rna变性凝胶电泳检测

检测项目

RNA完整性系数：通过28S/18S rRNA比值分析降解程度，检测范围0-10 RIN值

分子量校准：使用梯度marker（0.5-10 kb）验证迁移距离与片段大小对应关系

条带分辨率：测定最小可区分片段差异≤200 bp

核酸浓度定量：溴化乙锭染色后紫外成像检测，灵敏度5 ng/μL

降解产物检测：识别5S rRNA及smear条带，判定降解程度

杂质残留分析：检测基因组DNA污染占比≤1%

上样缓冲液兼容性：验证甲酰胺浓度（37.5-50%）对迁移速率影响

电泳参数优化：电压梯度80-150V条件下分离效率对比

胶体浓度适配：1.0%-2.0%琼脂糖凝胶孔径筛选

染色灵敏度验证：SYBR Gold与EB染剂检出限对比（0.5 ng vs 5 ng）

检测范围

病毒RNA标本：甲型流感病毒、冠状病毒等包膜病毒核酸稳定性验证

细胞总RNA提取物：哺乳动物培养细胞转录组完整性评估

植物组织RNA：多酚多糖复合物干扰下的质量验证

微量RNA样品：单细胞转录组建库前质检

临床穿刺样本：福尔马林固定石蜡包埋组织RNA降解分析

体外转录产物：mRNA疫苗原液纯度控制

古生物化石RNA：降解样本的考古遗传学研究

环境宏转录组：土壤/水体微生物群落活性监测

法医生物检材：陈旧血痕RNA分型可行性判定

核糖体RNA富集物：16S/23S rRNA分离效率验证

检测标准

ISO 20186-3:2019分子体外诊断检验-人源样本RNA提取物质量规范

GB/T 34797-2017核酸电泳检测通则

ASTM E2186-02a凝胶电泳图像分析标准指南

ISO 20395-1:2019生物技术-核酸定量方法验证要求

GB/T 37872-2019基因检测用琼脂糖凝胶制备规程

ISO 22174食品微生物学-食源性病原体RNA检测通用要求

EPA Method 1615废水病毒富集检测技术规范

YY/T 1257-2015人基因单核苷酸多态性检测试剂盒RNA质检条款

PAMC-STD-006药品生产质控RNA完整性验收标准

GB/T 30989-2014高通量基因测序样本制备质量要求

检测仪器

水平电泳槽：配置冷却循环系统，维持≤25℃电泳环境，防止RNA热降解

紫外凝胶成像系统：配备525 nm激发滤光片及CCD相机，实现EB/SYBR染色条带定量分析

微量分光光度计：检测波长260/280 nm，验证RNA纯度（OD值1.8-2.0）

程控电源：输出精度±0.1V，支持梯度电压程序（70V/30min→100V/45min）

核酸提取工作站：采用二氧化硅膜吸附原理，控制gDNA残留≤0.1%

恒温水浴槽：维持65℃变性温度，确保RNA二级结构完全解离

梯度PCR仪：合成DNA分子量标记物（100-6000 bp梯度）

超微量离心机：最高转速16,000×g，完成微量样本浓缩

电泳缓冲液循环装置：保持阴极/阳极区pH值稳定（pH 7.0-7.5）

紫外透射仪：302 nm波长光源，支持无损伤胶体观察

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。