流式细胞细胞增殖检测

检测项目

DNA含量分析：采用碘化丙啶（PI）染色，检测波长488nm激发/617nm发射，分辨率±2%

细胞周期分布：测定G0/G1期、S期、G2/M期细胞比例，精度±0.5%

增殖指数计算：(S+G2/M)/(G0/G1+S+G2/M)×100%，重复性误差≤1.2%

凋亡细胞比率：AnnexinV-FITC/PI双染，凋亡细胞检出限0.1%

BrdU掺入量：抗BrdU抗体检测，荧光强度与DNA合成速率线性相关

CFSE荧光衰减：追踪分裂代数，衰减系数偏差≤3%

Ki-67抗原表达：PE标记抗体定量，阳性细胞识别阈值500MESF

磷酸化组蛋白H3：有丝分裂细胞标记，G2/M期特异性≥98%

线粒体膜电位：JC-1染料红绿荧光比，膜电位变化灵敏度5mV

氧化应激水平：DCFH-DA检测ROS，荧光强度与浓度线性范围0.1-100μM

检测范围

肿瘤细胞系：包括HeLa、MCF-7等上皮源癌细胞增殖动力学研究

免疫细胞分型：T/B淋巴细胞亚群增殖能力评估

干细胞培养：间充质干细胞定向分化过程中的周期停滞检测

药物筛选模型：化疗药物IC50值测定所需的增殖抑制率计算

组织工程材料：生物支架上细胞生长曲线绘制

辐射生物学：电离辐射后细胞周期阻滞效应量化

病毒感染研究：病毒载体转染后的细胞分裂速率监测

转基因生物：基因编辑细胞克隆扩增效率分析

毒理学测试：环境污染物致细胞周期紊乱评估

衰老机制研究：端粒酶活性与细胞倍增次数的相关性验证

检测标准

ISO13385:2015流式细胞术定量分析通则

GB/T39730-2020细胞DNA含量检测规范

ASTME3130-18流式细胞仪性能验证标准

EP2.7.31欧洲药典细胞计数与活力测定

GB/T35823-2018干细胞检测中增殖能力评估指南

ISO20391-2:2019细胞分析系统校准技术要求

GB/T42076.1-2022生物学样本制备流程规范

检测仪器

BDFACSCelesta：配置三激光十四色检测系统，实现多参数同步分析

BeckmanCytoFLEX：采用APD检测器，检测灵敏度达50FITC等效分子

SonyID7000：支持96孔板高通量检测，流速范围12-1000μL/min

MiltenyiMACSQuantVYB：集成自动进样器，支持每孔5000细胞最低样本量

AgilentNovoCyte3000RYB：配备405/488/640nm固态激光器，CV值稳定性≤2%

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。