植物抗病蛋白表达分析

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-06-27  

植物抗病蛋白表达分析是评估植物防御机制的关键检测方法,专注于蛋白质定量、活性分析和特异性表达水平测定。检测要点包括高精度参数测量、标准合规性及仪器功能应用,确保结果可靠和可重复性,适用于农业和生物技术领域。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

总蛋白含量测定:使用Bradford法或BCA法,检测范围0.1-2000 μg/mL,精度±5%。

特异性抗病蛋白定量:如PR-1或几丁质酶,采用ELISA技术,灵敏度1 ng/mL,线性范围0.1-100 ng/mL。

酶活性分析:包括过氧化物酶或苯丙氨酸解氨酶,单位U/mg protein,检测限0.01 U。

蛋白质电泳:SDS-PAGE凝胶电泳,分辨率12.5%,分子量范围10-250 kDa。

Western blot分析:检测目标蛋白表达,使用一抗二抗系统,灵敏度5 ng,转移效率>95%。

免疫组织化学:定位蛋白在组织中的分布,染色强度量化,分辨率0.5 μm。

质谱分析:LC-MS/MS鉴定蛋白组成,精度±2 ppm,质量范围100-10000 Da。

实时荧光定量PCR:相关基因表达分析,Ct值测量,动态范围10^6,误差±0.5 Ct。

蛋白质纯化:亲和层析纯化,回收率>90%,纯度>95%。

活性氧检测:如H2O2水平,荧光探针法,检测限0.1 μM,线性0.5-100 μM。

蛋白质稳定性测试:热稳定性分析,温度范围4-100°C,变性点测定精度±1°C。

蛋白质相互作用分析:表面等离子体共振,结合常数Kd测量,范围1 nM-1 mM。

亚细胞定位:荧光显微镜观察,定位精度±0.2 μm。

检测范围

植物叶片:如烟草或拟南芥叶片,用于分析病原感染后蛋白表达变化。

种子材料:如水稻或玉米种子,评估抗病蛋白在萌发阶段的表达水平。

转基因作物:如抗病转基因棉花或大豆,检测外源基因表达稳定性。

组织培养物:愈伤组织或悬浮细胞,用于体外蛋白表达研究。

果实样本:如番茄或苹果果实,分析采后抗病机制。

根组织:如小麦或水稻根系,研究根部防御蛋白的分布。

农业产品:有机蔬菜或谷物,检测残留抗病蛋白含量。

生物农药:含抗病蛋白的制剂,评估活性成分有效性。

种子处理剂:增强植物免疫的产品,分析蛋白释放动力学。

环境样品:土壤或水样中植物残留物,检测蛋白降解产物。

药用植物:如人参或黄芪,研究药用价值相关蛋白。

花卉作物:如玫瑰或菊花,分析观赏植物抗病特性。

森林树木:松树或橡树叶片,评估野外环境下的蛋白表达。

检测标准

依据ISO 16634进行蛋白质含量测定,标准方法凯氏定氮法。

GB/T 5009.124食品中蛋白质的测定,适用农业产品分析。

ASTM E2521生物样品蛋白质定量标准,采用分光光度法。

ISO 21572食品中蛋白质检测方法,覆盖转基因材料。

GB/T 22223食品中蛋白质的测定方法,基于Lowry法。

ISO 10993生物相容性测试,用于医疗器械相关植物产品。

GB/T 35876植物检疫标准,包含蛋白表达要求。

ASTM D8087环境样品蛋白分析指南。

ISO 17025检测实验室通用要求,确保质量控制。

GB/T 27404实验室质量控制规范,适用于检测过程。

检测仪器

紫外-可见分光光度计:用于蛋白质浓度测定,波长范围200-800 nm,精度±0.5 nm。

ELISA阅读器:检测抗体-抗原反应,吸光度测量范围0-4 OD,分辨率0.001 OD。

Western blot设备:包括电泳槽和转印仪,转移电压100-300 V,效率>90%。

质谱仪:LC-MS系统,用于蛋白鉴定,质量精度±2 ppm,扫描速度10 Hz。

实时荧光定量PCR仪:基因表达分析,温度控制精度±0.1°C,通道数6。

荧光显微镜:用于免疫组织化学,放大倍数40-1000x,分辨率0.2 μm。

高速离心机:样品制备,转速范围100-15000 rpm,容量50 mL。

高效液相色谱仪:蛋白纯化,流速0.1-5 mL/min,检测限1 ng。

表面等离子体共振仪:蛋白相互作用分析,结合常数测量范围1 pM-1 mM。

恒温摇床:培养样品,温度范围4-80°C,振荡速度50-300 rpm。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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