生物样品中代谢物分析

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2026-05-12  

本文系统阐述了生物样品中代谢物分析的核心技术体系。文章从检测项目、检测范围、检测方法及检测仪器设备四个维度展开,详细介绍了代谢组学研究中的关键目标物、适用样本类型、主流分析策略以及支撑技术平台,为从事相关领域的研究人员提供了一份全面的技术参考。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

氨基酸类:生物体内蛋白质合成的基本单元,也是能量代谢和信号转导的重要参与者,其水平变化与多种生理病理状态相关。

有机酸类:三羧酸循环、糖酵解等核心能量代谢途径的中间产物,是反映细胞能量状态和代谢流的关键指标。

脂肪酸类:包括游离脂肪酸和酯化脂肪酸,是细胞膜的主要成分和重要的能量储存形式,与炎症、胰岛素抵抗等过程密切相关。

糖类及其代谢物:包括葡萄糖、果糖等单糖,以及乳酸、丙酮酸等糖代谢中间体,直接反映机体的糖代谢状况。

胆汁酸类:由胆固醇在肝脏中合成,在脂肪消化吸收和肠道菌群调节中起核心作用,是肝胆疾病的重要生物标志物。

核苷酸及其代谢物:DNA/RNA合成的原料,其代谢异常与细胞增殖、免疫功能和遗传性疾病有直接联系。

维生素及其衍生物:作为辅酶参与众多生化反应,其水平可评估机体的营养状况和特定酶的功能状态。

激素及信号分子:包括类固醇激素、儿茶酚胺等,在极低浓度下调控广泛的生理过程,是内分泌研究的关键。

脂质介质:如前列腺素、白三烯等,由多不饱和脂肪酸衍生而来,在炎症、免疫应答中扮演信使角色。

外源性代谢物:指药物、环境污染物、膳食成分等在体内经过生物转化后形成的产物,用于研究毒理学和药物代谢动力学。

检测范围

血液(血浆/血清):最常用的生物样品,能系统反映机体的整体代谢状态,包含丰富的内源性和外源性代谢物信息。

尿液:非侵入性采集,代谢物浓度较高,能反映机体近期的代谢变化和肾脏排泄功能,常用于疾病筛查。

组织样本:如肝脏、肾脏、脑组织等,能提供特定器官或病变部位的局部代谢特征,空间分辨率高。

细胞及培养上清:用于体外研究,可精确控制实验条件,揭示特定刺激下细胞的代谢响应和分泌谱。

脑脊液:直接反映中枢神经系统的代谢环境,对于研究脑部疾病、血脑屏障功能具有不可替代的价值。

唾液:采集简便无创,含有来自血液扩散和唾液腺分泌的代谢物,适用于应激、口腔疾病等研究。

粪便:包含宿主代谢物、肠道微生物代谢物及未消化食物成分,是研究肠道菌群与宿主互作的关键样本。

毛发与指甲:代谢物积累周期长,能反映数周至数月内的慢性暴露或代谢状况,适用于追溯性研究。

呼出气体冷凝液:包含挥发性有机物和气道衬液成分,为肺部疾病和全身代谢的呼吸标志物分析提供样本。

单一细胞或亚细胞组分:代表代谢组学分析的前沿,利用超灵敏技术揭示细胞异质性和细胞器水平的代谢特征。

检测方法

液相色谱-质谱联用:当前代谢组学的绝对主流技术,尤其适合分析极性强、热不稳定、难挥发的代谢物,应用最广泛。

气相色谱-质谱联用:适用于分析挥发性好或经衍生化后可挥发的代谢物(如有机酸、脂肪酸),具有高分辨和强大的谱库支持。

毛细管电泳-质谱联用:对带电物质(如氨基酸、核苷酸)具有极高的分离效率,所需样品量极少,适合微量样本分析。

核磁共振:非破坏性、无需复杂前处理、可进行绝对定量和结构解析,重现性极佳,但灵敏度相对较低。

直接进样质谱:如纳米喷雾、纸喷雾质谱等,样品前处理简单、分析速度快,适用于高通量筛查和实时检测。

离子迁移谱-质谱联用:在传统质谱基础上增加离子淌度分离维度,可区分同分异构体,提高鉴定准确度和峰容量。

超高效液相色谱:作为LC-MS的分离核心,使用小颗粒填料色谱柱,大幅提高分离速度、分辨率和灵敏度。

衍生化技术:通过化学修饰改善目标代谢物的挥发性、稳定性或质谱响应,是GC-MS和某些LC-MS分析的关键前处理步骤。

固相微萃取:一种无溶剂或少溶剂的样品前处理技术,能选择性富集目标代谢物,特别适用于痕量分析和复杂基质。

代谢流分析:使用稳定同位素标记的示踪剂,结合上述检测技术,定量追踪代谢物在通路中的流向和转化速率,揭示动态代谢通量。

检测仪器设备

三重四极杆质谱仪:定量分析的“金标准”,通过多反应监测模式实现高灵敏度、高选择性的靶向代谢物绝对定量。

高分辨质谱仪:如飞行时间或轨道阱质谱,能提供代谢物精确分子量,用于非靶向代谢组学筛查和未知物鉴定。

超高效液相色谱仪:配备耐高压输液系统和超细粒径色谱柱,为质谱检测提供快速、高效的在线分离平台。

气相色谱仪:配备多种毛细管色谱柱和进样系统,用于挥发性代谢物的高效分离,是GC-MS的核心组成部分。

核磁共振波谱仪:通常为高场超导磁体,用于获取代谢物的氢谱、碳谱等,进行结构鉴定和混合物定量分析。

离子迁移谱装置:作为质谱仪的前端分离器,根据离子在电场中与缓冲气体的碰撞截面进行分离,增加鉴别能力。

自动样品制备系统:实现从样品称量、提取、衍生化到进样的全流程自动化,提高通量、重现性并减少人为误差。

低温样品存储设备:包括-80°C超低温冰箱和液氮罐,用于长期稳定保存生物样品,防止代谢物降解。

色谱柱恒温箱:精确控制色谱柱温度,改善色谱分离的重现性和效率,特别是对GC和某些LC方法至关重要。

数据采集与处理工作站:仪器配套的计算机和软件系统,负责控制仪器运行、采集原始数据并进行初步的谱图处理和积分。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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