细胞器蛋白电泳仪分离

检测项目

线粒体蛋白：分离并鉴定线粒体基质、内膜、外膜及膜间隙中的特异性蛋白，如细胞色素c氧化酶等。

内质网蛋白：针对粗面与滑面内质网，检测其腔腔内驻留蛋白（如PDI）、膜蛋白及分泌途径相关蛋白。

高尔基体蛋白：分析高尔基体顺面、中间囊泡及反面膜囊中的糖基化修饰酶和转运相关蛋白。

溶酶体蛋白：分离酸性水解酶类（如组织蛋白酶）、膜蛋白（如LAMP1）等，研究其成熟与功能。

过氧化物酶体蛋白：检测过氧化氢酶及其他氧化酶，用于研究细胞氧化代谢与解毒过程。

细胞核蛋白：包括核孔复合物、核纤层蛋白、组蛋白及各类转录调控因子。

叶绿体蛋白（植物细胞）：重点分析类囊体膜上的光系统I/II复合物、ATP合酶以及卡尔文循环相关酶。

质膜蛋白：分离整合膜蛋白、脂锚定蛋白及膜外周蛋白，常涉及受体、通道和泵。

细胞骨架相关蛋白：分析与微管、微丝、中间丝结合的蛋白及其调节因子。

胞质溶胶蛋白：分离细胞器中纯化后上清液中的可溶性蛋白，作为对照或研究特定通路。

检测范围

亚细胞结构完整性验证：通过标志性酶活性测定或Western Blot，确认分离细胞器的纯度与完整性。

蛋白质分子量确定：利用已知分子量标准品，精确测定目标细胞器蛋白的表观分子量。

蛋白质表达丰度分析：比较不同生理状态或处理条件下，特定细胞器内蛋白质的表达量变化。

翻译后修饰鉴定：检测细胞器特异性发生的磷酸化、糖基化、乙酰化等修饰情况。

蛋白质复合物解析：通过非变性电泳或后续技术分析细胞器内蛋白质之间的相互作用与复合体组成。

跨膜蛋白拓扑结构初步分析：结合去垢剂处理，初步判断膜蛋白的跨膜特性。

疾病生物标志物筛选：在病理模型中，寻找特定细胞器内差异表达的蛋白质作为潜在标志物。

药物作用靶点定位：研究药物处理后，药物靶点蛋白在亚细胞水平的定位与表达改变。

物种间比较蛋白质组学：对比不同物种同一细胞器的蛋白质组成，探索进化关系。

发育或分化过程追踪：监测在细胞发育或分化过程中，细胞器蛋白质组的动态重塑。

检测方法

差速离心法：利用不同转速离心，初步分离大小和密度各异的细胞器，是后续纯化的基础步骤。

密度梯度离心法：在蔗糖或Percoll等介质形成的密度梯度中进行超速离心，获得高纯度的特定细胞器。

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）：最核心的分离方法，在变性条件下根据蛋白质分子量进行分离。

蓝色 native PAGE（BN-PAGE）：一种非变性电泳，用于分离具有天然活性的膜蛋白复合物，如线粒体呼吸链超级复合物。

二维电泳（2-DE）：第一向基于等电点（IEF），第二向基于分子量（SDS-PAGE），极大提高分离分辨率。

Tris-Tricine SDS-PAGE：优化的小分子量肽段（<10 kDa）分离方法，适用于某些细胞器小分子量蛋白。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。