生物样品罗丹明代谢物质谱检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2026-04-30  

本检测详细阐述了生物样品中罗丹明及其代谢物质谱检测技术的核心内容。文章系统性地介绍了该检测体系的关键组成部分,包括具体的检测项目、适用的生物样品范围、主流的检测方法流程以及必需的仪器设备配置。内容旨在为相关领域的科研人员与检测技术人员提供一份全面、实用的技术参考。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

罗丹明B:检测目标原型染料,是判断样品是否受到污染的直接指标。

罗丹明B代谢物M1:检测罗丹明B在生物体内经N-脱乙基化作用产生的主要初级代谢产物。

罗丹明B代谢物M2:检测罗丹明B进一步脱乙基化生成的次级代谢产物,反映更深入的代谢过程。

罗丹明B代谢物M3:检测罗丹明B的羧酸形式代谢物,是其生物转化的重要途径之一。

罗丹明B代谢物M4:检测罗丹明B经氧化等反应生成的极性代谢物,有助于了解其解毒路径。

罗丹明6G:检测另一种常见的罗丹明类染料,常与罗丹明B同时进行筛查。

罗丹明6G代谢物:检测罗丹明6G在生物体内相应的特征性代谢转化产物。

罗丹明123:检测常用于线粒体功能研究的罗丹明衍生物,监控其在细胞内的积累与变化。

内源性物质干扰评估:评估生物样品中内源性色素或类似物对目标物检测可能造成的干扰。

总罗丹明类物质筛查:对样品中所有可能存在的罗丹明类化合物及其衍生物进行非靶向筛查。

检测范围

血浆与血清:适用于药代动力学研究及人体或动物暴露后的血液浓度监测。

全血:用于评估罗丹明类物质在血细胞中的分布与结合情况。

尿液:是检测水溶性代谢物、评估排泄速率和进行生物监测的首选样品。

动物组织匀浆:如肝脏、肾脏、肌肉等,用于研究罗丹明类物质的组织分布与蓄积毒性。

细胞裂解液:适用于体外细胞摄取、外排及代谢机制研究的样品。

胆汁:用于研究罗丹明类物质及其代谢物的肝肠循环与胆汁排泄途径。

毛发与指甲:作为慢性或历史暴露的生物标志物样品,可反映更长时间的暴露情况。

粪便:用于评估罗丹明类物质经肠道未吸收部分的排泄及肠道代谢情况。

食品基体模拟物:如含油脂、蛋白的模拟溶液,用于食品安全检测的方法开发与验证。

环境生物样品:如鱼类、贝类等水生生物组织,用于环境污染的生态毒理学评估。

检测方法

样品前处理(蛋白沉淀):使用有机溶剂(如乙腈、甲醇)沉淀生物样品中的蛋白质,简化基质。

样品前处理(液液萃取):利用目标物在有机相与水相中的分配差异进行富集与纯化。

样品前处理(固相萃取):采用C18等吸附剂选择性萃取富集罗丹明类物质,净化效果好。

色谱分离(反相色谱):采用C18色谱柱,以甲醇/乙腈-水(含甲酸或乙酸铵)为流动相进行分离。

质谱电离(电喷雾电离ESI):在正离子模式下,使罗丹明及其代谢物高效电离生成[M+H]+离子。

质谱扫描(多反应监测MRM):设定母离子-子离子对进行特异性扫描,实现高灵敏度、高选择性的定量分析。

质谱扫描(增强子离子扫描EPI):在MRM触发下获取代谢物的二级全扫描质谱图,用于结构确证。

内标法定量:使用氘代罗丹明B或结构类似物作为内标,补偿前处理及电离过程中的损失与变异。

方法学验证:对方法的特异性、线性、精密度、准确度、回收率及稳定性进行系统验证。

数据采集与分析:使用质谱工作站软件采集MRM色谱图,进行积分、校准曲线拟合及浓度计算。

检测仪器设备

高效液相色谱仪:用于实现罗丹明及其代谢物与复杂生物基质的色谱分离,是系统的核心组件。

三重四极杆质谱仪:作为最常用的检测器,具备优异的定量能力和高灵敏度,适用于MRM检测。

高分辨质谱仪:如Q-TOF或Orbitrap,用于未知代谢物的筛查、结构解析与确证工作。

色谱柱(反相C18柱):最常用的分析柱,规格常为2.1×50/100 mm, 1.7-5 μm粒径。

固相萃取装置:包括真空泵、萃取小柱和收集架,用于样品的前处理净化和富集。

高速离心机:用于样品前处理过程中的蛋白沉淀、相分离等步骤。

氮吹浓缩仪:用于将萃取后的有机溶剂温和地吹干,并对目标物进行浓缩。

涡旋混合器:用于确保样品、试剂和内标在每一步骤中充分混匀。

精密天平:用于准确称量标准品、内标及样品,保证定量准确性。

超纯水系统:提供符合质谱分析要求的高纯度用水,用于配制流动相及溶液。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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