琼脂糖凝胶电泳实验检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-06-30  

琼脂糖凝胶电泳是核酸分析的基石技术,通过电场驱动实现DNA/RNA片段按分子量分离。专业检测需控制凝胶浓度、电泳缓冲体系、电压参数等核心变量,确保条带分辨率及定量准确性。关键要点包括分子量标记物选择、染色灵敏度验证及温度稳定性控制。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

凝胶浓度验证:0.5%-3.0%梯度配置,测量孔径均匀性误差≤5%

核酸迁移率测定:分子量标准品迁移距离线性拟合R²≥0.99

条带分辨率分析:相邻100bp片段间距≥2mm为有效分离

缓冲液电导率检测:0.5×TBE溶液电导率范围130-150μS/cm

染料灵敏度测试:EB/替代染料最低检出限≥0.1ng/μL

电压稳定性监测:150V电泳时电压波动≤±5%

温度梯度控制:电泳槽温度维持20±2℃

背景透明度量化:紫外透射光密度值≤0.05AU

核酸回收率测定:切胶回收产物得率≥65%

凝胶强度测试:1.0%凝胶承受电场强度≥10V/cm

检测范围

PCR产物鉴定:100bp-5kb扩增片段纯度及特异性验证

限制性酶切分析:酶切片段大小分布图谱构建

RNA完整性评估:28S/18S核糖体RNA 2:1比例验证

质粒拓扑构象:超螺旋/开环/线状DNA分离检测

DNA分子量定量:标准曲线法浓度测定误差≤15%

核酸纯度检测:蛋白质污染导致的拖尾现象评估

基因分型研究:微卫星标记等位基因片段分型

突变筛查:异源双链分子迁移率偏移分析

DNA甲基化验证:限制性内切酶消化模式确认

核酸提取质控:基因组DNA片段完整性检测

检测标准

GB/T 34797-2017 核酸琼脂糖凝胶电泳实验规程

ISO 22174:2005 分子生物学检测通用技术要求

ASTM E1151-1993 电泳迁移率测量标准方法

YY/T 1257-2015 医用核酸纯化试剂盒检测标准

GB/T 30988-2014 核酸染料检测限测定方法

ISO 21571:2005 食品中核酸提取与纯化方法

SN/T 4394-2016 国境口岸病原体核酸检测规程

GB/T 36054-2018 基因分型检测技术要求

JY/T 021-1996 电泳槽装置技术条件

ISO 20391-1:2018 细胞计数与活力分析规范

检测仪器

水平电泳槽:聚碳酸酯材质电泳槽,铂金电极直径0.5mm

恒压/恒流电泳仪:输出范围0-300V±1V,支持定时功能

紫外透射仪:302nm波长光源,照射强度≥8000μW/cm²

凝胶成像系统:500万像素CCD,配备专业分析软件

微量核酸分析仪:检测浓度范围0.2-1000ng/μL

恒温循环水浴槽:控温精度±0.5℃,适配电泳槽

凝胶灌制模具:梳齿厚度1.0/1.5/2.0mm可选

暗箱式紫外观察仪:配备橙色滤光防护罩

真空凝胶干燥系统:温度控制范围30-80℃

核酸片段回收装置:紫外切割定位精度±0.1mm

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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