明胶源性PCR检测

北检院检测中心  |  完成测试:  |  2025-08-04  

明胶源性PCR检测是一种分子生物学方法,用于鉴定明胶产品的物种来源。该检测基于DNA扩增技术,重点包括特异性引物设计、DNA提取纯度控制、扩增条件优化及结果分析。检测过程强调防污染措施和标准操作程序,确保高准确性和可靠性,适用于食品安全与药品质量控制领域。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

检测项目

DNA提取纯度检测:评估明胶样品中DNA的质量完整性。具体检测参数包括A260/A280比值范围1.8-2.0,蛋白质残留量低于0.05μg/μL。

物种特异性引物设计:针对不同动物来源设计引物序列。具体检测参数包括引物长度18-25bp,退火温度55-65°C。

PCR扩增效率测试:测量DNA扩增的准确性和一致性。具体检测参数包括扩增曲线Ct值范围15-35,扩增倍数误差±5%。

凝胶电泳分析:可视化扩增产物大小和纯度。具体检测参数包括DNA条带迁移距离,凝胶浓度1.5-2.0%琼脂糖。

实时荧光定量PCR:定量检测明胶DNA含量。具体检测参数包括荧光阈值设定,检测灵敏度达0.1pg/μL。

序列测序确认:验证扩增片段的物种特异性。具体检测参数包括序列相似度>98%,测序覆盖度100x。

阳性对照测试:确保检测系统功能正常。具体检测参数包括阳性样本扩增信号强度,反应效率≥90%。

阴性对照测试:检测潜在污染和假阳性。具体检测参数包括无扩增信号,背景噪声水平<5RFU。

灵敏度极限检测:确定最低可检测DNA浓度。具体检测参数包括检测限0.01ng/μL,稀释梯度测试。

特异性交叉反应测试:评估引物对不同物种的区分能力。具体检测参数包括交叉反应率<5%,物种鉴别准确率99%。

重复性验证:确保检测结果的一致性。具体检测参数包括变异系数CV<10%,三次重复测试。

抗基质干扰能力:评估复杂样品中的检测性能。具体检测参数包括回收率85-115%,基质效应因子<1.2。

检测范围

食品明胶:用于糖果、酸奶和果冻中的胶凝剂。

药用明胶:胶囊壳和片剂包衣的原材料。

化妆品明胶:护肤品和面膜中的增稠成分。

摄影明胶:胶片和相纸制造中的感光层。

工业明胶:胶水和粘合剂的生产基础。

动物饲料明胶:宠物食品的营养添加剂。

生物医学研究:细胞培养支架和组织工程材料。

法医学应用:物种鉴定和来源追溯分析。

宗教食品:清真和犹太认证产品验证。

疫苗生产:疫苗稳定剂和赋形剂成分。

艺术材料:绘画和雕塑中的粘结介质。

诊断试剂:体外诊断试剂的载体材料。

检测标准

ISO 21571:2005食品中转基因生物检测方法。

GB/T 22258-2008食品中动物源性成分定性PCR检测方法。

ASTM D6866生物基含量测定标准方法。

ISO 17025测试和校准实验室能力通用要求。

GB 4789.36-2016食品微生物学检验明胶酶活性测定。

ISO 24276食品中核酸提取和分析指南。

GB/T 27404-2008实验室质量控制规范分子生物学检测。

检测仪器

实时荧光定量PCR仪:用于DNA扩增和实时监测荧光信号变化。具体功能包括温度梯度控制,扩增曲线实时分析。

凝胶成像系统:可视化电泳结果并量化DNA条带。具体功能包括图像捕获,条带大小和强度测量。

离心机:分离样品组分和纯化DNA。具体功能包括转速调节,沉淀核酸回收。

分光光度计:测量DNA浓度和纯度。具体功能包括紫外吸光度测定,A260/A280比值计算。

热循环仪:执行PCR温度循环程序。具体功能包括退火和延伸步骤控制,扩增时间优化。

DNA提取仪:自动化提取核酸并去除杂质。具体功能包括样品裂解,缓冲液分配和纯化流程。

测序仪:确定DNA序列并进行物种比对。具体功能包括高通量测序,序列数据分析和报告生成。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验,获取相关数据资料;

出具检测报告。

北检(北京)检测技术研究院
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