药物相互作用抑制评估

检测项目

CYP450同工酶抑制筛选：评估受试药物对细胞色素P450酶家族主要亚型（如CYP1A2， 2C9， 2C19， 2D6， 3A4）活性的直接抑制作用。

时间依赖性抑制评估：检测药物是否通过代谢活化形成活性中间体，对CYP450酶产生不可逆或准不可逆的抑制。

转运体抑制试验：评估药物对关键外排和摄取转运体（如P-gp， BCRP， OATP1B1/1B3）功能的影响。

血浆蛋白结合率测定：分析药物与血浆蛋白（主要是白蛋白和α1-酸性糖蛋白）的结合程度，评估其对游离药物浓度的影响。

代谢稳定性测试：在肝微粒体或肝细胞中测定药物的代谢速率，间接预测其发生相互作用的潜力。

反应表型分析：鉴定负责药物代谢的主要CYP450酶，明确相互作用可能发生的具体通路。

IC50/ Ki值测定：定量测定抑制剂的半数抑制浓度（IC50）和抑制常数（Ki），用于量化抑制强度。

酶动力学研究：通过Lineweaver-Burk等图解法，确定抑制类型（可逆竞争性、非竞争性、反竞争性）。

基因多态性影响评估：考察药物代谢酶或转运体的基因变异对抑制相互作用程度的影响。

代谢物抑制潜力筛查：评估药物主要代谢产物是否具有抑制酶或转运体的活性。

检测范围

I相代谢酶系统：主要涵盖细胞色素P450超家族，是大多数药物相互作用的发生场所。

II相代谢酶系统：包括尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶、谷胱甘肽S-转移酶等，评估其被抑制的风险。

肠道上皮细胞转运体：重点评估药物对肠道吸收过程中关键转运体的抑制，影响口服生物利用度。

肝胆系统转运体：评估对肝脏摄取和胆汁排泄相关转运体的抑制，影响药物的肝清除和胆汁排泄。

肾小管转运体：评估对肾脏主动分泌和重吸收过程相关转运体的抑制，影响药物的肾清除。

血脑屏障转运体：针对中枢神经系统药物，评估对血脑屏障上P-gp等外排泵的抑制。

治疗窗狭窄的药物：如华法林、地高辛、免疫抑制剂等，其血药浓度微小变化即可导致严重不良反应，是评估重点。

高蛋白结合率药物：对于蛋白结合率高于90%的药物，需重点评估因蛋白结合位点竞争引发的相互作用。

前药与活性代谢物：评估抑制剂对前药活化过程或其活性代谢物进一步代谢的影响。

多药联合治疗方案：模拟临床实际，评估在多种药物共存情况下的复杂相互作用网络。

检测方法

肝微粒体温孵法：使用人或动物肝微粒体与探针底物共孵育，通过测定代谢产物生成速率来评估酶活性抑制。

重组人CYP450酶法：利用表达单一CYP同工酶的重组体系进行抑制筛选，结果特异性高。

新鲜或冻存肝细胞培养法：在更接近生理环境的完整细胞模型中评估药物对代谢和转运的抑制。

Caco-2细胞模型：利用人结肠癌细胞模型评估药物对肠道透性和P-gp等转运体的抑制效应。

膜囊泡转运实验：使用过表达特定转运体的膜囊泡，直接测定药物对该转运体ATP酶活性或底物摄取的影响。

荧光或发光底物法：采用高灵敏度的荧光或发光探针底物进行高通量抑制筛选。

液相色谱-质谱联用分析法：作为金标准方法，准确定量探针底物及其代谢产物的浓度变化。

Cocktail探针底物法：将多种酶的特异性探针底物混合同时给药，一次性评估对多个CYP酶的抑制作用。

生理药代动力学建模与模拟：整合体外抑制数据，通过PBPK模型预测体内药物相互作用的程度。

临床药物相互作用研究：在健康志愿者或患者中进行对照试验，直接观测联合用药后的药代动力学变化。

检测仪器设备

高效液相色谱仪：用于分离和定量分析孵育体系或生物样本中的药物及其代谢物。

三重四极杆质谱仪：与HPLC联用，提供高选择性、高灵敏度的定量分析能力，是PK研究的核心设备。

多功能酶标仪：配备荧光、化学发光和紫外-可见光检测模块，用于高通量筛选实验的信号读取。

恒温振荡培养箱：为肝微粒体、肝细胞等体外温孵实验提供精确控制的温度和气相环境。

超高效液相色谱仪：提供更快的分析速度和更高的分离度，适用于复杂样本的高通量分析。

细胞培养系统：包括生物安全柜、CO2培养箱等，用于维持Caco-2、转染细胞等体外模型的生长。

液体处理工作站：实现温孵实验中试剂添加、样本转移等步骤的自动化，提高通量和重复性。

-80°C超低温冰箱：用于长期稳定保存肝微粒体、重组酶、肝细胞等生物试剂及实验样本。

PH计与精密天平：确保缓冲液配制和药物称量的准确性，是实验体系稳定的基础。

生理药代动力学模拟软件：如GastroPlus， Simcyp等，用于将体外数据外推至人体，预测临床DDI风险。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。