聚丙烯酰胺凝胶电泳检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-06-30  

聚丙烯酰胺凝胶电泳检测是一种用于分离和分析生物大分子如蛋白质、核酸的关键技术。检测要点包括凝胶浓度控制、样品纯度验证、电泳参数优化、分子量测定和条带分辨率评估,确保结果准确性和可重复性。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

凝胶浓度:检测丙烯酰胺和双丙烯酰胺的比例以确保孔径均匀。参数包括浓度范围10%-20%,公差±0.5%。

缓冲液pH值:测定电泳缓冲液的酸碱度以优化迁移率。参数包括pH 8.3-9.0,波动范围±0.1。

样品纯度:分析样品中的杂质含量以保证电泳准确性。参数包括蛋白质纯度≥95%,核酸纯度A260/A280比值1.8-2.0。

分子量测定:利用标准分子量标记估计未知样品大小。参数包括分子量范围10 kDa-200 kDa,误差≤5%。

迁移率计算:测量样品在凝胶中的移动距离用于动力学分析。参数包括相对迁移率Rf值0.1-0.9。

条带锐度:评估电泳后条带的清晰度和分辨率。参数包括条带宽度≤1 mm,分离度≥1.5。

染色均匀性:检验染料在凝胶上的分布一致性。参数包括无斑点或条纹,灰度值偏差≤5%。

脱色效率:测定脱色后背景清洁度以提高图像质量。参数包括脱色时间≤30分钟,背景灰度值≤100。

凝胶稳定性:评估凝胶在储存或运输中的耐久性。参数包括温度范围4-25°C,湿度≤60% RH。

电泳参数:监控电压、电流和时间设置以确保最佳分离。参数包括电压100-200 V,电流10-50 mA,时间1-2小时。

样品加载量:控制加样体积以避免超载。参数包括每孔加载量5-20 μL,精度±0.2 μL。

孔径一致性:检测凝胶孔径大小分布均匀性。参数包括孔径标准差≤0.5 μm。

条带强度量化:分析染色后条带信号强度用于定量。参数包括光密度范围0.1-3.0 OD,线性相关R²≥0.98。

温度控制:维持电泳过程温度稳定性。参数包括温度设定20-25°C,波动±1°C。

背景噪声:评估图像背景干扰水平。参数包括信噪比SNR≥20 dB。

检测范围

蛋白质样品:包括血清蛋白、酶、激素等生物分子,用于纯度分析和分子量验证。

核酸样品:如DNA片段、RNA、PCR产物,用于大小分离和定性检测。

多肽和寡肽:短链氨基酸序列的分析,用于结构研究和质量控制。

酶制剂:工业或研究用酶如淀粉酶、蛋白酶,用于活性组分纯度评估。

抗体检测:单克隆或多克隆抗体,用于特异性分析和免疫印迹确认。

临床诊断样本:如血液、尿液样品,用于疾病标志物检测如肿瘤蛋白。

食品安全应用:检测食品中的过敏原如麸质或添加剂,确保合规性。

环境监测样本:如水或土壤提取物,用于污染物如重金属结合蛋白分析。

药物分析:验证药物纯度或降解产物,如生物制品稳定性测试。

化妆品成分:确保产品中蛋白质或肽类成分的安全规格。

病毒颗粒:用于病毒蛋白组分分离和定量。

细胞裂解物:从培养细胞中提取的混合物,用于蛋白表达分析。

植物提取物:如叶片或种子样品,用于植物蛋白研究。

生物技术产品:重组蛋白或基因工程产物,用于生产质量控制。

法医样本:DNA指纹分析,用于身份鉴定。

检测标准

依据ISO 21572进行食品过敏原的电泳检测和分析。

GB/T 5009.199用于食品安全中蛋白质成分的电泳测定。

ASTM D1238标准评估聚合物材料相关电泳应用。

ISO 10993-18规范医疗器械生物兼容性测试的电泳方法。

GB/T 16886系列标准用于医疗器械生物评价的电泳技术。

EN ISO 17025确保实验室能力验证的电泳程序。

ISO 9001质量管理体系中的电泳检测要求。

GB 4789.34用于食品微生物检测的核酸电泳标准。

ASTM E2520规范生物样品电泳分离的通用指南。

ISO 22174用于分子生物学中DNA电泳的标准化。

GB/T 33419规范蛋白质电泳的实验室操作。

ISO 15189医学实验室电泳检测的质量控制标准。

ASTM F2100涉及医疗防护装备材料的电泳评估。

GB/T 27404实验室质量控制规范中的电泳应用。

ISO 17034标准物质生产中的电泳验证流程。

检测仪器

垂直电泳槽:提供垂直方向电场用于蛋白质分离。功能包括多凝胶并行运行和样品孔精确对齐。

水平电泳槽:适用于核酸电泳如DNA琼脂糖凝胶。功能包括缓冲液循环系统和温度控制模块。

电源供应器:调节电压和电流参数确保稳定电泳条件。功能包括输出范围0-500 V,精度±1 V。

凝胶成像系统:捕获和分析电泳后图像用于定量。功能包括紫外或可见光光源,分辨率≥5百万像素。

微量移液器:精确加载样品到凝胶孔中避免误差。功能包括体积范围0.1-1000 μL,精度±0.5%.

凝胶干燥器:用于保存电泳结果便于长期存储。功能包括温度控制20-80°C和真空密封。

染色摇床:自动化染色过程确保均匀染料分布。功能包括转速可调10-100 rpm和时间定时。

脱色装置:高效去除背景染料提高图像对比度。功能包括溶液循环系统和过滤机制。

分光光度计:测量样品纯度或条带强度。功能包括波长范围200-800 nm,精度±1 nm。

恒温水浴:维持电泳过程温度一致性。功能包括温度设定4-100°C,稳定性±0.5°C。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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