粗多糖致敏性测试

检测项目

皮肤刺激性测试：评估粗多糖样品对皮肤局部是否产生红斑、水肿等急性刺激性反应。

皮肤致敏性测试（豚鼠最大值试验）：通过皮内诱导和局部激发，观察豚鼠皮肤过敏反应，评估潜在致敏性。

细胞毒性测试（MTT法）：检测粗多糖对淋巴细胞或肥大细胞等免疫相关细胞的增殖抑制毒性。

组胺释放测定：定量检测粗多糖刺激肥大细胞或嗜碱性粒细胞释放组胺的含量，反映速发型过敏反应潜力。

特异性IgE抗体检测：通过免疫学方法检测动物或人体血清中是否产生针对粗多糖的特异性IgE抗体。

细胞因子谱分析：检测粗多糖刺激免疫细胞后，IL-4、IL-5、IL-13等Th2型细胞因子的分泌水平变化。

补体激活试验：评估粗多糖是否通过经典或旁路途径激活补体系统，引发过敏样反应。

被动皮肤过敏反应（PCA）：将致敏动物血清被动转移至正常动物皮内，再静脉注射抗原激发，观察局部血管通透性增加情况。

黏膜刺激性测试：评估粗多糖对口腔、眼结膜等黏膜组织的刺激性，适用于相关剂型产品。

全身过敏性试验（主动全身过敏反应，ASA）：通过腹腔或静脉注射致敏和激发，观察动物是否出现抓鼻、呼吸困难、休克等全身过敏症状。

检测范围

食源性粗多糖：如香菇多糖、枸杞多糖、灵芝多糖等从食用菌、植物中提取的粗制多糖产品。

药用粗多糖：用于中药制剂或作为药物辅料的各类动植物及微生物来源粗多糖。

化妆品用粗多糖：添加于护肤品、面膜等化妆品中作为保湿剂或功能成分的粗多糖原料。

保健食品粗多糖：各类声称具有免疫调节等功能的口服保健食品中的粗多糖成分。

海藻来源粗多糖：如卡拉胶、海藻酸钠、琼脂等从海藻中提取的粗多糖及其衍生物。

微生物发酵粗多糖：通过细菌、真菌等微生物发酵产生的胞外或胞内粗多糖。

动物来源粗多糖：如壳聚糖、肝素、硫酸软骨素等从甲壳类或动物组织中提取的粗多糖。

新型合成或改性多糖：经过化学修饰或人工合成的多糖衍生物，需评估其改性后的致敏性变化。

多糖复合物及制剂：含有粗多糖的复合配方、微胶囊、脂质体等特殊剂型。

生产中间体及杂质：粗多糖生产过程中的中间产物以及可能残留的蛋白质、核酸等杂质成分。

检测方法

豚鼠皮肤致敏试验（GPMT）：经典的体内法，通过皮内注射诱导和局部涂抹激发，评估迟发型接触性过敏。

局部淋巴结试验（LLNA）：利用放射性同位素或荧光标记物检测引流淋巴结细胞增殖，替代传统豚鼠试验的体内方法。

酶联免疫吸附测定（ELISA）：用于定量检测血清中特异性IgE、IgG抗体或细胞培养上清中的细胞因子水平。

流式细胞术：用于分析免疫细胞表面标志物的表达变化，或检测细胞内细胞因子的产生。

嗜碱性粒细胞活化试验（BAT）：通过流式细胞术检测CD63或CD203c的表达，评估嗜碱性粒细胞的体外活化程度。

肥大细胞脱颗粒试验：在显微镜下观察或通过染料释放法测定肥大细胞受刺激后的脱颗粒率。

实时荧光定量PCR（qPCR）：检测免疫细胞中与过敏反应相关基因（如细胞因子基因）的mRNA表达水平。

Western Blotting：检测粗多糖刺激后细胞内信号通路关键蛋白（如NF-κB）的磷酸化等变化。

补体激活检测法（CH50， AH50）：通过溶血实验分别测定粗多糖对经典途径和旁路途径补体活性的影响。

人源细胞系共培养模型：利用人源树突状细胞与T细胞共培养，模拟人体内致敏的初始免疫应答过程。

检测仪器设备

酶标仪：用于ELISA、MTT等比色或荧光检测法的吸光度、荧光强度读取。

流式细胞仪：进行淋巴细胞分型、嗜碱性粒细胞活化标志物检测及细胞因子 intracellular staining 分析的核心设备。

实时荧光定量PCR仪：对过敏相关基因表达进行精确定量分析。

生物显微镜及成像系统：用于观察皮肤刺激反应、细胞形态变化及肥大细胞脱颗粒现象。

紫外可见分光光度计：用于测定蛋白质、核酸等杂质含量，以及部分比色法检测项目。

蛋白印迹系统：包括电泳、转膜、成像设备，用于蛋白质水平的相关信号通路分析。

细胞培养箱：为各类免疫细胞（淋巴细胞、肥大细胞系等）的体外培养提供恒温恒湿及CO2环境。

离心机：用于血清分离、细胞收集、试剂分离等样品制备过程。

自动化样品处理工作站：提高ELISA等操作中加样、洗板等步骤的效率和准确性。

实验室信息管理系统（LIMS）：对检测样品、流程、数据和报告进行规范化管理和追踪。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。