蛋白免疫荧光检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-07-01  

蛋白免疫荧光检测是一种基于抗原-抗体特异性结合原理的免疫学技术,利用荧光标记的二抗可视化目标蛋白的表达和定位。适用于细胞固定、组织切片等样本类型,关键要点包括抗原修复优化、抗体孵育条件控制和荧光信号定量分析,确保高灵敏度和特异性。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

目标蛋白表达量检测:定量目标蛋白在样本中的丰度,荧光强度检测范围0.01-100 RFU,灵敏度达0.1 pg/μg蛋白。

共定位分析:评估两个或多个蛋白在同一亚细胞结构的共表达,参数包括Pearson相关系数阈值≥0.8和Mander重叠系数0.5-1.0。

亚细胞定位分析:确定蛋白在细胞核、细胞质或膜上的分布,检测精度±2 μm空间分辨率。

蛋白磷酸化状态检测:识别磷酸化位点的激活状态,磷酸化特异性抗体结合效率95%-99%。

细胞周期相关蛋白检测:分析周期蛋白表达与细胞分裂阶段,荧光标记同步率误差<5%。

凋亡相关蛋白检测:量化凋亡标志物如caspase-3的表达,检测限0.05 ng/mL样本浓度。

病毒蛋白入侵分析:监测病毒蛋白在宿主细胞的定位,特异性结合率≥98%。

信号转导通路蛋白检测:跟踪信号分子如MAPK的表达变化,时间分辨率1分钟间隔。

干细胞标记蛋白鉴定:识别多能性标志物如Nanog的表达,荧光背景噪音控制<10 RFU。

药物靶点蛋白结合检测:评估药物与目标蛋白的相互作用,结合常数Kd测量范围0.1-100 nM。

膜蛋白表面表达检测:分析跨膜蛋白的定位,膜通透性优化参数孔径0.1-0.5 μm。

细胞黏附蛋白分析:量化整合素等蛋白表达,黏附强度检测误差±3%。

炎症因子蛋白监测:检测IL-6等因子表达水平,动态范围1-1000 pg/mL。

检测范围

癌细胞组织切片:用于癌症研究中蛋白表达异常的病理分析,样本厚度5-10 μm。

转基因动物脑组织:适用于神经退行性疾病模型的蛋白定位研究,固定时间24小时内。

免疫细胞培养物:分析T细胞、B细胞表面受体表达,细胞密度优化至1×10^6/mL。

胚胎干细胞分化样本:监测分化过程中多能性蛋白变化,培养周期7-14天。

植物病原体感染叶片:检测病原相关蛋白在植物组织的分布,切片制备用冷冻法。

微生物生物膜形成样本:评估细菌蛋白在生物膜中的表达,成像深度0-50 μm。

临床活检标本:用于疾病诊断如自身免疫性疾病,样本保存温度-80°C。

生物制药中间体:监控重组蛋白表达纯度,缓冲液pH范围7.0-7.4。

环境微生物群落样本:分析微生物蛋白在土壤或水体中的分布,离心速度3000 rpm。

食品病原体检测样本:识别食源性疾病相关蛋白,样本预处理时间≤1小时。

病毒载体转染细胞:研究病毒蛋白在基因治疗中的定位,转染效率控制65%-85%。

药物筛选模型细胞:评估候选药物对靶点蛋白的影响,孵育时间24-48小时。

寄生虫感染组织:检测寄生虫特有蛋白表达,染色时间优化至30分钟。

检测标准

依据ISO 15189:2012医学实验室质量和能力具体要求执行荧光显微术。

GB/T 16886.10-2017医疗器械生物学评价中免疫荧光检测规范。

ASTM E2520-15荧光显微术标准指南用于成像质量控制。

ISO 10993-5:2009医疗器械体外细胞毒性试验的免疫荧光应用。

GB/T 27417-2017合格评定化学分析方法确认指南涉及荧光定量。

ISO 9001:2015质量管理体系要求覆盖检测流程标准化。

GB/T 37864-2019生物样本库质量和能力通用要求相关样本处理。

ASTM F1980-21医疗器械无菌包装中荧光标记验证标准。

ISO/IEC 17025:2017检测和校准实验室能力通用要求。

GB/Z 39502-2020实验动物环境及设施中荧光检测应用规范。

检测仪器

倒置荧光显微镜:用于高分辨率观察和记录样本荧光信号,功能包括多通道成像和Z轴层扫。

激光共聚焦显微镜:提供三维重建和共定位分析,功能为减少背景噪音,分辨率达0.2 μm。

流式细胞仪:实现高通量细胞表面蛋白定量,功能包括多参数检测和细胞分选,流速1 μL/s。

微孔板荧光阅读器:用于批量样本的荧光强度测量,功能涵盖96孔板检测,波长范围300-700 nm。

全自动免疫组化染色系统:标准化抗体孵育和洗涤步骤,功能为减少人为误差,处理速度20样本/小时。

低温冷冻切片机:制备均匀组织切片以保持蛋白活性,功能厚度调节1-30 μm,温度设定-20°C。

荧光光谱仪:分析荧光发射光谱以验证标记纯度,功能波长精度±1 nm,适用于抗体验证。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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