间点采集的根、叶组织。
细胞周期同步化培养物:针对HeLa、酵母等可通过化学或物理方法实现周期同步化的细胞系,在周期各时相点收取的细胞样品。
检测流程
线上咨询或者拨打咨询电话;
获取样品信息和检测项目;
支付检测费用并签署委托书;
开展实验,获取相关数据资料;
出具检测报告。
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