梯度凝胶电泳检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-06-30  

梯度凝胶电泳检测是一种基于凝胶浓度梯度的分离技术,主要用于蛋白质和核酸的分子量测定、纯度评估及结构分析。专业检测要点包括凝胶梯度优化、电泳参数控制(如电压、时间)和成像分析精度,确保样品分离效率和结果可靠性。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

分子量测定:用于精确测定蛋白质或核酸分子量范围;检测参数包括凝胶梯度为4-20%丙烯酰胺、迁移距离精度±0.5mm。

纯度评估:检测样品中杂质含量;检测参数为分辨率1 kDa、检测限0.1 ng/μL。

同工酶分离:区分酶的不同形式;检测参数为活性测定范围0.01-10 U/mL、温度控制25°C±1°C。

蛋白质结构分析:观察折叠状态;检测参数为迁移率比较偏差≤5%、缓冲液pH 8.8±0.2。

核酸片段大小:测定DNA或RNA片段长度;检测参数为标准分子量标记范围100-10000 bp、电泳时间60 min±5 min。

蛋白质修饰检测:如磷酸化或糖基化分析;检测参数为特异性染色灵敏度0.5 μg、荧光强度测量精度±2%。

样品稳定性测试:评估电泳过程样品完整性;检测参数为时间依赖性迁移变化率≤3%、凝胶孔径均匀性CV≤5%.

定量分析:通过条带密度量化样品浓度;检测参数为光密度计精度0.01 OD/mm²、线性范围0.1-5 μg。

多肽分离:分离小分子多肽;检测参数为低浓度梯度2-15%聚丙烯酰胺、电流强度10 mA±0.5 mA。

复合物分析:检测蛋白质-核酸复合物;检测参数为非变性凝胶梯度4-12%、迁移速度一致性±1 mm/min。

电泳效率评估:优化分离性能;检测参数为条带锐度指数≥0.9、背景噪声比≤0.05。

交叉污染检测:防止样品混合;检测参数为泳道隔离度>99%、样品加载误差±0.2 μL。

缓冲液兼容性:测试缓冲体系适用性;检测参数为离子强度0.1-1.0 M、电导率稳定性±1%.

温度依赖分析:研究温度对迁移影响;检测参数为温控范围4-40°C、温度波动±0.5°C。

检测范围

蛋白质样品:包括血清蛋白和酶制剂,用于生物制品质量监控和定量分析。

核酸样品:如PCR产物和质粒DNA,应用于分子生物学研究和基因克隆验证。

疫苗开发:分析疫苗抗原纯度,确保免疫原性和安全性符合规范。

药品质量控制:针对生物药如单克隆抗体,评估杂质含量和分子一致性。

食品检测:用于肉类或乳制品中蛋白质含量分析,监控营养成分和掺假风险。

环境样品:如微生物DNA分析,支持污染源追踪和生态研究。

法医学应用:DNA指纹图谱构建,用于个体识别和刑事调查。

农业生物技术:转基因作物检测,验证基因插入片段大小和表达水平。

临床诊断:疾病标志物如肿瘤蛋白分析,辅助疾病筛查和治疗监测。

工业酶制剂:酶活性评估,优化工业发酵过程和质量控制。

化妆品原料:检测蛋白质成分纯度,确保产品安全性和稳定性。

研究试剂:科研用标准品验证,提供可靠实验数据基准。

生物材料相容性:医疗器械涂层蛋白分析,评估生物相容性和降解特性。

病毒学研究:病毒核酸分离,支持病原体检测和疫苗研发。

检测标准

依据ISO 21571:2005进行食品核酸片段大小检测。

GB/T 5009.6-2003标准用于食品蛋白质纯度评估。

ISO 10993-18:2020规范应用于医疗器械蛋白质修饰分析。

GB/T 16886.1-2011进行生物材料相容性测试。

ASTM E2520-2018标准用于电泳迁移率精度控制。

ISO 5725-2:2019确保检测数据准确度和重现性。

GB/T 27476-2011针对实验室电泳安全操作要求。

ISO 9001:2015质量管理体系支持整体检测流程。

GB/T 19634-2005规范核酸样品处理和分析。

ASTM F2312-2011用于医疗器械组件蛋白质检测。

检测仪器

电泳仪:施加稳定电场,控制电压和电流参数,确保样品迁移一致性。

梯度凝胶制备设备:创建精确浓度梯度凝胶,优化分离效率和分辨率。

电源供应器:提供恒定电流输出,保持电泳过程稳定性和重现性。

成像系统:捕获凝胶条带图像,进行分析和量化密度测量。

密度计:测量条带光密度,支持样品浓度定量和数据分析。

温控系统:维持恒定温度环境,防止凝胶变形和迁移偏差。

染色设备:用于样品可视化和检测,提高条带对比度和灵敏度。

样品加载器:精确分配样品到泳道,减少操作误差和交叉污染。

凝胶固化装置:确保凝胶均匀聚合,提高孔径一致性和分离性能。

缓冲液循环系统:维持电泳槽缓冲液pH和离子浓度,优化迁移条件。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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