非转基因作物PCR检测

检测项目

DNA提取纯度检测：评估样品DNA完整性及杂质去除效果。具体参数：A260/A280比值（1.8-2.0），A260/A230比值（>2.0），凝胶电泳条带完整性。

CaMV 35S启动子筛查：检测花椰菜花叶病毒35S启动子序列。具体参数：扩增产物189bp，退火温度55±2℃，循环数≤40。

NOS终止子筛查：检测根癌农杆菌胭脂碱合成酶终止子序列。具体参数：扩增产物180bp，退火温度58±2℃，特异性验证。

CP4-EPSPS基因检测：筛查抗草甘膦转基因常用外源基因。具体参数：扩增产物173bp，Mg²⁺浓度2.0mM，产物熔解曲线分析。

Bt Cry1Ab基因检测：鉴定抗虫转基因作物的目标基因。具体参数：扩增产物203bp，引物特异性验证，阴性对照设置。

内源基因对照检测：验证样品DNA质量及扩增有效性。具体参数：物种特异性基因（如玉米Zein基因104bp，大豆Lectin基因118bp），Ct值≤30。

DNA浓度定量：精确测定模板DNA含量。具体参数：荧光定量法，动态范围0.1-100ng/μL，RSD≤5%。

引物二聚体评估：监控PCR体系特异性。具体参数：熔解曲线分析60-75℃峰形，无杂峰干扰。

扩增效率验证：确保PCR反应可靠性。具体参数：标准曲线斜率（-3.1至-3.6），R²值≥0.99。

电泳分离鉴定：确认扩增产物片段大小。具体参数：琼脂糖浓度2-3%，电压5V/cm，Marker参照。

实时荧光定量PCR：精准测定目标基因拷贝数。具体参数：Ct值重复性偏差≤0.5，荧光阈值设定。

检测范围

大豆原料及制品：生大豆、豆粕、豆浆、酱油等初级及深加工产品转基因成分筛查。

玉米籽粒及衍生品：玉米粉、淀粉、糖浆、饲料原料的外源基因检测。

水稻种子与米制品：稻谷、精米、米糠、米粉的转基因品系鉴定。

油菜籽与食用油：菜籽原油、精炼油、油粕的转基因成分分析。

小麦及其加工品：面粉、麸皮、谷朊粉中外源基因片段检测。

棉花纤维及棉籽：棉绒、棉籽粕、棉籽油的转基因品系验证。

番茄鲜果与酱料：新鲜番茄、番茄酱、番茄汁的NOS/35S元件筛查。

马铃薯原料：薯块、淀粉、全粉的PAT基因检测。

动物饲料配方：配合饲料、预混料中植物源性转基因成分追溯。

食品深加工产品：饼干、婴儿辅食、膨化食品的复合基质DNA提取检测。

种子资源库样本：种质资源保存库内种子的转基因背景核查。

进口农产品：海关监管类粮谷产品的快速通关筛查。

检测标准

GB 19495.3-2004 转基因产品检测 核酸提取纯化方法

GB/T 19495.4-2018 转基因植物产品实时荧光PCR检测方法

NY/T 672-2003 转基因植物及其产品检测 通用要求

ISO 21569:2005 食品 转基因生物检测 核酸提取方法

ISO 21570:2005 食品 转基因生物定量检测 核酸提取方法

ENGL 010203 欧盟转基因检测实验室 35S启动子筛查方法

AOAC Official Method 2004.04 转基因玉米检测方法

农业部1485号公告 转基因植物用标准物质研制技术规范

GB/T 33526-2017 基因检验实验室技术要求

SN/T 1196-2012 进出境转基因大豆检测方法

检测仪器

冷冻研磨仪：采用液氮低温破碎样品细胞结构，保障大分子DNA完整性，处理量0.1-5g。

核酸提取工作站：磁珠法自动化分离纯化DNA，通量≥96样本/次，交叉污染率<0.1%。

紫外分光光度计：测定DNA浓度与纯度，检测波长260nm/280nm，光程1mm。

梯度PCR仪：实现退火温度优化，控温精度±0.1℃，升温速率4℃/秒。

实时荧光定量PCR系统：监测扩增过程荧光信号，通道数≥4，温控均一性±0.2℃。

电泳成像系统：分离及记录扩增产物，紫外透射波长302nm，像素≥500万。

超微量核酸分析仪：纳升级样本浓度检测，检测下限0.5ng/μL。

生物安全柜：提供PCR产物操作屏障环境，洁净等级CLASS II。

高压灭菌器：实验耗材灭菌处理，工作温度121-134℃，压力0.22MPa。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。