多糖糖基化质谱分析

检测项目

糖链结构解析：确定多糖链中单糖的组成、连接顺序、分支方式及糖苷键类型。

糖基化位点鉴定：精确识别蛋白质或多肽链上发生糖基化修饰的具体氨基酸残基位置。

糖型分析：对连接在同一糖基化位点上的不同糖链结构（糖型）进行定性和定量分析。

单糖组成分析：定性及定量测定多糖样品水解后释放出的各种单糖的种类和摩尔比例。

糖链分子量测定：使用高分辨率质谱精确测定完整糖链或糖肽的分子质量。

糖链分支度分析：评估多糖链的分支复杂程度，通常通过酶解或质谱碎片分析实现。

唾液酸化分析：特异性检测糖链末端唾液酸的存在、类型（如N-乙酰神经氨酸、N-羟乙酰神经氨酸）和连接方式。

岩藻糖基化分析：鉴定糖链核心或末端岩藻糖的修饰情况，与多种生物功能相关。

硫酸化/磷酸化修饰分析：检测糖链上硫酸基或磷酸基团的修饰位点及修饰程度。

糖链相对与绝对定量：通过标记或非标记策略，比较不同样品间特定糖链结构的丰度变化。

检测范围

糖蛋白与糖肽：包括治疗性抗体、血浆蛋白、膜蛋白等及其酶解后的含糖肽段。

蛋白聚糖与糖胺聚糖：如硫酸软骨素、肝素、透明质酸等结构复杂的多糖。

游离寡糖与多糖：从天然产物（如中药多糖）、微生物或植物中提取的纯化多糖。

细胞表面糖链：细胞膜表面糖蛋白和糖脂所携带的糖链结构。

血清/血浆样本：直接分析血液中糖蛋白的糖基化谱图，用于疾病标志物发现。

生物制药产品：单克隆抗体、融合蛋白、疫苗等生物制品的糖基化质量属性监控。

食品与保健品中的多糖：如香菇多糖、枸杞多糖等功能性食品成分的分析。

微生物多糖：细菌荚膜多糖、脂多糖等，用于疫苗开发和病原菌研究。

植物细胞壁多糖：纤维素、半纤维素、果胶等，在生物能源和材料科学中应用广泛。

糖基化代谢中间体：细胞内糖核苷酸等糖基供体及相关代谢物。

检测方法

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱：适用于完整糖蛋白、糖肽和寡糖的分子量测定及谱图指纹分析。

电喷雾电离质谱：可与液相色谱联用，实现复杂糖肽/寡糖混合物的在线分离和高灵敏度检测。

液相色谱-质谱联用：核心方法，通过反相色谱、亲水作用色谱等分离技术后再进行质谱分析。

串联质谱与多级质谱：通过碰撞诱导解离等技术产生糖链特征碎片，用于序列和结构解析。

释放N-糖链分析：使用肽N-糖苷酶F等酶将N-糖链从蛋白质上完整释放，再进行衍生化和质谱分析。

释放O-糖链分析：通过化学方法（如β消除）或酶法释放O-连接糖链进行分析。

糖苷酶外切酶测序法：利用一系列具有特定水解活性的糖苷酶逐步切割糖链，结合质谱监测以推断结构。

稳定同位素标记定量：如二甲基标记、同位素糖标记等，实现糖基化的精准定量。

亲水作用液相色谱：专门用于分离强极性的糖链和糖肽，是糖组学分析的常用色谱方法。

毛细管电泳-质谱联用：提供极高的分离效率，特别适用于带电糖型（如唾液酸化糖型）的分离分析。

检测仪器设备

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪：用于快速获得完整糖链或糖蛋白的质谱图，操作简便，质量范围宽。

三重四极杆质谱仪：擅长于目标糖链或糖基化修饰的定量分析，灵敏度和特异性高。

四极杆-飞行时间串联质谱仪：兼具高分辨率、高质量精度和串联质谱功能，是糖链结构解析的主力机型。

轨道阱系列高分辨质谱仪：提供极高的质量分辨率和质量精度，适合复杂样品中糖型的深度分析。

纳升液相色谱系统：与质谱联用，实现微量样品的高效分离和高灵敏度检测，节省样品消耗。

超高效液相色谱系统：提供快速、高分离度的色谱分离，缩短分析时间并提高峰容量。

毛细管电泳系统：用于分离电荷和大小不同的糖链，常与质谱联用进行高分辨分析。

自动化样品前处理工作站：实现糖蛋白酶解、糖链释放、纯化等步骤的自动化，提高通量和重现性。

糖芯片点样与扫描系统：用于制备糖芯片，并通过质谱成像或荧光扫描进行高通量糖链筛选。

数据处理与解析软件：专门用于糖质谱数据的去卷积、数据库搜索、糖型归属和定量分析的专业软件。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。