需氧菌梯度稀释检测

检测项目

样品预处理：研磨均质化处理，均质转速8000rpm±5%，时间30s

初始稀释液制备：无菌生理盐水稀释，体积误差≤1%，pH7.0-7.4

梯度稀释操作：十倍序列稀释，梯度范围10⁻¹至10⁻⁸，移液精度±2%

平板倾注培养：胰酪胨大豆琼脂培养基，注入量15-20mL/皿，温度45℃±1℃

培养条件控制：需氧环境，温度32.5℃±2.5℃，湿度≥40%，时长48-72h

菌落计数：菌落形成单位统计，识别阈值30-300CFU/皿，分辨率0.5log

阴性对照验证：无菌空白对照，允许零生长

阳性对照：金黄色葡萄球菌ATCC6538，回收率70-130%

菌种鉴定：革兰氏染色镜检，放大倍率1000X，形态学确认

结果计算：菌落数统计公式N=ΣC/[(n1+0.1n2)d]，报告单位CFU/g或CFU/mL

培养基适用性：促生长能力验证，接种量≤100CFU

稀释液灭菌验证：121℃湿热灭菌15min，无菌保证水平SAL≤10⁻⁶

检测范围

制药原料：化学合成原料药需氧菌总数控制，纯度验证

医用器械：植入物表面生物负载评估，灭菌验证

化妆品膏体：微生物限度检查，防腐效能测试

食品加工：冷链肉制品卫生指标监测，货架期预测

包装材料：无菌屏障系统完整性验证，浸提液分析

生物制品：细胞培养液污染检测，过程控制

饮用水系统：管道内壁生物膜定量评估，消毒周期制定

环境样本：洁净室表面微生物监测，动态级别确认

中药材：植物源性原料腐败菌定量，储存条件优化

饲料添加剂：益生菌产品竞争性需氧菌检测，活性评估

纺织制品：抗菌功能性面料效能验证，耐久性测试

化工产品：水性涂料防腐剂有效性验证，变质分析

检测标准

ISO 4833-1:2013 食品和饲料中微生物计数水平法

GB 4789.2-2022 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定

USP<61> 非无菌产品微生物限度检查

ASTM E2562-17 表面采样微生物收集与定量标准

ISO 11737-1:2018 医疗器械灭菌 微生物学方法

GB/T 16292-2010 医药工业洁净室悬浮粒子测试方法

EP 2.6.12 欧洲药典微生物计数方法验证

ISO 18593:2018 食品和动物饲料表面采样技术

GB 15979-2002 一次性卫生用品微生物指标

AOAC 966.23 食品中需氧平板计数官方方法

JJF 1847-2020 微生物标准菌株定量使用指南

检测仪器

拍击式均质器：不锈钢腔体400mL容量，实现样品无污染粉碎与初始悬浮液制备

电子移液系统：多通道8针设计，量程1-1000μL，保证梯度稀释体积精度误差≤0.5%

恒温培养箱：三面可视强化玻璃，温度均匀性±0.5℃，内置湿度传感器实时监控培养环境

菌落计数仪：2000万像素CMOS成像，AI辅助菌落识别算法，自动标记重叠菌落

生物安全柜：A2型层流保护，风速0.45m/s±10%，提供无菌操作环境防止交叉污染

pH计：复合电极自动温度补偿，分辨率0.01pH，确保稀释液酸碱度符合标准要求

高压蒸汽灭菌器：脉动真空技术，灭菌温度121℃±1℃，F0值实时记录

显微镜：油浸物镜100X，配备数码成像系统，用于可疑菌落形态学确认

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。