H1亚型流感核酸荧光检测

检测项目

H1N1病毒RNA定量检测、HA基因特异性片段筛查、NA基因变异位点分析、M1蛋白编码区验证、NS1非结构蛋白基因检测、PB2聚合酶亚基鉴定、PA-X蛋白表达评估、NP核蛋白基因分型、血凝素抗原表位监测、神经氨酸酶活性相关序列测定、病毒载量动态追踪、耐药基因突变筛查（H275Y、N294S）、跨种传播特征位点识别、抗原漂移关键区域监控、病毒分型确认实验、亚型特异性引物验证、宿主适配性标记检测、重组病毒特征分析、疫苗匹配度评估参数测定、传播力相关基因组合分析、致病性增强突变预警指标监测、环境样本病毒存活周期追踪、禽源宿主适应性突变筛查、跨亚型重组风险预警标记物检测、抗病毒药物靶点保守性评估、快速进化区段监测模型构建

检测范围

人咽拭子标本、鼻拭子标本、肺泡灌洗液样本、血清样本全血样本血浆样本淋巴细胞分离液处理样本尸检肺组织标本禽类喉头拭子猪鼻腔分泌物标本环境气溶胶采集样本污水浓缩样本冷冻禽类组织标本鸡胚尿囊液培养物MDCK细胞培养物雪貂呼吸道标本实验动物肺组织病理切片候鸟泄殖腔拭子野生动物粪便样本冷链运输拭子样本医院ICU环境监测棉签口岸检疫采样拭子疫苗生产用毒种验证样本生物安全三级实验室台面擦拭样本疫情暴发点空气采样滤膜实验器材表面残留物监测样本医用防护装备表面取样标本

检测方法

1.实时荧光RT-PCR法：采用TaqMan探针技术靶向HA基因保守区域设计引物探针组，通过Ct值定量分析病毒载量2.数字PCR绝对定量法：基于微滴分割技术实现单分子扩增的绝对定量分析3.多重荧光PCR分型：同时检测H1亚型和N1亚型的双通道探针系统4.逆转录环介导等温扩增：适用于现场快速筛查的恒温扩增技术5.高通量测序验证法：对阳性样本进行全基因组测序确认变异位点6.微流控芯片集成检测：实现核酸提取与扩增的全流程自动化7.CRISPR-Cas12a辅助检测：利用侧流层析试纸条可视化读取结果8.数字微流控芯片技术：纳升级反应体系的高通量筛查平台9.磁珠法核酸快速提取：配合自动化工作站完成批量前处理10.冻干微球预装试剂：提升现场检测的稳定性和便捷性

检测标准

GB/T27538-2011动物流感检测A型流感病毒分型基因芯片操作规程WS285-2008流行性感冒诊断标准YY/T1461-2016甲型H1N1流感病毒RNA检测试剂盒（荧光PCR法）SN/T3567.1-2013国境口岸流感病毒分型检测方法ISO15189:2012Medicallaboratories-RequirementsforqualityandcompetenceCLSIMM03-A2MolecularDiagnosticMethodsforInfectiousDiseasesWHOCDCreal-timeRT-PCRprotocolforinfluenzaA(H1N1)EUROIMMUNAnti-InfectivesinSerumandPlasma-PCRJISK0350-90-10TestingmethodfordetectionofinfluenzavirustypeAbyRT-PCROIEManualofDiagnosticTestsandVaccinesforTerrestrialAnimalsChapter3.3.4

检测仪器

1.实时荧光定量PCR仪：ABIQuantStudio系列支持多通道荧光采集2.全自动核酸提取仪：KingFisherFlex搭配磁珠法提取试剂盒3.生物安全柜：ClassIIA2型保障气溶胶防护4.超低温离心机：维持RNA酶抑制剂活性5.微滴式数字PCR系统：Bio-RadQX200实现绝对定量6.恒温金属浴：精确控制逆转录反应温度7.超微量分光光度计：ND-1000进行核酸纯度评估8.高压灭菌器：处理生物危害废弃物9.超净工作台：用于试剂配制防污染操作10.液氮罐：长期保存临床分离毒株11.电泳成像系统：验证扩增产物特异性12.自动化移液工作站：HamiltonMicrolabSTAR减少人为误差13.生物分子互作分析仪：Biacore评估抗原抗体亲和力14.纳米孔测序仪：OxfordNanopore实现实时长读长测序15.流式细胞分选仪：BDFACSAriaIII分离特定细胞亚群

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。