胆影酸微生物限度试验

检测项目

需氧菌总数计数：测定每克胆影酸中需氧和兼性厌氧细菌及酵母菌的总数，评估整体细菌污染水平。

霉菌和酵母菌总数计数：专门测定每克胆影酸中霉菌和酵母菌的数量，评估真菌污染程度。

控制菌检查-大肠埃希菌：检测胆影酸中是否含有指示粪便污染的大肠埃希菌，是卫生学控制的关键指标。

控制菌检查-沙门菌：检测是否存在沙门菌，该菌是重要的肠道致病菌，对用药安全构成严重威胁。

控制菌检查-耐胆盐革兰阴性菌：检查胆影酸中可能存在的耐胆盐革兰阴性菌，这类菌在肠道中常见，需加以控制。

控制菌检查-金黄色葡萄球菌：检测是否存在金黄色葡萄球菌，该菌是常见的化脓性致病菌。

控制菌检查-铜绿假单胞菌：检测是否存在铜绿假单胞菌，该菌是条件致病菌，对免疫力低下者危害大。

方法适用性试验-需氧菌总数计数：验证胆影酸本身在试验条件下对微生物计数无抑制作用，确保计数结果准确。

方法适用性试验-霉菌和酵母菌总数计数：验证胆影酸对真菌计数无抑制作用，保证霉菌和酵母菌计数的可靠性。

方法适用性试验-控制菌检查：验证胆影酸不影响控制菌的检出，确保控制菌检查方法的有效性。

检测范围

胆影酸原料药：适用于作为原料药供进一步制剂生产用的所有批次的胆影酸。

生产中间体控制：可应用于关键生产工艺节点后中间产品的微生物质量监控。

入库原料检验：适用于对采购入库的胆影酸原料进行接收放行的质量控制检验。

稳定性考察样品：用于胆影酸原料药在稳定性研究过程中，于特定时间点取样进行微生物限度评估。

变更后工艺验证：当生产工艺、设备或场地发生重大变更后，用于验证变更后产品质量的微生物学属性。

供应商审计与评估：作为评估和审计胆影酸原料药供应商质量体系的重要技术依据之一。

非无菌制剂原料入厂检验：作为使用胆影酸制备非无菌制剂时，对原料进行的强制性入厂检验项目。

药典符合性检验：确保胆影酸原料药符合《中国药典》通则1105、1106对非无菌药品微生物限度的法定要求。

企业内部质量标准：作为企业内控质量标准的核心组成部分，其标准可严于药典规定。

质量纠纷仲裁检验：在出现质量争议时，可作为第三方仲裁检验的标准方法依据。

检测方法

平皿法（倾注法）：将供试液与融化的琼脂培养基混合，倾注平皿，培养计数，适用于需氧菌总数及霉菌酵母菌总数测定。

薄膜过滤法：将供试液通过孔径不大于0.45μm的微孔滤膜过滤，冲洗后转移滤膜至培养基上培养，适用于抑菌性较强的样品。

培养基稀释法：取规定量的供试液，加入较大体积的培养基中，使样品稀释至无抑菌作用的浓度，再进行培养和计数。

胰酪大豆胨琼脂（TSA）培养：用于需氧菌总数计数的通用培养基，在30-35°C下培养不超过3天。

沙氏葡萄糖琼脂（SDA）培养：用于霉菌和酵母菌总数计数的培养基，在20-25°C下培养5-7天。

预培养增菌法：在控制菌检查中，先将样品在选择性增菌培养基中预培养，以复苏受损菌并增加目标菌数量。

选择性培养基分离：使用如麦康凯、RV、甘露醇氯化钠等选择性琼脂平板，对增菌液进行划线分离，以鉴别目标控制菌。

生化鉴定试验：对疑似菌落进行氧化酶、吲哚、糖发酵等系列生化试验，以确证控制菌的种类。

方法适用性试验（回收率测定）：通过加入已知量的标准菌株，计算回收率，验证供试品的处理方法能有效消除其抑菌性。

阴性/阳性对照试验：每次试验均设立不含菌的阴性对照和加入标准菌株的阳性对照，以确保试验系统有效。

检测仪器设备

生物安全柜：提供无菌操作环境，保护操作人员、样品及环境，防止微生物气溶胶扩散，是所有微生物操作的核心设备。

高压蒸汽灭菌器：用于对所有培养基、稀释剂、实验器具（如平皿、吸管）以及废弃物进行灭菌处理。

恒温培养箱（细菌）：提供稳定的30-35°C培养环境，用于需氧菌总数和控制菌中细菌部分的培养。

恒温培养箱（真菌）：提供稳定的20-25°C培养环境，专门用于霉菌和酵母菌的培养。

薄膜过滤装置：包含无菌滤杯、滤膜、真空泵和缓冲瓶，用于进行薄膜过滤法操作。

菌落计数器：用于准确计数琼脂平板上生长的菌落数量，可分为手动式、半自动或全自动图像分析式。

精密天平：用于精确称量胆影酸供试品、培养基干粉及其他试剂，精度通常要求达到0.01g或更高。

pH计：用于测定和调整培养基、稀释剂等溶液的pH值，确保其符合微生物生长要求。

显微镜：用于观察微生物的形态特征，在控制菌的初步鉴别中起到辅助作用。

恒温水浴箱：用于将已灭菌的琼脂培养基保持在45-50°C的融化状态，以备倾注平板时使用。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。