蛋白质过氧化羰基化检测

检测项目

蛋白质羰基含量测定：基于羰基与二硝基苯肼的衍生反应，通过比色法或荧光法测定总羰基含量，检测限1nmol/mg蛋白。

羰基化位点定位分析：采用质谱技术解析特定氨基酸残基（赖氨酸/精氨酸）的氧化修饰位点，分辨率达0.1Da。

2,4-二硝基苯肼结合物检测：定量检测DNPH衍生化产物浓度，测量范围0.05-5µmol/L。

丙二醛修饰蛋白质定量：针对脂质过氧化产物与蛋白质的交联反应，HPLC检测精度±3%。

蛋白质氧化断裂程度测定：通过SDS-PAGE电泳分析蛋白质聚合或碎片化程度，最小检出片段10kDa。

抗氧化能力关联测试：测定还原型谷胱甘肽水平，评估其对羰基化的抑制效应，重复性RSD<5%。

特异性羰基抗体识别：采用免疫印迹法鉴定特定蛋白的羰基化状态，灵敏度0.1ng蛋白。

氧化应激标志物联检：同步检测8-羟基脱氧鸟苷等DNA氧化产物，交叉干扰率<2%。

酶活性抑制率测定：分析羰基化对超氧化物歧化酶活性的影响，温控精度±0.2℃。

动态氧化过程监测：实时跟踪H₂O₂诱导的羰基化动力学，时间分辨率0.5min。

检测范围

生物制药制品：单克隆抗体、重组蛋白药物等生物制剂的氧化稳定性评估。

食品蛋白质原料：乳清蛋白、大豆分离蛋白等食品添加剂的质量控制。

临床诊断样本：血清、血浆及组织匀浆液中的氧化应激生物标志物分析。

环境毒理研究材料：污染物暴露条件下水生生物蛋白质氧化损伤监测。

农业育种材料：干旱或盐胁迫环境下作物种子蛋白质氧化状态检测。

化妆品活性成分：胶原蛋白、弹性蛋白等功效成分的氧化降解研究。

营养补充剂：蛋白粉、氨基酸制剂在储存过程中的氧化程度判定。

基础医学研究样本：细胞培养物、离体器官的氧化损伤机制研究模型。

法医病理检材：陈旧性生物样本的蛋白质氧化程度与时间关联分析。

兽医诊断材料：畜禽疾病状态下组织蛋白质氧化应激响应评估。

检测标准

ISO 10993-18 医疗器械生物学评价中材料降解产物化学表征

ASTM F2315 蛋白质稳定性的标准测试指南

GB/T 34003.1 蛋白质制品中氧化改性物质测定通则

EN ISO 21572 食品中蛋白质免疫化学检测方法

GB 5009.124 食品中氨基酸的测定

JIS K 3850-3 空气中蛋白质污染物检测方法

AOAC 994.12 食品中蛋白质氧化产物测定

IEC 62321-8 电工产品中特定物质测定

GB/T 38122 生物样本中氧化应激标志物检测

EP 2.5.33 欧洲药典蛋白质修饰检测规范

检测仪器

紫外可见分光光度计：测量二硝基苯腙衍生物在370nm特征吸收峰，波长精度±0.5nm。

荧光分光光度计：检测羰基化蛋白质在480nm发射荧光强度，激发波长360nm。

高效液相色谱仪：分离DNPH衍生化产物，色谱柱温控范围4-40℃。

高分辨质谱仪：精确测定羰基化肽段分子量，质量精度<3ppm。

多功能酶标仪：进行96孔板微孔酶联免疫吸附测定，光学检测通道≥4个。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。