口腔微生物群落定量检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2026-05-06  

本检测系统阐述了口腔微生物群落定量检测的技术体系。文章详细介绍了该领域的核心检测项目、涵盖的微生物范围、当前主流的检测方法以及关键的仪器设备。通过标准化的HTML格式,以四个关键维度展开,为读者提供一份关于口腔微生态定量分析的技术概览。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

总细菌载量定量:通过测定16S rRNA基因的拷贝数,对样本中所有细菌的总数量进行绝对定量分析。

特定致病菌定量:针对如牙龈卟啉单胞菌、福赛坦氏菌等已知牙周致病菌进行特异性高精度定量。

真菌与细菌比例分析:定量检测念珠菌等真菌的丰度,并计算其与细菌总量的比例,评估菌群平衡。

产酸菌丰度检测:定量分析变异链球菌、乳酸杆菌等主要致龋菌的丰度,评估龋病风险。

厌氧菌与需氧菌比例:通过特定标记基因区分并定量厌氧和需氧微生物,反映口腔微环境的氧化还原状态。

微生物多样性指数计算:基于定量数据,计算香农指数、辛普森指数等,评估群落内物种的丰富度和均匀度。

功能基因丰度分析:对与毒力、代谢(如糖酵解、氨基酸发酵)相关的功能基因进行定量,预测群落功能。

抗生素耐药基因检测:定量检测样本中携带的特定抗生素耐药基因的丰度,评估耐药性传播风险。

炎症相关菌群指数:综合定量多种与炎症相关的细菌,计算出一个反映口腔炎症状态的指数。

群落结构稳定性评估:通过长时间点采样和定量分析,评估个体口腔微生物群落结构随时间变化的稳定性。

检测范围

细菌域:覆盖厚壁菌门、拟杆菌门、放线菌门、变形菌门、梭杆菌门等口腔主要细菌门类。

古菌域:包括口腔中可能存在的甲烷短杆菌属等古菌物种的定量检测。

真菌域:主要针对白色念珠菌、热带念珠菌等与口腔疾病相关的真菌进行定量。

病毒(噬菌体):检测感染特定口腔细菌的噬菌体,其丰度可影响细菌群落的组成和动态。

可培养微生物:针对能够在实验室条件下培养的细菌和真菌进行分离和菌落计数定量。

不可培养微生物:利用分子生物学技术直接检测环境中存在但尚不能人工培养的绝大多数微生物。

牙周袋优势菌群:重点检测牙周袋深处与牙周炎密切相关的红色复合体、橙色复合体细菌。

舌背黏膜菌群:专门针对舌背部这一特殊生态位点的厚苔相关微生物进行定量分析。

唾液全菌群:以唾液为样本,对其中所含的来自口腔各部位的脱落微生物进行整体定量分析。

种植体周围菌群:聚焦于种植体周围龈沟或黏膜沟内的微生物群落,评估种植体周围健康或疾病状态。

检测方法

实时荧光定量PCR(qPCR):利用特异性引物和探针,对目标微生物的基因标记进行绝对或相对定量,灵敏度高。

数字PCR(dPCR):将样本分割成数万个微反应单元进行PCR,无需标准曲线即可实现绝对定量,精度极高。

16S rRNA基因测序与定量:通过高通量测序获取物种相对丰度,并借助添加已知量的外参进行绝对定量校正。

宏基因组鸟枪法测序:对样本中全部微生物DNA进行随机测序,不仅能进行物种定量,还能分析基因功能。

荧光原位杂交(FISH)与图像分析:使用荧光标记的核酸探针与细胞内的核糖体RNA杂交,在显微镜下直接观察并计数特定微生物。

流式细胞术:结合特异性荧光抗体或核酸染料,快速对唾液或菌斑悬液中的微生物细胞进行计数和分选。

培养计数法:传统的标准方法,通过系列稀释涂布平板,计数菌落形成单位,但只能检测可培养部分。

酶联免疫吸附测定(ELISA):通过检测微生物特异性抗原的浓度,间接反映该微生物的丰度。

微滴式数字PCR:数字PCR的一种主要技术形式,特别适用于低丰度靶标的精确定量。

多重qPCR技术:在同一反应体系中同时对多个目标微生物进行定量检测,通量高,节省样本。

检测仪器设备

实时荧光定量PCR仪:进行qPCR实验的核心设备,能够实时监测PCR过程中荧光信号的变化。

数字PCR分析系统:包括微滴生成仪、PCR扩增仪和微滴读取仪,用于完成完整的dPCR检测流程。

高通量测序仪:如Illumina NovaSeq、MiSeq等,用于进行16S rRNA基因测序和宏基因组测序。

荧光显微镜及图像分析系统:用于观察和采集FISH染色样本的荧光图像,并通过软件进行自动菌细胞计数。

流式细胞仪:能够快速对液体中悬浮的微生物细胞进行多参数、高通量的分析和分选。

厌氧培养工作站:为口腔中占主导的厌氧微生物提供无氧的分离、培养和计数环境。

全自动微生物鉴定及药敏系统:可对培养出的菌落进行快速自动化的菌种鉴定和计数。

酶标仪:用于读取ELISA等实验的吸光度或荧光值,进行定量分析。

核酸提取纯化工作站:自动化完成样本中微生物DNA/RNA的提取、纯化,保证定量分析前处理的标准化。

生物信息学分析服务器与软件:高性能计算设备及专业软件,用于处理海量的测序数据,完成物种注释和定量统计。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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