项目数量-9
酶标仪细胞周期测试
北检院检测中心 | 完成测试：次 | 2026-07-09
本检测详细介绍了基于酶标仪进行细胞周期测试的技术方法。本检测系统阐述了该检测的核心项目、适用范围、具体操作流程以及所需的关键仪器设备。通过使用荧光染料标记DNA并结合酶标仪的检测能力，该方法能够高效、定量地分析细胞群体中各周期时相的分布比例，为细胞生物学、肿瘤学及药物筛选研究提供重要的数据支持。
注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。
检测项目
细胞周期时相分布分析：定量测定细胞群体中处于G0/G1期、S期和G2/M期细胞的百分比。
DNA含量测定：通过荧光强度直接反映单个细胞内的DNA相对含量，是周期分析的基础。
增殖指数计算：通过S期和G2/M期细胞比例之和，评估细胞群体的增殖活跃程度。
细胞倍体性分析：鉴别细胞的DNA倍体状态，如二倍体、四倍体或异倍体，常用于肿瘤研究。
亚G1峰检测：识别DNA含量低于G1期的细胞群，通常作为细胞凋亡的一个指标。
细胞周期同步化效果验证：评估各种同步化方法（如血清饥饿、药物阻断）后细胞周期阻滞的效率。
药物对周期的影响：检测化疗药物、靶向药物等处理后，细胞周期进程发生的阻滞或改变。
基因功能研究：通过过表达或敲低特定基因，分析该基因对细胞周期调控的作用。
辐射或应激反应：研究电离辐射、氧化应激等环境因素对细胞周期检查点激活的影响。
长期动态监测：在特定时间点连续取样检测，绘制细胞周期进程的动态变化曲线。
检测范围
贴壁培养细胞系：适用于HeLa、HEK293、MCF-7等多种常见贴壁哺乳动物细胞系。
悬浮培养细胞系：适用于Jurkat、U937等淋巴细胞系或血液病来源的悬浮细胞。
原代培养细胞：经适当分离和培养后，可用于分析从组织分离的原代细胞的周期状态。
干细胞研究：用于分析胚胎干细胞、诱导多能干细胞或成体干细胞的自我更新与分化过程中的周期变化。
肿瘤细胞与组织：是肿瘤生物学研究的核心手段，用于评估肿瘤细胞的增殖活性和恶性程度。
药物筛选平台：作为高通量药物筛选的读板方法，快速评估候选化合物对细胞周期的效应。
植物原生质体：经处理后可适用于植物细胞原生质体的细胞周期相关研究。
酵母细胞：配合特定的破壁和染色方法，可用于酵母这类模式生物的周期分析。
微生物生理学：扩展应用于部分细菌的DNA复制与分裂周期研究。
临床前研究样本：可用于动物模型组织中提取的细胞或少量临床样本的初步周期分析。
检测方法
样品制备与固定：收集细胞，用70%冷乙醇在-20℃固定，使细胞透化并稳定DNA。
RNA酶消化：使用RNA酶A处理固定后的细胞，去除RNA以避免其对DNA染料的非特异性结合。
PI染色法：最常用方法，使用碘化丙啶（PI）染料嵌入双链DNA，其荧光强度与DNA含量成正比。
DAPI染色法：使用DAPI染料与DNA小沟结合，需配备紫外光激发的酶标仪进行检测。
Sytox Green染色法：一种膜不通透性染料，用于固定后细胞的染色，荧光信号强。
Brdu/DAPI双标法：先利用Brdu掺入标记S期细胞，再用DAPI染总DNA，可更精确区分各时相。
96孔板内直接检测：整个流程（固定、染色）可在96孔板内完成，便于高通量操作和减少样品损失。
荧光信号读取：使用具有荧光顶读功能的酶标仪，在特定激发/发射波长下读取每孔的总荧光强度或进行光谱扫描。
数据采集模式：通常采用终点读板法，也可进行动力学监测以观察染色过程中的荧光变化。
数据分析与拟合：将获得的荧光强度数据导出，使用专门的细胞周期分析软件（如ModFit）进行数学模型拟合和时相划分。
检测仪器设备
多功能酶标仪：核心设备，需具备荧光检测功能，并配备适用于PI（Ex~535nm, Em~617nm）等染料的滤光片。
温控离心机：用于细胞的沉淀收集和清洗步骤，确保实验过程的低温环境。
超净工作台/生物安全柜：为无菌操作提供环境，防止细胞培养物污染。
CO2培养箱：用于培养和维持待检测的活体细胞。
倒置显微镜：用于在实验前后观察细胞的形态、密度和状态。
涡旋振荡器：用于重悬细胞沉淀，使其在染色液中均匀分散成单细胞悬液。
多通道移液器与排枪：提高96孔板操作中加液、换液等步骤的效率和均一性。
4℃冰箱与-20℃冰箱：分别用于储存试剂和进行乙醇固定步骤。
96孔黑色/不透明白底培养板：黑色板用于减少孔间荧光串扰，不透明白底板常用于增强荧光信号。
数据分析计算机与软件：安装有酶标仪控制软件、数据处理软件（如Excel）和专业的细胞周期拟合分析软件。
检测流程
线上咨询或者拨打咨询电话;
获取样品信息和检测项目;
支付检测费用并签署委托书;
开展实验，获取相关数据资料;
出具检测报告。
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