尿沉渣细胞非整倍体试验

检测项目

染色体数目异常分析：通过荧光原位杂交技术检测尿脱落细胞中特定染色体的拷贝数，判断是否存在非整倍体。

3号染色体检测：针对3号染色体着丝粒区域进行探针标记，评估其在细胞中的数量，是膀胱癌常见的遗传学改变之一。

7号染色体检测：检测7号染色体的扩增情况，其多体性与尿路上皮癌的进展和分级密切相关。

17号染色体检测：分析17号染色体着丝粒拷贝数，其异常是重要的肿瘤标志物。

9号染色体p21位点缺失检测：使用特异性探针检测9p21区域（含CDKN2A基因）的缺失，这是膀胱癌早期高频事件。

非整倍体细胞计数：统计样本中显示染色体数目异常的细胞数量，并计算其占总分析细胞的比例。

细胞核形态学评估：在FISH检测同时，观察细胞核的大小、形态及荧光信号分布模式，辅助判断。

多染色体异常综合判断：综合分析多个染色体探针的结果，提高对高级别尿路上皮癌检出的敏感性和特异性。

荧光信号模式分类：根据每个细胞中不同颜色荧光点的数目和排列，将细胞分为正常信号型、单体型、三体型、多体型等。

诊断性报告生成：基于上述多项指标，生成包含异常细胞比例和具体染色体异常的临床检测报告。

检测范围

膀胱尿路上皮癌筛查：适用于有吸烟史、职业暴露等高风险人群的无创早期筛查。

血尿患者的鉴别诊断：用于帮助鉴别不明原因血尿是源于炎症、结石还是潜在肿瘤。

膀胱癌术后监测：对非肌层浸润性膀胱癌经尿道切除术后患者进行复发监测，比单纯细胞学更敏感。

上尿路尿路上皮癌辅助诊断：可用于肾盂癌、输尿管癌的辅助诊断，但灵敏度可能低于膀胱癌。

疑似泌尿系肿瘤但膀胱镜阴性者：对于有症状但膀胱镜检查未发现明确肿瘤的患者，提供分子水平的证据。

监测卡介苗灌注治疗疗效：评估膀胱内卡介苗免疫治疗后的反应，预测治疗失败风险。

低级别乳头状瘤的随访：对病理诊断为低度恶性潜能乳头状尿路上皮肿瘤的患者进行风险分层和随访。

不典型或可疑尿细胞学结果的确证：当常规尿脱落细胞学检查结果为“不典型”或“可疑”时，进行进一步的确证。

职业性膀胱癌风险监测：对长期接触芳香胺类化学物质的职业人群进行健康监测。

泌尿系统其他恶性肿瘤的辅助评估：在特定情况下，也可为前列腺癌、肾细胞癌累及尿路的评估提供参考信息。

检测方法

样本采集与处理：收集新鲜中段尿，及时离心富集尿沉渣中的脱落细胞，并进行细胞涂片或滴片。

细胞固定：使用甲醇：冰醋酸固定液对细胞涂片进行固定，以保持细胞形态和核内DNA结构。

标本老化与预处理：将固定后的标本进行适当老化，并使用蛋白酶消化以去除细胞质蛋白，增加探针穿透性。

探针杂交：将针对特定染色体着丝粒或位点的荧光标记DNA探针混合物滴加至标本靶区，进行共变性退火杂交。

杂交后洗涤：使用严格浓度的盐溶液洗去未结合及非特异性结合的探针，降低背景荧光。

复染与封片：使用DAPI等核复染剂对细胞核进行染色，然后使用抗淬灭封片剂封片，以保护荧光信号。

荧光显微镜阅片：在配备特定滤光片组的荧光显微镜下，由技术人员观察并计数细胞核内的荧光信号。

信号判读与计数：在油镜下，随机选择至少25个形态完整的细胞，分别记录每个细胞中各探针的荧光信号点数。

阈值设定与结果判断：根据建立的参考阈值（通常异常细胞比例≥10%为阳性），判断样本是否为非整倍体阳性。

自动化图像分析：部分系统采用全自动荧光扫描与分析系统，自动捕捉图像、识别细胞核并计数信号，提高客观性。

检测仪器设备

荧光显微镜：核心设备，需配备适合FISH探针荧光染料（如FITC， Texas Red， Cy5， DAPI）的高质量滤光片组。

全自动荧光扫描分析系统：可自动扫描玻片、定位细胞、对焦、拍摄图像并进行初步信号分析与计数。

杂交仪：提供精确控温的共变性和杂交平台，确保杂交过程的温度和时间准确无误。

台式高速离心机：用于尿液样本的离心，以沉淀和富集尿沉渣中的脱落细胞。

水浴锅或干浴器：用于标本的变性、杂交后的洗涤等需要精确控温的步骤。

生物安全柜：在样本处理和涂片制备过程中，提供无菌环境，保护操作者和样本。

冰箱与冷冻柜：用于储存FISH探针试剂、抗体及各种生化试剂，需具备-20℃及以下储存能力。

移液器：一系列不同量程的精密移液器，用于试剂的精确加样和分配。

玻片孵育湿盒：在杂交过程中，用于盛放玻片并保持湿度，防止杂交液蒸发。

图像分析工作站：配备专业图像分析软件的高性能计算机，用于存储、管理和分析荧光图像数据。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。