分子互作表面等离子共振测试

检测项目

亲和力测定：精确测量生物分子间相互作用的结合强度，通常以平衡解离常数（KD）表示。

结合动力学分析：实时监测结合与解离过程，获取结合速率常数（ka）和解离速率常数（kd）。

特异性验证：确认目标分子间的相互作用是特异的，排除非特异性结合的干扰。

浓度测定：利用已知活性的分子，通过SPR信号间接测定溶液中未知样品的活性浓度。

表位作图：鉴定抗体所识别的抗原上的具体结合区域，或竞争性结合分析。

热力学参数分析：通过在不同温度下进行实验，推导相互作用的焓变（ΔH）和熵变（ΔS）。

多价态相互作用研究：分析具有多个结合位点的分子（如抗体、多聚体蛋白）的协同结合效应。

小分子化合物筛选：快速筛选与固定化靶蛋白结合的小分子候选药物。

蛋白与核酸相互作用：研究转录因子、RNA结合蛋白等与DNA或RNA之间的特异性结合。

脂膜体系下的互作研究：在模拟细胞膜的脂质双分子层环境下，研究膜蛋白或与膜相关分子的相互作用。

检测范围

抗体-抗原互作：应用于免疫学研究和治疗性抗体药物的开发与表征。

蛋白-蛋白互作：研究信号通路、复合物组装等生命过程中蛋白质间的相互作用网络。

受体-配体互作：分析细胞表面受体与其配体（如激素、细胞因子）的结合特性。

酶-底物/抑制剂互作：用于酶学机理研究和药物筛选，分析酶与底物或抑制剂的结合动力学。

核酸-蛋白互作：涵盖DNA-蛋白和RNA-蛋白的相互作用，是基因调控研究的重要工具。

小分子-靶蛋白互作：在药物发现早期阶段，评估小分子先导化合物与疾病靶点的结合能力。

细胞/病毒-蛋白互作：将整个细胞或病毒颗粒作为分析物，研究其与固定化蛋白的粘附作用。

碳水化合物-凝集素互作：研究糖生物学中糖链与凝集素等结合蛋白的特异性识别。

脂类-蛋白互作：分析脂质分子与蛋白质（如脂质结合蛋白）之间的相互作用。

材料-生物分子互作：评估纳米材料、生物传感器表面与蛋白质、DNA等生物分子的吸附与结合情况。

检测方法

直接结合法：将一种分子固定于芯片表面，另一种分子以溶液形式流过，直接监测其结合与解离。

捕获法：先在芯片表面固定捕获分子（如抗体、链霉亲和素），再特异性捕获目标配体进行分析物检测。

竞争/抑制法：将靶分子固定，使分析物与溶液中的竞争剂同时或先后流过，通过信号抑制程度评估竞争剂效力。

多循环动力学分析：在每个浓度分析物结合-解离后，进行芯片表面再生，循环测试多个浓度以获得动力学数据。

单循环动力学分析：在不进行再生的单个连续进样循环中，依次注入递增浓度的分析物，减少再生步骤的潜在影响。

浓度梯度分析：通过微流控系统形成连续的分析物浓度梯度，在一次进样中获取多个浓度点的结合信息。

表位分组/竞争实验：将不同抗体固定于不同通道，观察它们与同一抗原的结合是否相互竞争，以判断表位关系。

pH依赖性扫描：在不同pH值的缓冲液条件下进行结合实验，评估相互作用对pH的敏感性。

温度依赖性扫描：在系列温度下进行实验，用于计算相互作用的热力学参数。

稳定性测试：长时间监测固定化分子的信号基线漂移，评估其在流动相中的稳定性。

检测仪器设备

SPR光学检测单元：核心光学部件，通常基于棱镜耦合或光栅耦合结构，用于激发SPR并检测反射光强度的变化。

微流体系统：包含精密的泵、阀和管路，用于控制样品和缓冲液以稳定流速流经传感器芯片表面。

传感器芯片：通常为镀有金膜的玻璃基片，金膜表面修饰有化学基质层（如羧基葡聚糖），用于固定生物分子。

自动进样器：实现多个样品的高通量、自动化进样，减少人为操作误差并提高效率。

温控系统

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。