真菌几丁质酶检测

检测项目

几丁质酶活性（以胶体几丁质为底物）：测定真菌几丁质酶降解胶体几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖的能力，检测范围0.1~100U/mL，精度±5%。

几丁质酶蛋白含量：采用Bradford法或ELISA法定量真菌样本中几丁质酶的蛋白总量，检测下限0.01μg/mL，线性范围0.01~10μg/mL。

酶促反应最适pH：测定真菌几丁质酶活性最高时的pH值，pH范围3.0~10.0，梯度0.5，重复性±0.1pH。

酶促反应最适温度：测定真菌几丁质酶活性最高时的温度，温度范围20~80℃，梯度5℃，重复性±1℃。

底物特异性（对不同几丁质衍生物）：评估真菌几丁质酶对胶体几丁质、壳聚糖、几丁质粉等底物的降解能力，以相对活性表示（以胶体几丁质为100%），误差±3%。

酶稳定性（热稳定性）：测定真菌几丁质酶在60℃下保温不同时间后的剩余活性，时间点0、15、30、60、120min，剩余活性计算精度±2%。

抑制剂敏感性（对EDTA、金属离子）：检测EDTA（0~10mM）、Cu²⁺（0~5mM）等抑制剂对真菌几丁质酶活性的抑制率，抑制率计算范围0~100%，精度±4%。

分子量测定（SDS-PAGE）：通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析真菌几丁质酶的分子量，分离范围10~200kDa，分辨率1kDa。

等电点（IEF-PAGE）：采用等电聚焦电泳测定真菌几丁质酶的等电点，pH范围3.0~10.0，分辨率0.1pH。

几丁质酶基因表达量（qPCR）：通过实时荧光定量PCR检测真菌样本中几丁质酶基因的相对表达量，Ct值重复性±0.2，线性范围10¹~10⁷拷贝。

检测范围

农业生物防治菌株：如木霉菌、青霉菌等生防真菌菌株，检测其几丁质酶活性以评估对植物病原真菌的抑制能力。

食品防腐用真菌酶制剂：如食品级真菌几丁质酶制剂，检测其活性及稳定性以确保在食品保鲜中的效果。

医药用酶制剂原料：如用于制备抗真菌药物的真菌几丁质酶，检测其纯度、活性及毒性相关指标。

饲料添加剂：含真菌几丁质酶的饲料添加剂，检测其酶活性以评估对动物肠道健康的改善作用。

环境真菌样本：如土壤、水体中的真菌分离株，检测几丁质酶活性以研究其在环境有机物降解中的角色。

真菌发酵产物：如真菌发酵液中的几丁质酶粗提物，检测其活性及杂质含量以指导下游纯化工艺。

植物内生真菌：如与植物共生的内生真菌，检测其几丁质酶活性以分析其对植物抗逆性的贡献。

食品污染真菌：如食品中污染的镰刀菌、曲霉等，检测其几丁质酶活性以评估其降解食品成分的能力。

真菌生物肥料：含真菌几丁质酶的生物肥料，检测其酶活性以确保对土壤中几丁质类有机物的分解效果。

医药真菌菌株：如用于生产抗生素的真菌菌株，检测其几丁质酶活性以评估菌株的代谢状态。

检测标准

GB/T 38061-2019 几丁质酶活性测定方法（分光光度法）：规定了用分光光度法测定几丁质酶活性的原理、试剂、仪器及步骤。

ISO 20128:2017 食品添加剂 真菌几丁质酶 活性测定：适用于食品添加剂中真菌几丁质酶活性的测定。

NY/T 2064-2011 微生物农药 木霉菌剂 几丁质酶活性测定：针对农业用木霉菌剂中的几丁质酶活性检测。

GB/T 23527-2009 蛋白酶制剂 酶活测定方法：部分条款适用于几丁质酶等水解酶的活性检测（需调整底物）。

ASTM D7976-2014 生物燃料中酶活性测定标准方法：可参考用于真菌几丁质酶在生物燃料生产中的活性检测。

JIS K 3602-1990 工业用酶制剂 通用试验方法：包含酶活性、蛋白含量等指标的检测方法。

QB/T 4483-2013 食品工业用酶制剂 通则：规定了食品工业用真菌几丁质酶的质量要求及检测方法。

ISO 16128:2017 天然化妆品原料 真菌来源成分 几丁质酶含量测定：适用于化妆品中真菌几丁质酶的检测。

GB/T 1886.174-2016 食品添加剂 几丁质酶：规定了食品添加剂几丁质酶的技术要求及检测方法。

EPA Method 8260B 挥发性有机物测定：部分条款可用于几丁质酶降解产物的分析（如N-乙酰氨基葡萄糖）。

检测仪器

分光光度计：用于几丁质酶活性测定（分光光度法），检测波长540nm，吸光度范围0~2.0A，精度±0.001A。

实时荧光定量PCR仪：用于几丁质酶基因表达量检测，支持SYBR Green和TaqMan探针法，检测通道4个以上，灵敏度10¹拷贝。

蛋白质电泳系统（SDS-PAGE/IEF-PAGE）：用于几丁质酶分子量及等电点测定，凝胶浓度8%~15%可调，电压范围10~300V，电流范围1~50mA。

酶标仪：用于ELISA法测定几丁质酶蛋白含量，检测波长450nm，微孔板类型96/384孔，线性范围0.1~10μg/mL。

恒温振荡器：用于酶促反应孵育，温度范围20~60℃，振荡频率100~2000rpm，振幅5~20mm，温度精度±0.5℃。

高速离心机：用于真菌样本预处理（如提取酶液），转速范围1000~15000rpm，最大离心力20000×g，容量1.5~50mL。

pH计：用于调节酶促反应体系pH，测量范围0~14pH，精度±0.01pH，温度补偿范围0~60℃。

电子天平：用于称量底物及试剂，最大称量200g，最小分度值0.1mg，线性误差±0.2mg。

超净工作台：用于真菌样本处理及酶制剂纯化，洁净等级ISO 5级，平均风速0.3~0.5m/s，噪声≤60dB。

冷冻干燥机：用于几丁质酶制剂的干燥保存，冷凝温度-50℃以下，真空度≤10Pa，干燥时间6~24h。

检测流程

线上咨询或者拨打咨询电话;

获取样品信息和检测项目;

支付检测费用并签署委托书;

开展实验，获取相关数据资料;

出具检测报告。