ABTS自由基实验

检测项目

总抗氧化能力：评估样品整体清除ABTS自由基的能力，是衡量其抗氧化活性的综合指标。

水溶性抗氧化剂活性：专门检测样品中溶于水相的成分（如维生素C、多酚）的抗氧化效力。

脂溶性抗氧化剂活性：专门检测样品中溶于有机相的成分（如维生素E、类胡萝卜素）的抗氧化效力。

单一化合物抗氧化活性：用于测定特定纯物质（如槲皮素、儿茶素）的抗氧化能力。

植物提取物抗氧化活性：评估从植物中提取的混合物（如精油、粗提物）的抗氧化性能。

食品与饮料抗氧化活性：测定果汁、酒类、食用油等食品饮料的抗氧化水平。

药品与保健品抗氧化活性：评估中成药、保健品原料及成品清除自由基的能力。

生物体液抗氧化能力：检测血清、血浆等生物样本中内源性抗氧化物质的总体水平。

反应动力学研究：通过监测吸光度随时间的变化，研究抗氧化剂与ABTS自由基的反应速率。

协同抗氧化效应：研究两种或多种抗氧化物质混合使用时，其抗氧化效果是相加、协同还是拮抗。

检测范围

天然产物与提取物：涵盖各种中药材、果蔬、香辛料的提取物及其活性成分。

功能性食品原料：包括益生菌、膳食纤维、蛋白肽等具有潜在抗氧化功能的食品原料。

饮料类：适用于茶、咖啡、果汁、功能性饮料及各类酒品的抗氧化能力比较。

食用油与脂肪制品：用于评估不同植物油、动物油及含脂食品的氧化稳定性。

化妆品原料：检测美白、抗衰等化妆品中添加的植物提取物或合成抗氧化剂的活性。

药品与中间体：适用于具有抗氧化作用的中西药原料药、制剂及合成中间体的活性评价。

生物样本：可用于研究动物或人体血液、组织匀浆液中的总抗氧化状态。

化工产品：评估某些高分子材料、橡胶、塑料中添加的抗氧化剂的效能。

环境样品：探索土壤、水体中某些天然有机物或污染物的抗氧化/促氧化特性。

科研教学：作为生物化学、食品科学、药学等领域基础研究与实验教学的经典方法。

检测方法

ABTS自由基母液制备：将ABTS盐与过硫酸钾溶液混合，在暗处反应12-16小时，生成稳定的ABTS自由基阳离子储备液。

工作液稀释与标定：用磷酸盐缓冲液或乙醇稀释储备液，使其在734 nm波长下的吸光度值稳定在0.70±0.02。

样品前处理：根据样品性质，采用溶解、萃取、离心、过滤等方法制备待测液，确保与工作液互溶。

反应体系构建：精确移取一定体积的ABTS工作液与样品溶液（或空白溶剂）于比色皿中，迅速混匀。

反应时间控制：通常在室温避光条件下反应6分钟，或在特定时间点（如1、4、6分钟）测定吸光度。

吸光度测定：使用分光光度计，在734 nm波长下测定反应混合物的吸光度值。

空白对照设置：使用与样品溶剂相同的溶液代替样品溶液，与ABTS工作液反应作为空白对照。

标准曲线绘制：使用Trolox（水溶性维生素E类似物）或抗坏血酸等标准品制作浓度-抑制率标准曲线。

结果计算：根据样品对ABTS自由基的清除率，对照标准曲线，计算出以Trolox当量表示的抗氧化能力。

方法验证：通过测定精密度、重复性、加标回收率等参数，验证实验方法的可靠性与准确性。

检测仪器设备

紫外-可见分光光度计：核心设备，用于在734 nm波长下精确测定ABTS自由基溶液吸光度的变化。

分析天平：用于精确称量ABTS试剂、过硫酸钾、标准品及待测样品。

pH计：用于配制和校准实验所需的磷酸盐缓冲液，确保反应体系的pH值稳定（通常为7.4）。

涡旋振荡器：用于快速混匀样品与试剂，确保反应充分且均一。

恒温水浴锅或恒温培养箱：用于在特定温度下进行ABTS母液的生成或样品反应，控制反应温度。

离心机：用于处理浑浊或不均一的样品，通过离心获取上清液进行测定。

移液器及吸头：包括单通道和多通道移液器，用于精确移取微升级至毫升级的液体。

超声波清洗机：用于加速难溶样品的溶解或提取过程，提高提取效率。

暗箱或避光容器：由于ABTS自由基对光敏感，需在避光条件下储存和反应。

比色皿：用于盛放反应液进行吸光度测定，常用规格为1 cm光程的石英或玻璃比色皿。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。