体外降胆固醇试验

检测项目

总胆固醇清除率测定：评估样品从模拟肠液或反应体系中清除胆固醇总量的能力，是衡量降胆固醇效果的基础指标。

胆固醇胶束溶解度抑制率：检测样品抑制胆固醇在胆汁酸胶束中溶解的能力，模拟肠道吸收环节，是评价抑制吸收的关键项目。

胆汁酸结合能力测定：量化样品与胆汁酸（如胆酸钠、牛磺胆酸钠）的结合量，结合胆汁酸可促进胆固醇向胆汁酸转化并排泄。

胆固醇酯酶活性抑制：测定样品对胆固醇酯酶活性的抑制程度，该酶负责水解胆固醇酯为游离胆固醇，抑制其活性可减少胆固醇吸收。

胰脂肪酶活性抑制：评估样品对胰脂肪酶活性的抑制效果，通过影响脂肪消化间接调节脂质代谢环境。

低密度脂蛋白氧化抑制：检测样品抑制低密度脂蛋白被氧化修饰的能力，氧化型LDL是致动脉粥样硬化的关键因素。

羟基自由基清除能力：测定样品清除羟基自由基的效率，自由基与胆固醇氧化及脂质过氧化密切相关。

ABCA1基因表达上调检测：在细胞模型上，检测样品对胆固醇逆转运关键蛋白ABCA1基因表达的促进作用。

HMG-CoA还原酶活性抑制：评估样品对胆固醇合成限速酶HMG-CoA还原酶活性的抑制作用，模拟他汀类药物作用机制。

胆固醇胶束粒径与Zeta电位分析：通过分析胶束颗粒大小和表面电荷的变化，从物理化学角度阐释样品干扰胆固醇胶束形成的机制。

检测范围

功能性食品原料：如燕麦β-葡聚糖、植物甾醇、膳食纤维、多酚提取物等具有潜在降脂功能的天然产物。

中草药及天然提取物：包括红曲米、山楂、决明子、灵芝、姜黄素等传统药用植物的水提物或醇提物。

合成药物及前体化合物：新型化学合成降胆固醇药物候选分子或已知药物的结构修饰衍生物。

益生菌及发酵产物：具有胆盐水解酶活性的乳酸菌、双歧杆菌等益生菌菌株或其发酵上清液、细胞碎片。

海洋生物活性物质：源自海藻、鱼油、甲壳类的多糖、多不饱和脂肪酸、甲壳素/壳聚糖等。

酶制剂：如胆固醇氧化酶、胆固醇酯酶抑制剂等，直接作用于胆固醇代谢的酶类产品。

食品添加剂：作为脂肪替代品或乳化剂的某些胶体、多糖，评估其附加的降胆固醇功能。

新型纳米材料：设计用于特异性吸附或包裹胆固醇的功能性纳米载体或吸附材料。

复合配方产品：由多种活性成分复配而成的保健食品或药物制剂，评价其协同作用效果。

体外消化模拟产物：经过模拟口腔、胃、肠消化后的样品，评估其消化产物或代谢物的活性。

检测方法

胆固醇胶束形成抑制法：在模拟肠道环境中制备含胆固醇的胆汁酸胶束，加入样品后通过离心或过滤测定溶液中残留胆固醇，计算抑制率。

体外胆汁酸结合法：将样品与特定浓度的胆汁酸溶液共孵育，离心后采用分光光度法或高效液相色谱法测定上清中未结合的胆汁酸量。

酶活性抑制动力学分析：使用分光光度法，在特定波长下监测胆固醇酯酶或HMG-CoA还原酶催化反应的速率变化，计算样品对酶活性的抑制常数（Ki）。

细胞模型评价法：常用Caco-2、HepG2等细胞系，通过油红O染色、荧光标记或同位素示踪技术检测细胞内胆固醇含量及流出情况。

氧自由基吸收能力法：采用ORAC、DPPH或ABTS自由基清除实验，评价样品的抗氧化能力，间接关联其抑制胆固醇氧化的潜能。

低密度脂蛋白氧化滞后时间测定：在体外用Cu²⁺或AAPH诱导LDL氧化，通过监测共轭二烯生成或硫代巴比妥酸反应物形成的时间来评价样品的保护作用。

高效液相色谱法：用于精确分离和定量反应体系中的胆固醇、胆汁酸、植物甾醇等特定成分及其代谢物。

荧光偏振/荧光共振能量转移技术：使用荧光标记的胆固醇类似物，通过检测荧光偏振度的变化来研究样品对胆固醇迁移或微环境的影响。

等温滴定量热法：一种高灵敏度的热力学方法，直接测量样品与胆固醇或胆汁酸结合过程中的热变化，用于计算结合常数和化学计量比。

分子对接与模拟：计算机辅助方法，预测活性成分与靶点蛋白（如胆固醇酯酶、NPC1L1受体）的相互作用模式和结合能，为体外实验提供理论指导。

检测仪器设备

紫外-可见分光光度计：用于基于显色反应（如邻苯二甲醛法测胆固醇）或直接吸光度测量的各种酶活、结合率、清除率测定。

高效液相色谱仪：配备紫外、荧光或蒸发光散射检测器，用于复杂体系中胆固醇、胆汁酸、植物甾醇等物质的精确分离与定量分析。

荧光分光光度计：用于基于荧光探针（如DPH、NBD-胆固醇）的膜流动性测定、胆固醇分布研究以及自由基清除动力学实验。

酶标仪：适用于高通量筛选，可同时进行96或384孔板的多指标检测，如细胞活力、细胞内脂质含量、抗氧化活性等。

离心机：包括高速冷冻离心机和微量离心机，用于分离胶束、沉淀结合物、收集细胞等样品前处理步骤。

恒温振荡培养箱：为体外结合、孵育、酶反应以及细胞培养提供恒定温度和气浴振荡环境，确保反应均一性。

激光散射粒度及Zeta电位分析仪：用于精确测量胆固醇胶束、脂质体或纳米载体在添加样品前后的粒径分布和表面电位变化。

等温滴定量热仪：直接、无标记地测量生物分子相互作用的热力学参数，用于研究结合过程的焓变、熵变及结合常数。

实时荧光定量PCR仪：在细胞模型试验中，用于定量分析胆固醇代谢相关基因（如ABCA1， LDLR， HMGCR）的mRNA表达水平。

生物安全柜/细胞培养箱：为涉及细胞模型的体外试验提供无菌操作环境和恒温恒压的细胞培养条件，是细胞实验的基础设备。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。