诺如病毒检测

检测项目

病毒核酸提取：采用磁珠法或离心柱法，回收率≥95%，纯化后OD260/OD280比值为1.8-2.0。

实时荧光定量PCR：靶向诺如病毒ORF1-ORF2区域，检测灵敏度≤10拷贝/μL，特异性>99%。

逆转录PCR：用于RNA病毒检测，逆转录效率≥90%，扩增产物长度为150-200bp。

酶联免疫吸附试验：检测病毒衣壳蛋白抗原，灵敏度≤1ng/mL，线性范围0.5-50ng/mL。

免疫层析试纸条：快速定性检测，操作时间≤10分钟，检测限≤5×10³病毒颗粒/mL。

细胞培养分离：使用猪肾细胞系，培养周期5-7天，病毒滴度测定范围10¹-10⁶ TCID₅₀/mL。

电子显微镜观察：分辨率≤0.1nm，可视化病毒颗粒形态，直径27-32nm。

全基因组测序：基于二代测序技术，覆盖率≥99%，序列精度>99.9%。

血清中和试验：测定中和抗体滴度，稀释梯度1:10-1:640，抑制率>50%为阳性。

环境样本浓缩：采用超滤法，浓缩倍数100倍，回收率≥80%。

荧光原位杂交：定位病毒RNA，灵敏度≤100拷贝/细胞，杂交温度42°C。

病毒颗粒计数：利用纳米粒子追踪分析，粒径分布范围20-35nm，计数精度±5%。

生物发光检测：基于荧光素酶报告基因，光强度与病毒量呈线性相关(R²≥0.99)。

抗原表位测绘：使用肽芯片，识别关键表位，结合亲和力KD≤10⁻⁸M。

稳定性测试：评估病毒在环境中的存活率，温度范围4-37°C，时间0-72小时。

检测范围

贝类海鲜：牡蛎、蛤蜊等高风险食品，易积累病毒颗粒。

饮用水源：地表水、地下水样本，监测供水系统污染风险。

废水处理厂：进出水流体，追踪社区感染源。

食品加工表面：切板、刀具等接触区，评估交叉污染。

医院环境：门把手、病床栏杆，控制院内传播。

学校设施：食堂餐具、儿童玩具，预防群体爆发。

公共卫生间：马桶座、洗手池，评估卫生状况。

冰制品：商业冰块、冰淇淋，冷链储存风险点。

软质水果：草莓、覆盆子，表面粗糙易吸附病毒。

航空器供水：飞机水箱系统，确保旅行安全。

农场土壤：灌溉区泥土，检测农业污染源。

游泳池水：公共泳池样本，监控娱乐场所卫生。

食品包装材料：塑料、纸盒表面，评估运输环节风险。

婴儿配方奶粉：粉末状产品，筛查加工污染。

动物粪便：猪、牛排泄物，研究人畜共患病源。

检测标准

ISO/TS 15216-1:2017 食品和动物饲料中病毒的检测方法。

ISO/TS 15216-2:2019 食品中诺如病毒定量检测指南。

GB/T 4789.31-2019 食品卫生微生物学检验方法。

GB/T 5750.12-2022 生活饮用水标准检验方法。

ASTM E2888-19 环境表面病毒采样标准规程。

ISO 22174:2005 微生物分子检测通用要求。

GB/T 39668-2020 病毒核酸检测技术规范。

ISO 16140-4:2020 微生物方法验证协议。

GB/T 16886.16-2016 医疗器械生物相容性测试。

ASTM D6503-19 水样病毒浓缩标准方法。

ISO 10705-1:1995 水中病毒检测通用原则。

GB/T 18204.4-2013 公共场所卫生检验方法。

ISO 11731-2:2004 食品微生物检验定量方法。

GB/T 27405-2008 实验室质量控制规范。

ASTM F3151-15 表面消毒剂病毒杀灭测试。

检测仪器

实时荧光定量PCR仪：Bio-Rad CFX96系统，用于核酸扩增和荧光信号检测，支持多通道同步分析。

高速离心机：Beckman Coulter Allegra X-15R，转速达15000 rpm，用于样本沉淀和分离。

核酸提取仪：Thermo Fisher KingFisher Flex，自动化磁珠法提取病毒RNA，通量96样本/小时。

酶标仪：PerkinElmer EnVision，波长范围200-1000 nm，定量ELISA结果。

超净工作台：ESCO Class II A2，提供无菌环境，防止样本交叉污染。

电子显微镜：Hitachi HT7800，高分辨率成像，直接观察病毒颗粒形态。

恒温培养箱：Memmert INCOmed，温度控制精度±0.1°C，用于病毒细胞培养。

纳米粒子分析仪：Malvern NanoSight NS300，实时追踪病毒颗粒数量和大小分布。

自动移液系统：Hamilton Microlab STAR，精准加样，减少人为误差。

荧光显微镜：Olympus BX53，配备荧光滤镜，用于原位杂交可视化。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。