封闭液圆二色谱检测

检测项目

摩尔椭圆度：反映封闭液中生物分子手性和二级结构的特征参数，为圆二色谱核心指标。测量范围-10000~+10000 deg·cm²/dmol，波长范围190~400nm，分辨率0.1nm。

CD信号强度：表示样品在特定波长下的圆二色性差异，用于定性分析封闭液对生物分子结构的影响。测量范围-100~+100 mdeg，扫描速度1~100nm/min，数据间隔0.1nm。

二级结构含量：通过CD谱拟合计算α-螺旋、β-折叠、无规卷曲等百分比，评估封闭液对生物分子构象的影响。拟合算法包括CONTIN、SELCON3、CDSSTR，误差范围±5%。

热力学稳定性：通过温度扫描CD谱测定生物分子变性温度（Tm），反映封闭液对其热稳定性的影响。温度范围4~95℃，升温速率0.5~5℃/min，Tm测定精度±0.5℃。

结合常数：通过CD信号随封闭液浓度变化曲线，计算生物分子与封闭液成分的结合亲和力。浓度范围0.1~10mg/mL，拟合模型为Langmuir等温式，误差范围±10%。

浓度依赖性CD变化：分析封闭液浓度对生物分子CD谱的影响，评估其浓度兼容性。浓度梯度设为0.1、0.5、1、2、5、10mg/mL，扫描次数3次/浓度，重复性RSD≤5%。

pH依赖性CD谱：测定不同pH条件下的CD谱，分析封闭液pH对生物分子结构的影响。pH范围2~12，缓冲液包括PBS、Tris-HCl、柠檬酸缓冲液，pH精度±0.1。

温度扫描CD谱：记录生物分子在升温过程中的CD信号变化，研究其变性过程。温度步长0.5℃，数据采集间隔1℃，持续时间30~120min。

时间分辨CD谱：监测生物分子与封闭液相互作用的动态过程，记录CD信号随时间的变化。时间范围0~1800s，时间分辨率0.1s，扫描波长222nm（α-螺旋特征峰）。

手性化合物含量：检测封闭液中手性杂质的含量，评估其对生物分子光学活性的影响。对映体过量（ee值）测量范围0~100%，检测限0.1%，波长210~250nm。

基线漂移：测定空白封闭液的CD信号，扣除背景干扰。基线噪声≤0.5mdeg，稳定时间≥30min。

可逆性分析：通过升温-降温循环CD谱，判断生物分子在封闭液中的构象可逆性。可逆性≥80%（与初始结构比较），循环次数3次。

检测范围

Western blot封闭液：包括脱脂奶粉、牛血清白蛋白（BSA）、酪蛋白等，检测其对抗体非特异性结合的抑制效果及对目标蛋白结构的影响。

ELISA封闭液：如血清、明胶、聚乙烯醇（PVA），分析其对酶标板的封闭效率及与抗原-抗体结合的兼容性。

免疫组化封闭液：正常山羊血清、驴血清、鱼皮明胶，评估其对组织切片中非特异性染色的阻断作用及对目标抗原的保护。

蛋白质芯片封闭液：封闭缓冲液（含BSA、Tween-20）、阻断剂（如酪蛋白水解物），检测其对芯片表面未结合位点的封闭效果及对蛋白质芯片检测灵敏度的影响。

核酸杂交封闭液：鲑鱼精DNA、地高辛封闭液、聚乙二醇（PEG），分析其对核酸探针非特异性杂交的抑制作用及对靶核酸结构的影响。

生物传感器封闭液：牛血清白蛋白（BSA）、聚赖氨酸（PLL）、羧甲基纤维素（CMC），评估其对传感器表面的封闭效率及对生物分子识别性能的影响。

细胞培养封闭液：胎牛血清（FBS）、血清替代物（如KnockOut™ Serum Replacement），检测其对细胞培养器皿的封闭效果及对细胞贴壁、生长的影响。

药物筛选封闭液：小分子化合物封闭液（如DMSO、甲醇）、天然产物提取物，分析其对药物靶点（如酶、受体）结构的影响及对筛选结果的干扰。

诊断试剂封闭液：抗原抗体封闭液（如HBsAg封闭液）、胶体金检测试剂封闭液，评估其对诊断试剂中非特异性反应的抑制作用及对检测准确性的影响。

疫苗生产封闭液：病毒样颗粒（VLP）封闭液、重组蛋白疫苗封闭液，检测其对疫苗抗原结构的保护及对免疫原性的影响。

流式细胞术封闭液：Fc受体封闭液（如抗CD16/CD32抗体）、BSA缓冲液，分析其对细胞表面Fc受体的封闭效果及对荧光抗体结合的特异性。

质谱分析封闭液：如含甘油、BSA的缓冲液，检测其对质谱样品的封闭效果及对蛋白质质谱信号的干扰。

检测标准

ASTM E2193-02(2018)：用圆二色谱法测定蛋白质二级结构的标准试验方法。

GB/T 35536-2017：生物大分子圆二色谱分析方法。

ISO 20341:2009：表面化学分析-圆二色谱法测定手性化合物的对映体过量。

ASTM E1951-98(2019)：用圆二色谱法测定光学活性化合物的标准试验方法。

GB/T 32682-2016：纺织品 圆二色谱法测定手性化合物含量。

ASTM E2228-02(2018)：用圆二色谱法测定多肽二级结构的标准试验方法。

ISO 15528:2007：水质-圆二色谱法测定水中的光学活性化合物。

GB/T 38457-2020：化妆品中螺内酯的测定 圆二色谱法。

ASTM E2322-03(2018)：用圆二色谱法测定聚合物手性的标准试验方法。

GB/T 29858-2013：生物样品中蛋白质的测定 圆二色谱法。

ASTM E2481-05(2018)：用圆二色谱法测定生物分子热力学稳定性的标准试验方法。

GB/T 36946-2018：生物制品中残留宿主细胞蛋白质的测定 圆二色谱法。

检测仪器

圆二色谱仪：核心检测仪器，通过测量左旋和右旋圆偏振光吸收差异获取CD谱。在封闭液检测中，用于测定摩尔椭圆度、CD信号强度、二级结构含量等参数，波长范围190~800nm，分辨率0.1nm，扫描速度1~100nm/min。

温度控制器：与圆二色谱仪联用实现温度扫描。在封闭液检测中，用于测定生物分子变性温度（Tm）、热力学稳定性及温度依赖性CD变化，温度范围4~95℃，升温速率0.5~5℃/min，温度精度±0.1℃。

自动样品进样器：可容纳10~50个样品池，实现无人值守批量检测。在封闭液检测中，用于处理不同浓度、pH的封闭液样品，提高效率，进样精度±1μL，样品池容量1~5mL。

圆二色光谱数据处理软件：具备二级结构拟合、温度扫描分析、结合常数计算功能。在封闭液检测中，用于分析CD谱数据，输出α-螺旋、β-折叠含量，计算结合常数及变性温度，支持CONTIN、SELCON3、CDSSTR算法。

紫外-可见分光光度计：辅助检测仪器，用于测定封闭液中生物分子浓度。在封闭液检测中，作为CD检测前置步骤确保样品浓度符合要求，浓度范围0.1~10mg/mL，吸光度范围0~2.0AU，分辨率0.001AU。

样品池：盛放封闭液样品的光学容器，分为石英和塑料材质。在封闭液检测中，根据样品类型选择（如蛋白质用石英池），光程1~10mm，透光率≥90%（200nm处）。

氮气发生器：提供惰性气体吹扫样品室，防止氧气和水分影响。在封闭液检测中，用于保护易氧化生物分子（如含巯基蛋白质），氮气纯度≥99.99%，流量1~5L/min。

电子天平：用于称量封闭液中的固体成分（如BSA、脱脂奶粉）。在封闭液检测中，确保样品浓度准确，称量范围0.1mg~100g，精度0.1mg。

pH计：用于测定封闭液的pH值。在封闭液检测中，为pH依赖性CD谱检测提供基础数据，pH范围0~14，精度±0.01pH。

磁力搅拌器：用于混合封闭液中的成分（如溶解BSA、调整pH）。在封闭液检测中，确保样品均匀，搅拌速度0~2000rpm，搅拌头材质为聚四氟乙烯。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。