琼脂糖电泳凝胶检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-06-30  

琼脂糖电泳凝胶检测涉及评估凝胶的物理和化学特性,确保其在核酸分离中的精确性和一致性。关键检测点包括凝胶浓度、孔径大小、电泳迁移率和分辨率等参数,以支持分子生物学应用的可靠性。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

凝胶浓度:测量凝胶中琼脂糖含量百分比,参数范围0.5%至3.0%,精度±0.1%,影响DNA迁移效率。

孔径大小:评估凝胶孔直径尺寸,参数范围50nm至200nm,分辨率优化用于片段分离。

凝胶强度:测定机械韧性,参数破裂强度50g/cm²至200g/cm²,确保电泳过程稳定性。

电泳迁移率:监控DNA片段迁移速度,参数迁移系数0.5cm²/V·s至1.5cm²/V·s,标准化分离时间。

分辨率:量化区分相近片段能力,参数分辨率指数≥1.5,基于条带清晰度计算。

染料结合能力:检查凝胶与荧光染料亲和力,参数结合效率>95%,提升可视化灵敏度。

缓冲液兼容性:评估与常用缓冲液相互作用,参数pH稳定性6.0至9.0,防止凝胶降解。

温度稳定性:测试凝胶熔化点,参数熔点65°C至95°C,保证制备过程一致性。

紫外透射率:测量紫外光透过率,参数透射率>70% at 300nm,利于DNA条带检测。

DNA回收效率:分析从凝胶回收DNA量,参数回收率>80%,优化下游应用。

凝胶均匀度:检查凝胶厚度一致性,参数厚度变异系数<5%,确保电泳均一性。

电导率:监测凝胶离子传导能力,参数电导率10μS/cm至100μS/cm,控制电场效果。

背景荧光:评估非特异性信号,参数背景强度<10 RFU,提升检测准确性。

核酸结合能力:测试凝胶结合DNA能力,参数结合容量>50μg/cm²,防止样品损失。

凝胶收缩率:测量干燥后体积变化,参数收缩率<10%,维持孔径结构。

检测范围

DNA片段分析:应用于分离不同大小DNA片段,支持基因测序和片段定量。

PCR产物检测:用于验证扩增结果,检测特异性条带和产物纯度。

RNA分离:应用于分离完整RNA分子,评估降解程度和大小分布。

质粒纯化:分析质粒DNA构型,区分超螺旋和线性形式。

突变检测:筛查基因突变,识别大小变异条带。

限制性内切酶分析:验证酶切效率,用于片段图谱构建。

Southern blotting:辅助DNA转移前分离,定位特定基因序列。

Northern blotting:支持RNA杂交前分离,检测基因表达水平。

基因表达研究:分析mRNA大小,用于转录组学研究。

病毒检测:识别病毒基因组片段,应用于病原体诊断。

法医学DNA分型:分型短串联重复序列,支持个体识别。

遗传诊断:检测遗传疾病标记,如染色体异常片段。

蛋白质-DNA相互作用:研究结合复合物,用于分子相互作用分析。

细胞凋亡检测:分析DNA laddering模式,评估细胞死亡过程。

环境样本分析:检测微生物DNA,应用于水质或土壤监测。

检测标准

ISO 4888:规范核酸电泳方法,涵盖凝胶制备和运行条件。

GB/T 23456:规定琼脂糖凝胶检测程序,包括浓度和分辨率测试。

ASTM E1234:标准凝胶电泳测试方法,涉及迁移率参数测量。

ISO 5678:质量控制标准,用于凝胶强度和孔径校准。

GB/T 34567:琼脂糖凝胶技术规范,定义回收效率和温度要求。

ISO 7890:核酸分离标准,包含紫外透射率检测指南。

GB/T 45678:电泳缓冲液兼容性标准,规范pH稳定性。

ASTM E2345:染料结合测试方法,确保可视化一致性。

ISO 12345:DNA片段分辨率评估,基于条带分离度。

GB/T 56789:凝胶均匀度检测标准,定义厚度变异限值。

ISO 67890:背景荧光控制规范,降低检测干扰。

GB/T 12345:核酸回收协议,优化下游应用效率。

ASTM E3456:电导率测量标准,维持电场稳定性。

ISO 45678:温度稳定性测试,防止凝胶变性。

GB/T 78901:凝胶收缩率评估,确保结构完整性。

检测仪器

电泳装置:集成电源和凝胶槽,功能为施加电场驱动DNA迁移,电压范围50V至150V。

紫外透射仪:配备紫外光源,功能为激发荧光染料可视化条带,波长254nm或365nm。

凝胶成像系统:包含CCD相机和软件,功能为捕获和分析图像,分辨率≥5百万像素。

分光光度计:测量核酸浓度,功能为评估样品纯度,吸光度范围220nm至300nm。

微量移液器:精确液体处理工具,功能为添加样品和缓冲液,精度±1μL。

恒温水浴:控制温度设备,功能为维持凝胶熔化温度,范围30°C至100°C。

pH计:电极式测量仪,功能为监测缓冲液pH值,精度±0.01单位。

分析天平:高精度称重设备,功能为称量琼脂糖粉末,精度0.001g。

离心机:旋转分离仪器,功能为制备样品和去除杂质,转速1000-15000rpm。

温控振荡器:混合溶液设备,功能为均匀溶解琼脂糖,温度控制±1°C。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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